Оглавление темы "Аэробные грамотрицательные кокки. Нейссерии. Гонорея. Менингит.":

Аэробные грамотрицательные кокки и коккобактерии включены в семейство Neisseriaceae отдела Gracilicutes.

Его образуют роды Neisseria, Acinetobacter, Moraxella и Kingella. Все виды семейства являются обитателями слизистых оболочек теплокровных. Каждый род включает бактерии , выделяемые у человека при различных поражениях, а также сапрофитические виды.

Общие признаки бактерий этой группы:
способны расти в присутствии кислорода,
представлены неподвижными диплококками и короткими палочками, отрицательно окрашивающимися по Граму,
спор не образуют.

Нейссерии. Свойства нейсерий. Ферментация углеводов нейсериями.

Род назван в честь немецкого дерматовенеролога А. Найссера, открывшего возбудителя гонореи. Род Neisseria образуют неподвижные аэробные или факультативно анаэробные споронеобразующие грамотрицательные диплококки .

Некоторые виды нейсерий имеют капсулу и микроворсинки.

Нейссерии - каталаза-, цитохром- и оксидаза-положительны, некоторые виды синтезируют жёлтые каротинондные пигменты. Большинство нейссерий неприхотливы, но некоторые виды непосредственно после посева приобретают сложные пищевые потребности, необходимые для роста (позднее растут на простых средах определённого состава); отдельные виды проявляют гемолитическую активность. Оптимальная температура 35-37 °С; оптимальный рН 6,0-8,0. Патогенными для человека свойствами обладают N. gonorrhoeae (гонококк) и N. meningitidis (менингококк).

У человека также выделяют непатогенные нейсерии N. sicca, N.flavescens, N. perflava, N. mucosa и N. lactamica, вызывающие у лиц с иммунодефицитами оппортунистические поражения.

На ранних этапах микробиологической диагностики нейсерий эти виды можно ошибочно принять за патогенные.

Дифференцировка патогенных и непатогенных нейссерий основана на различиях в ферментации углеводов.

Болезнетворные бактерии наносят серьезный вред организму, однако на ранней стадии распространения они легко поддаются лечению. Грамположительные и грамотрицательные диплококки могут привести к развитию различных заболеваний, поэтому диагностику и терапию проводит исключительно врач.

Представляют собой болезнетворные бактерии, которые могут быть обнаружены в организме мужчин и женщин. Самая распространенная причина появления – половой контакт с инфицированным партнером.

Первичное заражение происходит в основном при несоблюдении гигиенических норм интимной гигиены.

Бактерии обладают сферическими и бобовыми формами, могут сливаться в пары и, в редких случаях образуют цепочки. Диплококки разделяются на грамположительные и грамотрицательные типы. Они, в свою очередь делятся на несколько видов и проявляются у человека преимущественно в среднем и подростковом возрасте.

Диплококки

В группе риска находятся люди с пониженным иммунитетом и представители обоих полов, которые часто сменяют половых партнеров. У детей заболевание встречается редко, поэтому специалисты их в зону риска не относят. Однако профилактический осмотр у специалистов ребенку тоже рекомендован.

Появление грамположительных диплококков в мазке

При проведении лабораторных исследований в мазке пациента могут быть обнаружены грамположительные . Паниковать сразу не стоит, большинство инфекций на ранней стадии проявления быстро поддаются лечению и не оставляют за собой последствий.

Отмечается, что большая часть патогенных бактерий относится к типу грамположительных . Однако, только шесть из них могут нанести серьезный вред человеческому организму.

В группе риска появления инфекции относятся люди, у которых по каким-либо причинам произошел гормональный сбой . А также мужчины и женщины, которые подвержены беспорядочным половым связям.

Грамположительные диплококки в мазке у женщин и мужчин выявляются довольно быстро по той причине, что их концентрация быстро увеличивается сразу после заражения . Полезные бактерии уничтожаются болезнетворными и начинается распространение инфекции.

К самым часто диагностируемым видам бактерий относятся стрептококки, стафилококки и пневмококки.

Очень важно выявить какой именно вид бактерии появился у больного, потому что каждый из них указывает на определенные заболевания. Неквалифицированная диагностика может привести к катастрофическим последствиям для пациента.

По этой причине лабораторные исследования должны производиться исключительно в проверенных клиниках.

Самостоятельная постановка диагноза и тем более начало курса терапии чаще всего наносят больше вреда, чем пользы. Происходит это по той причине, что у многих заболеваний схожи отдельные симптомы, но требуют они различного лечения.

Грамположительные диплококки могут быть устойчивы к определенной группе препаратов, поэтому при назначении лечения врач всегда учитывает не только индивидуальные особенности пациента, но и этот фактор.

Самые распространенные грамположительные диплококки

Стрептококки, стафилококки и пневмококки считаются одними из самых распространенных видов гонококков, которые проявляются в организмах мужчин и женщин. При этом, эти бактерии указывают на кардинально различные заболевания.

Стрептококки представляют собой грамположительных бактерий, которые обитают в пищеварительных и дыхательных путях. К заражению в одинаковой мере склонны как мужчины, так и женщины.

Приведенный тип грамположительных диплококков в мазке у мужчины чаще всего появляется при пневмонии и других заболеваниях верхний дыхательных путей. Однако отмечается, что попадая в организм женщины, стрептококки могут вызывать яркие более симптомы.

Организмы дам гораздо более восприимчивы к распространению болезнетворных бактерий, а представители сильного пола долгое время могут не ощущать наличие инфекции.

При выявлении стрептококков у пациентов могут наблюдаться такие симптомы как одышка, потеря координации, расстройство кишечника и другие.

Лечение производится в обязательном порядке антибиотиками, а также вспомогательными препаратами.

Определенные штаммы стафилококков можно отнести к условно-патогенным бактериям , которые, даже находясь в организме у человека, не наносят ему существенного вреда. Однако отмечаются и более опасные разновидности бактерий, которые могут привести к катастрофическим патологиям в организме человека.

Стафилококками могут быть вызваны заболевания желудочно-кишечного тракта, легочной системы, печени и других, необходимых для жизни человека органов. Однако, несмотря на всю опасность, бактерии, выявленные на ранней стадии распространения, поддаются лечению достаточно быстро.

Пневмококк

Пневмококки имеют шарообразную форму и относятся к типичным представителям грамположительных бактерий. Пневмококковая инфекция разделяется на инвазивную и неинвазивную форму. К инвазивной инфекции пневмококка относят тяжелейшие заболевания , которые опасны для человека на любой стали проявления: бактериемия, менингит, пневмония и сепсис.

Неинвазийная форма пневмококка вызывает бронхит, отит и синусит . Болезнетворные бактерии отличаются повышенной устойчивостью ко многим препаратам, поэтому инфекция лечится под строгим наблюдением врача. На продолжительности всей терапии специалист прописывает пациенту анализы для того, чтобы проанализировать динамику лечения.

Грамположительные бактерии удается выявить исключительно при изучении анализов больного . Стоит отметить, что долгое время человек может даже и не подозревать об их распространении, советуется систематически посещать специалиста для планового осмотра.

Появление грамотрицательных диплококков в мазке

Грамотрицательные диплококки могут быть выявлены в результате лабораторных исследований мазка пациента.

Бактерии подразделяются на несколько видов, у мужчин чаще всего выявляют гонококки, которые свидетельствуют о венерическом заболевании.

О распространении инфекции свидетельствует и наличие менингококков в мазке у мужчин и женщин. Уровень концентрации бактерий прямо указывает на степень развившегося заболевания. Виды грамотрицательных диплококков не обладают повышенной устойчивостью ко многим антибиотикам , поэтому лечение в большинстве случаев не занимает продолжительного времени.

Гонококки вызывают гонорею , которая считается антропонозной венерической инфекцией. Клинические симптомы проявляются ярко в основном у . Пациенты чувствуют болезненные ощущения при мочеиспускании и наблюдают гнойные выделения.

Воспаление распространяется быстро и поражает слизистые оболочки органов половой системы. У большинства женщин гонорея протекает бессимптомно и пациентки долгое время не подозревают о заражении.

Гонорея, как и другие венерические инфекции, передается половым путем

Как и другие венерические инфекции, гонорея передается половым путем . При лечении антибактериальными препаратами, гонококки нередко трансформируются в другие формы и вызывают смешанные инфекции.

К данному типу бактерий не вырабатывается естественный иммунитет, поэтому повторное заражение возможно . Более подвержены инфицированию пациенты, которые страдают сифилисом.

Менингококки представляют собой грамотрицательные бактерии, которые вызывают менингококковую инфекцию.

Как правило, у пациентов поражается слизистая оболочка носоглотки, но возможно нарушение естественной работы и других органов.

Приведенные виды бактерий не обладают защитной капсулой и неподвижны. По большей части причина заражения определяется попаданием в организм токсинов. Чем выше интоксикация организма, тем быстрее распространяется инфекция.

В некоторых случаях, последствия нанесенные менингококками, могут быть необратимы . Именно поэтому очень важно диагностировать их наличие в организме на ранней стадии и немедленно начать соответствующее лечение.

Грамотрицательные диплококки чаще всего выявляются в организме тех людей, которые часто сменяют половых партнеров и не в должной мере соблюдают правила личной гигиены. Во время терапии считается необходимым отказаться от половых отношений.

Отличия грамположительных и грамотрицательных диплококков

Грамположительные и грамотрицательные диплококки легко отличить при лабораторных исследованиях. Первые окрашиваются в фиолетовый цвет при промывании обесцвечивающим раствором. Грамотрицательные бактерии, в отличие от грамположительных не подвижны, не формируют споры.

Грамотрицательные диплококки обладают более тонким пептидогликановым слоем. Кроме того, в наружной мембране отсутствуют порины, которые функционируют подобно порам.

У грамположительных бактерий жгутик имеет два поддерживающих кольца, а у грамотрицательных их четыре. Отсутствие защитной оболочки у грамотрицательных диплококков свидетельствует о том, что они не могут быть устойчивы к антибиотикам.

А вот грамположительные бактерии при неправильном выборе препаратов начинают распространяться с большей скоростью.

Несмотря на то, что грамположительные диплококки сильно отличаются от грамотрицательных, болезни, которые вызывают оба типа бактерий, крайне опасны для человека. При этом заболевания могут протекать бессимптомно и их удается выявить только при плановом осмотре у специалиста. Именно поэтому рекомендуется не менее чем раз в полгода посещать врача.

Вконтакте

Семейство Neisseriaceae названо в честь А. Нейссера, впервые обнаружившего в 1879 г. возбудителя гонореи. К семейству Neisseriaceae в настоящее время отнесены четыре рода: Neisseria, Moraxella, Acinetobac- ter и Kingella.

Род Neisseria включает 14 видов, в том числе два патогенных: N. meningitidis (менингококк) - возбудитель менингококковых инфекций и N. gonorrhoeae (гонококк) - возбудитель гонореи (табл. 17). Остальные представители этого рода (N. sicca, N. flavescens, N. mucosa, N. lacta- matica и др.) являются сапрофитами и обитают на слизистой оболочке верхних дыхательных путей человека. Типовой вид рода - N. gonor- rhoeae.

Таблица 17

Патогенные бактерии рода Neisseria и их свойства

	Источник	Основные	Основной способ
	заболевания	заболевания	заражения
		Менингококкцемия (ме- нинкогокковый сепсис), менингококковый менингит (гнойное воспаление мозговых оболочек спинного и головного мозга)	Возду шно-капельный
		Гонорея (инфекционное венерическое заболевание с воспалительными проявлениями в мочеполовых органах)	Половой, возможно инфицирование плода при прохождении через родовые пути матери; отмечены случаи заражения через предметы обихода

Представители рода Neisseria являются сферическими, формирующими пары или скопления бактериями, размером 0,6-1,0 мкм. Благодаря делению в двух плоскостях бактерии некоторых видов образуют тетрады. Неподвижны, некоторые виды имеют капсулу и фимбрии (ворсинки). Эндоспоры не образуются. Представители некоторых видов рода Neisseria синтезируют зеленовато-желтые каротиноидные пигменты.

Нейссерии - хемоорганотрофы, каталазоположительные (за исключением N. elongata) и оксидазоположительные. Патогенные нейссерии не растут на обычных питательных средах, но хорошо культивируются на средах, содержащих цельную кровь, сыворотку, асцитическую жидкость. Непатогенные виды менее прихотливы. Каждый вид нейссерий избирательно ферментирует углеводы с образованием уксусной кислоты. Установлено, что представители видов N. gonorrhoeae и N. meningitidis способны расщеплять глюкозу по пентозофосфатному пути и пути Энтне- ра - Дудорова. Большинство представителей рода Neisseria (кроме видов N. gonorrhoeae и N. canis) восстанавливают нитраты. Оптимальная температура для роста 35-37 °С. Величины оптимума рН у различных штаммов варьируют, но для большинства находятся в пределах 6,0-8,0.

Основными факторами вирулентности патогенных бактерий N. go- norrhoeae является продукция эндотоксинов, а также наличие ворсинок, с помощью которых осуществляются адгезия и колонизация эпителиальных клеток слизистой оболочки мочеполовых путей. Экзотоксины у гонококков не обнаружены.

Основным фактором вирулентности патогенных менингококков можно считать образование полисахаридной капсулы, защищающей их от различных воздействий, в первую очередь от поглощения фагоцитами. Факторами, способствующими адгезии и колонизации, являются ворсинки и белки наружной мембраны, факторами инвазивности - гиалурони- даза и другие ферменты, деполимеризующие субстраты ткани хозяина. Токсичность менингококков обусловлена наличием у них липополисаха- ридов, которые обладают пирогенным, некротическим и летальным действием. В качестве факторов вирулентности можно рассматривать и наличие у них таких ферментов, как нейраминидаза, плазмокоагулаза, некоторых протеаз, фибринолизина, а также проявление гемолитической и антилизоцимной активности.

Род Acinetobacter включает в себя грамотрицательные палочки, обычно очень короткие и округлые, размеры их в логарифмической фазе роста составляют 1,0-1,5 х 1,5-2,5 мкм. В стационарной фазе роста они приобретают преимущественно форму кокков, располагающихся парами или в виде коротких цепочек. Спор не образуют, жгутиков не имеют. Аэробы; метаболизм чисто дыхательного типа с использованием молекулярного кислорода в качестве конечного акцептора электронов. Оптимальная температура для роста 30-32 °С, рН около 7,0. Акинетобактерии являются свободно живущими сапрофитами, распространены повсеместно, их часто выделяют из почвы, воды, сточных вод, загрязненных пищевых продуктов, со слизистых оболочек животных (включая рыб) и людей. Они могут быть причиной многих инфекционных процессов, включая менингиты и септицемии у людей и септицемии и аборты у животных.

Род Acinetobacter включает шесть видов, типовой вид - A. calcoaceti- cus.

Род Kingella включает три вида, типовой вид - K. kingae. Клетки кокковидные или короткие палочки с закругленными или квадратно очерченными концами, в парах и иногда коротких цепочках. Жгутиков не имеют. Аэробы или факультативные анаэробы. Оптимальная температура для роста 33-37 °С. Хемоорганотрофы. Сбраживают глюкозу и ограниченное число углеводов с образованием кислоты, но не газа. Кингеллы наиболее часто выделяют из глоточной слизи, а также со слизистых оболочек мочеполовых путей, носа, из абсцессов при повреждении костей, заболевании суставов и т. п. Основным местом обитания кингелл являя- ется слизистая оболочка глотки. Патогенность для человека выясняется.

Семейство Mycobacteriaceae содержит один род - Mycobacterium. Микобактерии - это кислото- и спиртоустойчивые, аэробные, хемоорга- нотрофные, неподвижные, неспорообразующие, грамположительные прямые или изогнутые палочковидные бактерии. Иногда они образуют (особенно в старых культурах) нитевидные или мицелиальные структуры, фрагментирующиеся при легком механическом воздействии на палочки или кокковидные элементы. Кислотоустойчивость микобактерий объясняется высоким содержанием в клеточных стенках особых липидов - миколовых кислот, связанных с пептидогликано-арабиногалакта- новым комплексом. Миколовые кислоты - это разветвленные 3-гид- роксикисло-ты, которые в положениях 2 и 3 замещены алифатическими цепями. В миколовых кислотах микобактерий 78-95 атомов углерода и установлено, что только кислоты с очень длинными цепями придают клеткам кислотоустойчивость. Содержание липидов и восков в микобактериях может составлять до 60 % сухого остатка клеток. Некоторые виды микобактерий синтезируют каротиноидные недиффундирующие в среду пигменты. Микобактерии растут на питательных средах медленно или очень медленно; видимые колонии появляются через 14-40 суток при оптимальной температуре. Колонии часто розовые, оранжевые или желтые, особенно при росте на свету; поверхность колоний обычно матовая или шероховатая. Представители некоторых видов микобактерий требовательны к составу среды, нуждаются в специальных добавках к среде (например, M. paratuberculosis) или не поддаются культивированию (M. leprae). Многие из них могут хорошо расти на средах с парафинами, ароматическими и гидроароматическими углеводородами. Каталазопо- ложительные, арилсульфатазоположительные, устойчивые к лизоциму.

Микобактерии широко распространены в природе: они встречаются в почве, воде, в организме теплокровных и холоднокровных животных. Род Mycobacterium включает более 40 видов. Среди микобактерий есть сапрофитные, условно-патогенные (потенциально патогенные) и патогенные виды. Патогенные микобактерии вызывают заболевания, получившие общее название микобактериозов. К патогенным или потенциально патогенным относятся 24 вида микобактерий, но основные патогены человека - M. tuberculosis, M. bovis и M. leprae (табл. 18).

Таблица 18

Основные патогенные для человека микобактерии и их свойства

	Резервуар	Основные заболевания	Возможность передачи от человека человеку	Основной способ заражения
		Туберкулез		Воздушно-капельный и воздушно-пылевой, реже через кожу и слизистые оболочки, иногда возможно трансплацентарное инфицирование плода
	Животные	Туберкулез		При контакте с больными животными, при употреблении сырого молока или плохо обработанного мяса
				При непосредственном контакте с больным человеком, а также воздушно-капельным путем

Патогенность туберкулезных микобактерий определяется не синтезом экзотоксинов, а связана с высоким содержанием липидов в их клетках. Входящие в состав липидов фтиоидная, миколовая и другие жирные кислоты оказывают своеобразное токсическое действие на клетки ткани макроорганизма. Например, фосфатидная фракция, наиболее активная из всех липидов, обладает способностью вызывать в нормальном организме специфическую тканевую реакцию с образованием эпителиоидных клеток, жировая фракция - туберкулоидной ткани. Эти свойства указанных липидных фракций связаны с наличием в их составе фтиоидной кислоты. Восковая фракция, содержащая миколовую кислоту, вызывает реакции с образованием многочисленных гигантских клеток. Таким образом, с липидами, состоящими из нейтральных жиров, восков, стеринов, фосфати- дов, сульфатидов и содержащими такие жирные кислоты, как фтиоидная, миколовая, туберкулостеариновая, пальмитиновая и другие, связаны патогенные свойства туберкулезных палочек. Однако главным фактором вирулентности является токсический гликолипид (корд-фактор), который располагается на поверхности и в толще клеточной стенки. По химической природе он представляет собой полимер, состоящий из одной молекулы дисахарида трегалозы и связанных с ней в эквимолярных соотношениях высокомолекулярных жирных кислот (С186Н366О117). Корд-фактор не только оказывает токсическое действие на ткани, но и защищает туберкулезные палочки от фагоцитоза, блокируя окислительное фосфори- лирование в митохондриях макрофагов и вызывая их гибель.

Факторы патогенности бактерий, вызывающих проказу (M. leprae), определяются также химическим составом их клеток; продукции экзотоксинов не установлено.

Пропионовокислые бактерии объединены в род Propionibacterium, который входит в состав семейства Propionibacteriaceae.

В целом пропионовокислые бактерии характеризуются как грампо- ложительные, каталазоположительные, неспорообразующие, неподвижные, факультативные анаэробы или аэротолератные. Клетки часто булавовидной формы с одним концом закругленным и другим суженным; некоторые клетки могут быть кокковидными, раздвоенными или разветвленными, но нитчатые формы отсутствуют. Расположение клеток одиночное, в парах, коротких цепочках, V- или Y-конфигурациях, а также группами в виде «китайских иероглифов».

Бактерии содержат менахиноны, С15-насыщенную жирную кислоту мембранных липидов и образуют пропионовую кислоту при брожении, откуда и получили свое название. В слабоаэрируемых условиях пропио- новокислые бактерии могут осуществлять аэробное дыхание. Содержание ГЦ-пар в ДНК 53-67 %. Оптимум температуры для роста 30-37 °С. Формируют колонии кремового, желтого, оранжевого, красного, коричневого цвета.

На основании высокой степени гомологии нуклеотидных последовательностей 16Б-рРНК в род Propionibacterium включены три подгруппы пропионовых бактерий: классические, кожные и Propionibacterium pro- pionicus.

Классические бактерии обитают главным образом в молоке, сырах (отсюда и другое название - молочные пропионовые). Кожные бактерии обитают на коже людей, в рубце жвачных животных. Их рассматривают как биологическую защиту человека и полезную естественную микрофлору рубца животных. Они усиливают иммуностимулирующие реакции у людей, благотворно влияют на сельскохозяйственных животных и птиц, и поэтому нашли применение как компоненты лечебных и профилактических препаратов. Кожные пропионовые бактерии живут не только на поверхности нормальной кожи людей, их выделяют также из угрей, реже из содержимого желудка, ран, крови, гнойных и мягких тканевых абсцессов, хотя вопрос о причастности этих бактерий к возникновению заболеваний утвердительного ответа не имеет. Таким образом, классические и кожные пропионовые бактерии различаются, прежде всего, по характерным местам их обитания в природе. Кроме того, классические пропионовые бактерии, в отличие от кожных, не образуют индола и не способны к гидролизу желатины.

Третья подгруппа пропионовокислых бактерий включает только один вид - Propionibacterium propionicus. Бактерии этого вида обитают в почве.

К классическим пропионовокислым бактериям относятся четыре вида: P. freudenreichii, P. thoenii, P. jensenii, P. acidipropionici.

К кожным пропионовокислым бактериям относятся три вида: P. acnes, P. avidum, P. granulosum.

Типовой вид - Propionibacterium freudenreichii.

Синтетические способности пропионовокислых бактерий хорошо развиты, хотя и различаются у разных видов и штаммов. Установлено, что некоторые пропионовокислые бактерии способны фиксировать молекулярный азот, использовать углеводороды, самостоятельно синтезировать витамины. Все пропионовокислые бактерии синтезируют витамин В12, принимающий участие в брожении, синтезе белка, ДНК, в регуляции синтеза ДНК и некоторых других реакциях.

Продукты, выделяемые бактериями при брожении: пропионовую и уксусную кислоты, а также биомассу бактерий, широко применяют на практике. В зависимости от целей производства используют энзиматиче- ски неактивную или энзиматически активную биомассу.

Энзиматически неактивная биомасса применяется в животноводстве как белок одноклеточных организмов, богатый у пропионовокислых бактерий серосодержащими аминокислотами, особенно метионином, а также треонином и лизином, витаминами группы В. В корм животных рекомендуют добавлять биомассу бактерий P. freudenreichii, положительный эффект которой обусловлен обогащением корма микроэлементами, находящимися в биологически активной форме, витаминами и белком. Биомасса неживых (термически обработанных) бактерий служит источником витамина В12, поскольку он выдерживает нагревание. Убитые нагреванием кожные бактерии (P. acnes и P. granulosum) рекомендованы для производства иммуностимулирующего препарата. Показано, что эти бактерии стимулируют образование антител, обладают антивирусными и антибактериальными свойствами. Кроме того, в ряде лабораторий установлено, что бактерии P. acnes способны замедлять рост различных (включая злокачественные) опухолей, а также инвазию опухолей за счет усиления защитных реакций организма. Еще более поразительный факт заключается в том, что P. acnes ингибирует распространение метастазов в организме. Иммунотерапия рака наиболее эффективна после операций, поскольку при этом удаляются источники диссимиляции опухолевых клеток, а также при химиотерапевтической ремиссии лейкемии. Наблюдения проводились не только на животных, но и на людях: они подтвердили безопасность убитых P. acnes для клинического применения.

Убитые бактерии P. granulosum являются источником порфиринов. Порфирины и металлокомплексы используют как красители и пигменты, включая красители для пищевых целей, как катализаторы реакций окисления-восстановления; катализаторы реакций окисления углеводородов, меркаптанов в нефти, нефтепродуктах и т. д. Они могут применяться как диагностические и лечебные препараты.

заквасок для сыроделия. Твердые сычужные сыры, в изготовлении которых обязательно принимают участие пропионовокислые бактерии, производят повсеместно;

витамина В12. Витамин В12 с использованием ферментации про- пионовокислых бактерий выпускают в России, Великобритании, Венгрии и других странах мира. Производство витамина В12 методом химического синтеза практически невозможно;

заквасок для хлебопечения. Пропионовокислые бактерии, наряду с дрожжами и молочнокислыми бактериями, вводят в некоторые закваски для теста с целью образования в процессе ферментации, помимо молочной и уксусной кислот, еще и пропионовой. Такой хлеб содержит до

28 % пропионовой кислоты, срок его хранения увеличивается в связи с ингибирующим действием пропионовой кислоты на рост плесневых грибов. Кроме того, такой хлеб обогащен витамином В12; это особенно важно для вегетарианцев и лиц, страдающих различными заболеваниями, причиной которых служит дефицит витамина В12 в организме;

заквасок для силосования кормов;

пропионовой кислоты как фунгицида. Известно, что вредители уничтожают 15 % мирового урожая во время хранения. При влажности более 14 % зерно начинает нагреваться и плесневеть. Такие способы сохранения зерна, как его сушка, хранение при низкой температуре или в герметических условиях, в реальной жизни трудно достигаемы. Но существует еще один способ, который уже применяется в некоторых странах, предусматривающий обработку (опрыскивание) зерна слабым раствором (0,5-1,0 %) пропионовой кислоты. Пропионовая кислота останавливает рост семян, убивает микроорганизмы, и прежде всего плесневые грибы. Питательные качества такого корма повышаются, а вероятность заболевания животных микозом и микотоксикозом снижается.

Кроме того, энзиматически активную биомассу пропионовокислых бактерий можно использовать для обессахаривания белка куриных яиц. Эта проблема возникла в связи с хранением сухого яичного белка. В свежем белке имеется активный лизоцим, обладающий бактерицидным действием, однако в процессе хранения активность его снижается и белок становится уязвимым для многих, прежде всего гнилостных бактерий, вызывающих порчу. Вследствие накопления продуктов разложения и окислительных процессов белок оказывается непригодным для употребления в пищу. Предложен способ консервации белка с использованием пропионовокислых бактерий. Он основан на их способности расти в жидком курином белке, сбраживая за 24 ч углеводы с образованием консервантов пропионовой и уксусной кислот.

Коринеформные бактерии - сводная группа грамположительных неспорообразующих палочковидных бактерий неправильной формы. В состав группы входят следующие роды: Corynebacterium, Arthrobacter, Bre- vibacterium, Cellulomas, Clavibacter, Microbacterium и др.

К роду Corynebacterium относятся бактерии с булавовидной формой клеток (от греч. coryne - булава). В развивающейся культуре одновременно могут находиться клетки палочковидной, конусообразной и булавовидной формы. Размеры клеток 0,3-0,8 х 1,5-8,0 мкм. Неподвижны. Помимо плеоморфизма, для представителей этого рода характерно «защелкивание» клеток при их делении. Оно происходит из-за того, что соединяющая дочерние клетки перегородка расслаивается на разных сторонах с разной скоростью, так что клетки оказываются под углом друг к другу (V-сочетания клеток). Некислотоустойчивые. Внутри клеток, как правило, образуются метахроматиновые гранулы полиметафосфата. В клеточной стенке имеются арабиногалактановый полимер и мезо-диами- нопимелиновая кислота, а также специфические липиды - эфиры кори- номиколовой и кориномиколеновой кислот, димиколат трегалозы, фосфаты маннозы и инозита.

Коринебактерии - аэробы и факультативные анаэробы, хемооргано- трофы. Метаболизм смешанный - бродильный и дыхательный. Основным продуктом при сбраживании углеводов является пропионовая кислота. Большинство представителей коринебактерий имеют сложные пищевые потребности и нуждаются в витаминах группы В и биотине. На питательных средах формируют в основном пигментированные колонии (желтые, розовые, коричневые и др.).

Род Arthrobacter представлен палочковидными бактериями неправильной формы варьирующих размеров (0,8-1,2 х 1,0-8,0 мкм), образующими клетки различных сочетаний (V-, Y- и др.) и с булавовидными концами, но нити отсутствуют. Для артробактерий характерен цикл развития: кокк - палочка - кокк. Старые культуры полностью или главным образом состоят из кокковидных клеток (диаметр 0,6-1,0 мкм), которые образуются при распадании палочковидных бактерий. При посеве культуры в свежую питательную среду происходит прорастание кокковидных клеток. Прорастание осуществляется путем образования ростков, которых может быть от одного до четырех на клетку. У большинства артробактерий полный цикл развития (кокк - палочка - кокк) завершается в течение 1-2 суток.

Артробактерии - грамположительные, но легко обесцвечиваются. Некислотоустойчивые, неспорообразующие. Представители некоторых видов подвижны благодаря наличию жгутиков. По составу клеточной стенки отличаются от коринебактерий. Они не имеют арабиногалактана и миколовых кислот. Характерными аминокислотами клеточной стенки являются лизин или Ь,Ь-диаминопимелиновая кислота.

Аэробы. Хемоорганотрофы. Метаболизм дыхательный, никогда не бывает бродильным. Многие виды нуждаются в факторах роста: биотине, тиамине, пантотеновой кислоте. Целлюлозу не гидролизуют, катала- зоположительные. Температурный оптимум для роста 25-30 °С. Оптимум рН для роста 7,0-8,0.

Бактерии рода АНкгоЬа^вг являются одной из основных групп микроорганизмов, обитающих в различных почвах земного шара, а также в ризосфере растений. Их находят в воде и горных породах, торфе, кишечном тракте животных, в производственных и пищевых субстратах.

Обладая значительным набором ферментов, артробактерии активно участвуют в круговороте веществ в природе, осуществляя процессы аммонификации и нитрификации, фиксации атмосферного азота и превращения труднодоступных для других микроорганизмов веществ: пластмасс, углеводородов, пестицидов, алкалоидов, лигнина и т. д.

Многообразна биосинтетическая деятельность артробактерий. Они активно продуцируют аминокислоты, витамины, ауксины, внеклеточные полисахариды и пигменты; широко используются в микробиологической промышленности как продуценты органических кислот (лимонной и пантоевой), производных и предшественников нуклеиновых кислот (5- пуриннуклеотида, 6-азаурацилрибонуклеотида, НАД, гуанин-5-моно- фосфата, оротидиловой кислоты, ксантина), свободных аминокислот (гистидина, изолейцина, серина, триптофана, треонина, фенилаланина), протеолитических ферментов.

Описано 30 видов бактерий рода АнИгоЬа^вг. Типовой вид - АНкго- Ьа^вг gloЬiformis.

Бактерии рода БгвуМаМвгшт в молодых культурах представлены палочками неправильной формы (0,6-1,2 х 1,5-6 мкм), одиночными или в парах и часто расположенными У-образно. Может встречаться ветвление, но мицелий не образуется. В старых культурах палочки распадаются на мелкие кокки.

Бревибактерии - грамположительные, но легко обесцвечиваются, неподвижные, неспорообразующие, некислотоустойчивые. В их клеточной стенке имеется БЬ-диаминопимелиновая кислота, но отсутствуют ара- биногалактановый полимер и миколовые кислоты.

Это облигатные аэробы, хемоорганотрофы, каталазоположительные. Метаболизм дыхательного типа. На агаризованных питательных средах формируют желто-оранжевые, серые или пурпурные колонии. Оптимальная температура для роста 20-35 °С. Многие представители бреви- бактерий являются продуцентами биологически активных веществ (аминокислот, внеклеточных белков).

Бревибактерии экологически связаны со специфическими органическими субстратами - молочными продуктами, кожей рыб, пометом домашних птиц и т. д. Кроме того, они обнаруживаются на коже человека.

Род Brevibacterium включает четыре вида: B. casei, B. epidermidis, B. iodinum, B. linens. Типовой вид - B. linens. Это соленоустойчивые микроорганизмы. Наиболее часто их можно обнаружить на поверхности мягких сыров, на коже морских рыб, на помете домашних птиц и в морской воде. Бактерии данного вида зависимы в витаминах группы В, колонии имеют желто-оранжевую пигментацию.

Род Cellulomas - гетерогенная группа бактерий, утилизирующих целлюлозу. В молодых культурах бактерии этого рода представляют собой палочки неправильной формы (0,5-0,6 х 2,0-0,5 мкм). Они могут быть прямыми, угловатыми, слегка изогнутыми, а иногда булавовидными или располагаться в форме буквы V. В экспоненциальной фазе роста могут быть нитеобразными и могут давать первичные ответвления, но мицелий не образуют. В более старых культурах часть клеток может быть кокковидной. Однако для бактерий рода Cellulomas не характерен цикл кокков. Клетки некоторых представителей передвигаются с помощью одного полярного или нескольких латеральных жгутиков. Обнаружены и неподвижные представители. Эндоспор не образуют. Грамполо- жительные; клетки легко обесцвечиваются, и часто в культуре наблюдается смесь грамположительных и грамотрицательных палочек. Некислотоустойчивые. Клеточные стенки не содержат мезо-диаминопимелино- вой кислоты, арабиногалактанового полимера и миколовых кислот.

Факультативные анаэробы. Хемоорганотрофы, обладающие и дыхательным, и бродильным типом метаболизма с образованием кислоты из глюкозы и различных других углеводов в аэробных и в анаэробных условиях. Каталазоположительные. Восстанавливают нитраты до нитритов. При росте на агаризованной среде с пептоном и дрожжевым экстрактом образуют выпуклые желтые колонии. Оптимальная температура для роста 30 °С. Хорошо растут при нейтральных значениях рН. Для роста нуждаются в биотине и тиамине.

Бактерии рода Cellulomas широко распространены в почвах, отходах бумажной промышленности, гниющем растительном материале.

Род Cellulomas представлен восемью видами. Типовой вид - Cellulomas fla-vigena.

Бактерии рода Clavibacter выделены из рода Corynebacterium. Этот род объединяет виды аэробных фитопатогенных бактерий, клеточная стенка которых содержит 2,4-диаминомасляную кислоту, а не мезо-диа- минопимелиновую, как у бактерий других видов рода Corynebacterium.

Кроме того, в клеточной стенке бактерий Clavibacter не содержатся ми- коловые кислоты и арабиногалактановый полимер.

Бактерии рода Clavibacter представлены прямыми или слегка изогнутыми тонкими палочками (0,4-0,75 х 0,8-2,5 мкм) неправильной формы и часто клино- или булавовидной формы, преимущественно одиночными или в парах V-образной конфигурации. В старых культурах обнаруживаются кокковидные клетки, но цикл «палочки - кокки» не характерен.

Грамположительные, неподвижные, неспорообразующие, некислотоустойчивые.

Бактерии рода Clavibacter относятся к облигатным аэробам и хемо- органотрофам. Метаболизм дыхательного типа с образованием небольшого количества кислоты из глюкозы и некоторых других углеводов. Ка- талазоположительные, оксидазоотрицательные, индол не образуют, нитраты не восстанавливают. Оптимальная температура для роста 20-29 °С; в редких случаях растут при температуре выше 35 °С. Нуждаются в богатых питательных средах, растут медленно. Некоторые штаммы синтезируют желтый или голубой пигмент.

Род Clavibacter представлен пятью видами: C. iranicus, C. michi- ganensis, C. rathayi, C. tritici, C. xyli. Типовой вид - C. michiganensis (возбудитель бактериального рака томатов).

К роду Microbacterium относятся тонкие палочковидные бактерии неправильной формы (0,4-0,8 х 1,0-4,0 мкм), одиночные или в парах V-образной конфигурации. Первичное ветвление нетипично, и мицелий не образуется. В старых культурах палочки короче, но четкий цикл «палочка - кокки» отсутствует. Грамположительные, некислотоустойчивые, неспорообразующие. В клеточной стенке имеется лизин, но отсутствуют миколовые кислоты и арабиногалактановый полимер. Неподвижные или подвижные за счет одного-трех жгутиков.

Бактерии рода Microbacterium - аэробы, хемоорганотрофы. Метаболизм в основном дыхательного типа, но может быть и слабо выраженный бродильного типа. Каталазоположительные. Требуют для роста витамины группы В и некоторые аминокислоты. На агаризованной среде с дрожжевым экстрактом, пептоном и глюкозой формируют непросвечивающие, блестящие, часто с желтоватой пигментацией колонии. Оптимальная температура для роста около 30 °С. Не растут при 18 и 40 °С. Выдерживают нагревание при 72 °С в течение 15 мин в обезжиренном молоке.

Обнаружены в молоке, молочных продуктах, на оборудовании молочных предприятий, в сточных водах и у насекомых.

Род Microbacterium включает четыре вида: M. arborescens, M. imperiale, M. lacticum, M. laevaniformans. Типовой вид - M. lacticum.

Актиномицеты относятся к порядку Actinomycetales, в который входят бактерии, имеющие тенденцию к образованию ветвящихся гиф, способных развиваться в мицелий. Гифы могут быть очень короткими или хорошо развитыми и в связи с этим мицелий может быть плотным, субстратным, врастающим в питательную среду или же рыхлым, воздушным на поверхности колонии. Различают мицелий стабильный и распадающийся на палочковидные или кокковидные элементы, некоторые из них обладают подвижностью за счет жгутиков. Мицелий может нести интеркалярные везикулы, не содержащие спор либо содержащие многочисленные споры. Кроме того, для актиномицетов характерно образование конидий (бесполых спор), которые похожи на бактериальные эндоспоры и служат для перенесения неблагоприятных условий внешней среды. Характер расположения конидий у разных групп актиномицетов отличается. Это могут быть одиночные конидии, пары конидий, короткие или длинные цепочки конидий, конидиенесущие гифы, соединенные в пучки гиф, из которых высвобождаются подвижные споры.

Еще одним морфологическим критерием, который используется для идентификации актиномицетов, является образование спорангиев - мешков, содержащих споры. Они могут образовываться на хорошо развитых воздушных гифах или на поверхности конидий со слабо развитым воздушным мицелием либо без него, либо главным образом в толще агара (рис. 101).

Рис. 101. Схематическое изображение мицелиального роста и спорообразования

у актиномицетов различных родов (из «Todar"s Online Textbook of Bacteriology»;

Кроме морфологических критериев, для идентификации актиномице- тов используются данные о химической структуре некоторых соединений:

типе двухосновной аминокислоты, присутствующей в составе клеточной стенки (мезо- или L-диаминопимелиновая кислота);

типе диагностических сахаров, содержащихся в гидролизате целых клеток.

Культуры актиномицетов по окраске делятся на две группы: бесцветные и пигментированные. Первые при росте на питательных средах не образуют никаких пигментов, колонии их бесцветные, беловатые. Акти- номицеты второй группы образуют пигменты, поэтому формируют окрашенные колонии: синие, фиолетовые, красные, розовые, желтые, оранжевые, зеленые, коричневые, черные (рис. 102, 103).

Рис. 102. Пигментация у различных видов актиномицетов

Рис.103. Колонии бактерий Streptomyces coelicolor (из «Hinger Education and Research Opportunitie, the John Innes Centre»;

Многие актиномицеты могут синтезировать одновременно несколько пигментов, причем на разных средах в различных количественных соотношениях. Пигменты актиномицетов разнообразны по своим химическим и физическим свойствам. Одни из них хорошо растворяются в воде и этиловом спирте, другие не растворяются в воде, но растворяются в спирте, эфире и других органических растворителях. Третьи не растворяются ни в воде, ни в органических растворителях.

Актиномицеты - грамположительные организмы, хотя реакция по Граму может изменяться с возрастом культуры. Большинство аэробы, но некоторые роды представлены факультативными или облигатными анаэробами. Хемоорганогетеротрофы, использующие разнообразные источники энергии: углеводы, органические кислоты, спирты, крахмал, декстрин, клетчатку, различные углеводородные соединения (парафин и другие продукты переработки нефти), жиры, воски, лигнин, хитин и др. В большинстве случаев встречаются как свободноживущие в разнообразных местообитаниях. Однако есть актиномицеты, которые образуют симбиотические азотфиксирующие ассоциации с растениями (род Frankia).

Встречаются чаще в почве и реже - в пресной воде. Есть патогенные для человека, животных и растений виды. Споры могут быть аллергенными для человека.

По морфологическим и химических критериям актиномицеты в девятом издании «Определителя бактерий Берджи» разделены на восемь групп родов.

Нокардиоформные актиномицеты.

Роды с многогнездными спорангиями.

Актинопланы.

Стрептомицеты и близкие роды.

Мадуромицеты.

Thermomonospora и близкие виды.

Thermoactinomyces.

Другие роды.

Нокардиоформные актиномицеты. Это гетерогенная группа, многие представители которой образуют нити мицелия, распадающиеся на более короткие элементы. Для некоторых родов характерно образование воздушного мицелия с цепочками спор. Подразделение на роды основано в первую очередь на хемотипе клеточной стенки, присутствии или отсутствии миколовых кислот и других химических признаках. Эта группа актиномицетов разделена на четыре погруппы:

Pseudonocardia и близкие роды;

Nocardioides и Terrabacter;

Promicromonospora и близкие роды.

Бактерии, содержащие миколовые кислоты, широко распространены в природе, особенно в почве, однако некоторые виды ассоциированы с животными. В эту подгруппу входят четыре рода: Gordona (выделяются из почвы, мокроты больных легочным туберкулезом); Nocardia (широко распространены и обильно представлены в почве. Некоторые являются возбудителями актиномицетной мицетомы и нокардиоза); Rhodococcus (широко распространены; особенно обильно предсталены в почве и помете травоядных животных. Некоторые представители патогенны для человека и животных); Tsukamurella (выделены из почвы, мокроты человека, а также из мицетом и яичников постельных клонов. Некоторые представители известны как возбудители легочной инфекции, менингита с летальным исходом и некротирующего тендовагинита).

Подгруппа Pseudonocardia и близкие роды выделяются из разнообразных местообитаний, чаще всего из почвы и растительного материала; некоторые виды вызывают аллергические заболевания. Подгруппа включает 10 родов бактерий.

Подгруппа Nocardioides и Terrabacter состоит из двух родов бактерий: Nocardioides и Terrabacter. Встречаются в почве.

Подгруппа Promicromonospora и близкие роды выделяются из почвы и растительного материала. Включает три рода: Jonesia, Oerskovia и Promicromonospora.

Роды с многогнездными спорангиями. Для актиномицетов этой группы типично образование нитей мицелия, делящихся в продольном и поперечном направлениях, и большого числа кокковидных элементов, которые могут быть подвижными или неподвижными. В эту группу входят три рода:

Frankia - большинство штаммов - симбионты ряда покрытосеменных растений, индупируютие образование клубеньков на корнях соответствующих хозяев. Встречаются и как свободноживущие в почве;

Geodermatophilus - местообитание почва.

Актинопланы. Представлены бактериями, нити мицелия которых не распадаются на фрагменты; воздушный мицелий развит слабо или отсутствует. Они образуют подвижные или неподвижные споры в спорангиях, одиночные либо в цепочках. Клеточные стенки содержат мезо-диамино- пимелиновую кислоту и глицин, в гидролизатах целых клеток присутствуют арабиноза и ксилоза. Местообитание - почва, разлагающийся растительный материал, пресная и морская вода, ил. Группа включает шесть родов: Actinoplanes, Ampullariella, Catellaspora, Dactylosporangium, Mi- cromonospora, Pilimelia.

Стрептомицеты и близкие роды. Это гетерогенная группа, для всех таксонов которой характерны клеточные стенки, содержащие L-диами- нопиколиновую кислоту и глицин. Нити мицелия не распадаются на фрагменты и могут образовывать обильный воздушный мицелий с длинными цепочками спор (роды Streptomyces и Streptoverticilium) (рис. 104). Для других родов (Intrasporangium, Kineosporia, Sporichthya) характерно слабое развитие воздушного мицелия либо полное его отсутствие и разнообразные по форме споры.

Рис. 104. Филаменты мицелия бактерий рода Streptomyces (из «Natural Resources Conservation Service»; )

В группу входит пять родов: Streptomyces, Streptoverticillium, Intrasporangium, Kineosporia, Sporichthya. Основное местообитание представителей этих родов - почва, но есть патогенные для человека и животных или растений виды. Типовой род - Streptomyces. Все стрептомицеты - облигатные аэробы. Они нетребовательны к питательным субстратам, не нуждаются в факторах роста, преимущественно сапрофиты. Стрептомицеты широко распространены в почвах разных типов и играют большую роль в минерализационных процессах. Их наличие обусловливает специфический запах свежевспаханной почвы. Из стрептомицетов Str. gri- seus было выделено масло, названное геосмином, обладающее таким запахом. Стрептомицеты хорошо развиваются при низкой влажности почвы, поэтому в почвах засушливых климатических зон они численно преобладают над всеми микроорганизмами.

Повсеместное распространение актиномицетов рода Streptomyces связано с наличием у них активных ферментных систем, позволяющих разрушать и использовать самые разнообразные соединения. Так, у актино-
мицетов выявлена способность продуцировать такие гидролитические ферменты, как протеазы, амилазы, кератиназы, хитиназы, активные окислительно-восстановительные ферменты группы полифенолоксидаз, обес-печивающие расщепление устойчивых фенольных соединений, входящих в состав гумуса. Некоторые актиномицеты осуществляют трансформацию полициклических соединений - стероидов - в биологически активные соединения - стероидные гормоны (преднизолон, кортизон). Среди актиномицетов особенно много продуцентов антибиотиков. Например, Str. aureofaciens- продуцент тетрациклина, Str. griseus - продуцент стрептомицина, Str. venezuelae - продуцент хлорамфеникола и др. Одновременно с образованием тетрациклина бактерии вида Str. aureofaciens синтезируют также витамин В12 и его аналоги. Витамины группы В способны продуцировать почти все стрептомицеты. Многие из них образуют каротиноидные пигменты, черно-коричневые меланины и синефиолетовые антоцианы.

Среди фитопатогенных представителей рода Streptomyces следует отметить бактерии вида Str. scabies, которые являются возбудителями парши картофеля. Парша картофеля проявляется в образовании уплотненных слоев на поверхности клубней, ухудшении свойств, связанных с пищевой ценностью (рис. 105). Возбудитель поражает только клубни и неактивен в отношении зеленых частей растения. Вирулентность этих бактерий связана с наличием кутиназы, которая гидролизует полимер защитного кутикулярного слоя. Показано, что стрептомицеты, вызывающие паршу картофеля, могут подавлять образование фитоалексинов в клубнях. Фильтраты культуральной жидкости бактерий Str. scabies ингибируют дыхание клубней картофеля.

Рис. 105. Клубни картофеля, пораженные бактериями Streptomyces scabies (из «Vegetable MD Online»;

воздушный мицелий, несущий споры. Клеточные стенки содержат мезо- диаминопимелиновую кислоту, а гидролизаты целых клеток мадурозу. Эта группа разделена на две подгруппы:

Streptosporangium и родственные таксоны;

Мадуромицеты - в основном почвенные микроорганизмы, но среди них встречаются патогенные для человека и животных виды.

ТквгтотопоБрога и близкие виды. Представлены бактериями, нити мицелия которых не распадаются на фрагменты и образуют воздушный мицелий со спорами, расположенными одиночно (род Thermотоno- nospora), в цепочках (роды Actinosynnema, Nocardiopsis) или в спорангиеподобных структурах (род Streptoalloteichys). Клеточные стенки содержат мезо-диаминопимелиновую кислоту; в гидролизатах целых клеток характерные аминокислоты и сахара отсутствуют. Миколовые кислоты также отсутствуют. Основное местообитание - почва.

ТНвгтоасИпотусвБ. Это группа бактерий, нити мицелия которых не распадаются на фрагменты и образуют воздушный мицелий. Одиночные споры (представляющие собой эндоспоры) имеются как на воздушном, так и на субстратном мицелии. Все виды термофильные. Клеточные стенки содержат мезо-диаминопимелиновую кислоту; характерные аминокислоты и сахара отсутствуют. Аэробы; сапрофитные хемоорганотро- фы. Группа представлена только одним родом - Thermoactinomyces.

Другие роды. Эта группа включает три рода: Glycomyces, Kitasatospo- ria, Saccharothrix. Они не могут быть в настоящее время отнесены ни к одной из вышеперечисленных групп. Все представители этих родов образуют воздушный мицелий с цепочками спор. В составе клеточной стенки отсутствуют миколовые кислоты. Аэробы, хемоорганотрофы. Выделены из почвы.

Микоплазмы - это очень мелкие прокариотические организмы, полностью лишенные клеточных стенок. Клетки ограничены только цитоплазматической мембраной и не способны к синтезу пептидогликана и его предшественников. В связи с этим для них характерен ярко выраженный плеоморфизм. В культуре одного вида можно одновременно обнаружить кокковидные, эллипсовидные, дискообразные, палочковидные, грушевидные клетки, а также нитевидные формы. Нити могут ветвиться, образуя структуры, подобные мицелиальным. Диаметр клеток составляет

1-10 мкм. Размножаются различными способами: бинарным делением;

фрагментацией крупных тел и нитей, сопровождающейся освобождением большого числа кокковидных форм; почкованием. Репликация генома предшествует, но не обязательно синхронизована с клеточным делением.

Микоплазмы, как правило, неподвижны, однако некоторые виды обладают способностью к скользящему движению по поверхностям, покрытым жидкостью. Клетки других видов, имеющие форму спиральных нитей, обнаруживают подвижность вращательного, изгибательного и поступательного типов.

Покоящиеся стадии неизвестны.

Отсутствие клеточной стенки обусловливает еще одну отличительную особенность микоплазм - их нечувствительность к антибиотикам, специфически действующим на бактериальную стенку (пенициллину, ампициллину, цефалоспорину и др.).

Микоплазмы представляют собой группу, чрезвычайно разнообразную с точки зрения физиолого-биохимических особенностей. Они могут расти:

на искусственных бесклеточных средах разной степени сложности (от простых минеральных до сложных органических). Большинство видов нуждается для роста в стеринах и жирных кислотах;

только внутри организма-хозяина, откуда их можно выделить с использованием культуры клеток.

Разнообразны также способы получения энергии у микоплазм. Среди них описаны виды, получающие энергию за счет окисления или сбраживания органических соединений, а также за счет окисления неорганических соединений (железа, марганца). Описаны микоплазмы, являющиеся строгими аэробами, хотя большинство из них - факультативные анаэробы. Некоторые микоплазмы - облигатные анаэробы, погибающие в присутствии минимального количества минерального кислорода.

Факторы вирулентности микоплазм, патогенных для человека и животных, разнообразны. Они продуцируют как экзо-, так и эндотоксины; пероксид водорода, нейраминидазу, кислые фосфатазы, уреазу, аргинин- дегидролазу. Ферменты действуют на соответствующие субстраты и обусловливают в силу этого патогенный эффект. Например, аргининде- гидролаза разрушает необходимую для нормальной жизнедеятельности клеток аминокислоту аргинин. Нейраминидаза вызывает изменения рецепторного аппарата клеточных мембран эритроцитов, респираторного эпителия и т. д. Пероксид водорода вызывает повреждения мерцательного эпителия трахеи и бронхов человека и животных.

Первая фаза микоплазменной инфекции основана на способности микоплазм адсорбироваться на клетках хозяина. Это обусловлено общностью рецепторных участков на мембранах разных видов микоплазм и разных типов клеток макроорганизмов. Разные виды микоплазм адсорбируются на эритроцитах, макрофагах, мембранных структурах реснитчатого эпителия трахеи и бронхов человека, крупного рогатого скота, птиц и других организмов. Проникновение микоплазм в клетки происходит редко, т. е. они действуют с поверхности клетки. Конечный эффект взаимодействия микоплазм и клеток организма может выражаться в развитии либо острой инфекции, сопровождающейся видимым изменением, разрушением поражаемых клеток, либо скрытой ее форме - изменяются метаболизм и функции поражаемых клеток, нарушается нормальное клеточное деление, вызываются хромосомные изменения.

Основными факторами патогенности фитопатогенных микоплазм являются токсины, пероксид водорода, аммиак, ферменты (нуклеазы, про- теазы, уреаза и т. д.). Также одним из факторов патогенности принято считать их конкуренцию с клеткой-хозяином за отдельные субстраты энергетического и белкового обменов (углеводы, аминокислоты и т. д.). Так, для большинства аргининусваивающих микоплазм в качестве основного фактора патогенности является их способность усваивать аргинин.

Микоплазмы вызывают такие заболевания, как столбуры (недоразвитость верхушки, усиление ветвления, курчавость листьев, разрастание чашелистиков, позеленение лепестков, увядание и т. п.); желтухи (удлинение междоузлий и пожелтение листьев); «ведьмины метлы» (чрезмерное разрастание пазушных и дополнительных побегов, недоразвитость верхушек); вырождения и др.

Основными заболеваниями, наносящими значительный экономический ущерб, являются микоплазмозы пшеницы, пасленовых, винограда и некоторых древесных культур (яблони, шелковицы и др.). К наиболее распространенным микоплазмозам относятся бледно-зеленая карликовость пшеницы, «ведьмины метлы» картофеля, столбур томатов и др.

По вредоносности микоплазмозы, за небольшим исключением, относятся к катастрофическим заболеваниям. Урожай пшеницы может снизиться на 80-90 %. Большой вред они наносят овощеводству, вызывая потери на 25-38 % урожая плодов томатов и других пасленовых, недобору 18-20 % урожая картофеля.

Микоплазмы широко распространены в основных районах хлебопашества и овощеводства.

Характер взаимодействия микоплазм с мембранами клеток специфических растений-хозяев очень сходен с таковым микоплазм, патогенных или потенциально патогенных для человека и животных. В основе взаимодействия лежит родство рецепторного аппарата микоплазм и клеток. Адсорбировавшиеся на мембранных элементах клеток-хозяев микоплазмы получают возможность извлекать из них необходимые питательные субстраты, а также непосредственно влиять на генетический аппарат клеток хозяина.

Интересен также способ распространения микоплазмозов растений. Если микоплазмы, поражающие человека и животных, распространяются от особи к особи посредством прямых контактов, а у птиц, кроме того, и через яйца, то фитопатогенные микоплазмы являются типичными трансмиссивными патогенами. Для их распространения обязательно нужен переносчик. Основную роль в распространении микоплазмозов растений играют насекомые, главным образом цикадки. Насчитывается свыше 60 видов цикадок-переносчиков микоплазмозов растений. Кроме того, микоплазмы могут передаваться механически - при использовании больного прививочного материала.

Порядок Mycoplasmatales по своим свойствам является гетерогенной группой бактерий, включающей три семейства: Mycoplasmataceae, Acholeplasmataceae и Spiroplasmataceae.

Семейство Mycoplasmataceae представлено двумя родами: Mycoplasma и Ureaplasma. Различия между ними состоят в том, что бактерии рода Ureaplasma обладают уреазной активностью. Все представители данного семейства являются хемоорганогетеротрофами, характеризующимися высокими потребностями в питательных веществах (особенно в холестерине или близких стеринах). Энергетический метаболизм ферментативного или окислительного типа. Использование глюкозы происходит по гликолитическому пути. Некоторые из представителей семейства способны передвигаться путем скольжения.

Методическое указание для студентов к практическому занятию № 25

Тема: Грамотрицательные кокки (менингококки и гонококки).

Цель: Освоение методов микробиологической диагностики заболеваний, вызванных менингококками и гонококками.

Модуль 2. Специальная, клиническая и экологическая микробиология.

Тема занятия 25. Микробиологическая диагностика заболеваний, вызванных менингококками и гонококками.

Актуальность темы. Отдел Gracilicutes , семейство Neisseriaceae , род нейссерий (Neisseria). Все виды семейства являются обитателями слизистых оболочек теплокровных. Общие признаки бактерий этой группы:

• способны расти в присутствии кислорода,
• представлены неподвижными диплококками и короткими палочками, отрицательно окрашивающимися по Грамму,
• спор не образуют.

Нейссерии – грамотрицательные аэробные кокки, включающие 8 видов, наиболее патогенные для человека виды нейссерий – Neisseria meni n gitidis (менингококки) и Neisseria gonorrhoeae (гонококки). 7 видов встречается у человека, из них 55 видов являются представителями нормофлоры носоглотки и верхних дыхательных путей.

Морфология. Грамотрицательные неспорообразующие кокки, неподвижны, образуют пары или тетрады. Некоторые виды имеют капсулу и микроворсинки.

Культуральные свойства. Аэробы, хемоорганотрофы. патогенные виды прихотливы к условиям культивирования, не растут на обычных питательных средах. Виды, обитающие в носоглотке, образуют желтый пигмент на плотных средах с добавлением куриного желтка.

Ферментативная активность низкая, особенно у патогенных видов.

Антигенная структура – все виды имеют полисахаридный соматический О-антиген; штаммы, образующие капсулу, также имеют капсульный антиген.

Факторы патогенности: капсула, пили, эндотоксин, поверхностные белки наружной мембраны.

Устойчивость в окружающей среде низкая, чувствительны к действию обычно применяемых антисептиков и дезинфектантов.

Менингококк. Neisseria menigitidis

Менингококковая инфекция — инфекционная болезнь, вызываемая Neisseria meningitidis, проявления которой варьируют от бессимптомного носительства до тяжелейших менингеальных форм. Возбудитель впервые подробно изучен в 1887 г. А.Ваксельбаумом.

Таксономия. Возбудитель относится к отделу Gracilicutes, семейству Neisseriaceae, роду Neisseria.

Морфология и тинкториальные свойства. Менингококки — мелкие диплококки. Характерно расположение их в виде пары кофейных зерен, обращенных вогнутыми поверхностями друг к другу. Менингококки неподвижны, спор не образуют, грамотрицательны, капсула непостоянна, имеют пили.

Культивирование. Аэробы культивируют на средах, содержащих нормальную сыворотку либо дефибринированную кровь барана или лошади, а также на селективной среде с ристомицином. Повышенная концентрация СО 2 стимулирует рост менингококков.

Антигенная структура . По капсульным антигенам менингококки делятся на основные серогруппы А, В, С, D и дополнительные. По антигенам клеточной стенки подразделяют менингококки на серовары (1, 2, 3 т.д.). Во время эпидемических вспышек обычно циркулируют менингококки группы А. Токсин менингококков представляет собой липополисахарид клеточной стенки. Его количество определяет тяжесть заболевания.

Резистентность . Менингококки малоустойчивы в окружающей среде, чувствительны к высушиванию и охлаждению. Чувствительны к пенициллинам, тетрациклинам, эритромицину, устойчивы к ристомицину и сульфамидам.

Патогенез и клиническая картина . Человек – единственный естественный хозяин менингококков. Носоглотка является входными воротами инфекции. Здесь бактерии могут длительно существовать, не вызывая воспаления (носительство), но иногла становятся причиной назофарингита. Из носоглотки они могут попадать в кровяное русло (менингококкемия) с развитием лихорадки и геморрагической сыпью. Наиболее частым осложнением менингококкемии является менингит или менингоэнцефалит (воспаление мозговых оболочек).

Иммунитет. Постинфекционный иммунитет при генерализованных формах болезни стойкий, напряженный.

Для лабораторной диагностики исследую кровь, спинномозговую жидкость, слизь с носоглоточных тампонов. При микроскопическом исследовании осадка центрифугированной спинномозговой жидкости и мазков из зева видны типичные нейссерии внутри нейтрофилов или внеклеточно. Посев материала производят сразу после взятия на кровяной агар (шоколадный агар), агар с ристомицином (или линкомицином), среду Мартена – агар с антибиотиками (ВКН – ванкомицин, колистин, нистатин). Инкубацию проводят в атмосфере, содержащей 5% углекислого газа.

Лечение. В качестве этиотропной терапии используют антибиотики: пенициллин, левомицетин, рифампицин.

Профилактика. Разработана менингококковая химическая полисахаридная вакцина, которая проходит апробацию.

Гонококк . Neisseria gonorrhoeae

Гонорея – инфекционное венерическое заболевание, вызываемое Neisseria gonorrhoeae , характеризующееся гнойным воспалением слизистых оболочек органов мочеполовой системы.

Возбудитель гонореи – гонококк, открытый А. Нейссером в 1879 г., относится к семейству Neisseriaceae , отделу Gracilicutes ; вызывает также острое гнойное воспаление слизистой оболочки глаза – бленнорею.

Морфология и культивирование . Гонококк – грамотрицательный диплококк бобовидной формы, неподвижен, спор не имеет, капсулы не образует . В гнойном отделяемом типичное расположение гонококков внутри лейкоцитов (незавершенный фагоцитоз).

Электронная микроскопия.

Характерная, используемая как важный критерий диагностики форма гонококка - диплококк (парный кокк), реже - тетракокк. Связана с особенностями деления гонококка. Диплококк сравнивают с кофейными зёрнами или почками, обращёнными вогнутыми сторонами друг к другу.

Гонококк – аэроб, выращивается на питательных средах, содержащих сыворотку, кровь или асцитическую жидкость. Оптимальные условия для культивирования – t =37 0 C и повышенная концентрация углекислого газа. Гонококк обладает слабой сахаролитической активностью.

Антигенная структура и факторы патогенности. Антигенная структура изучена мало. Фактором патогенности является токсическая субстанция клеточной стенки – липополисахарид.

Резистентность. Гонококк отличается высокой чувствительностью к высушиванию, дезинфицирующим средствам, температуре; чувствителен к бензилпенициллину, эритромицину, тетрациклину, доксициклину, цефалоспоринам, бесиптолу.

П атогенез . Чаще всего гонорейная инфекция проявляется воспалением слизистых оболочек, сопровождающееся гнойными или слизисто-гнойными выделениями из мочеиспускательного канала (уретры) у мужчин, из уретры и шейки матки у женщин. Вызванная нейссериями инфекция у женщин протекает более стёрто, несмотря на это, приводя к серьёзным осложнениям. Так, при обследовании бесплодных женщин не столь уж редко обнаруживается скрыто протекающая гонорейная инфекция.

Источником заражения чаще являются больные с хроническими, малосимптомными формами гонореи, которые не считают имеющиеся у них симптомы свидетельством венерического заболевания.

Микробиологическая диагностика. Основной метод диагностики – бактериоскопия препаратов гнойного отделемого, окрашенных по Грамму и метиленовым синим. При отсутствии результатов бактериоскопии используют бактериологический метод.

Характерные признаки гонореи при бактериоскопии ("в мазке"): внутриклеточно расположенные, грамотрицательные, диплококки, причём каждый из кокков имеет бобовидную форму.

Бактериоскопия весьма эффективна при острой гонорее, при качественной подготовке больного к исследованию, правильном взятии материала . В случае отрицательного результата показано повторное исследование в течение 3 последующих дней с использованием провокации. Из каждого очага для бактериоскопии берут мазки на два стекла: один для ориентировочного исследования после окраски метиленовым синим, другой - для окраски по Граму , что позволяет дифференцировать грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы.

Культуральный метод ("посев" ) применяется при неоднократном получении отрицательного результата при бактериоскопическом исследовании при подозрении на гонорею, наличии в мазке подозрительных на гонококк микроорганизмов, установлении излеченности гонореи ("контроль излеченности"), подтверждение гонорейного процесса у детей и обследование больных трихомониазом после лечения .

В последнее время возрастает значение молекулярно-биологических методов для диагностики гонореи. Особенно ценен метод ПЦР для выявления хронической, стёртой, вялотекущей, лечёной гонореи, когда меняются свойства гонококка и, вызывая патологические процессы в организме, он тем не менее "отказывается" расти на питательных средах, и тем самым, "выдавать" себя. В последнее время ПЦР-диагностику стали использовать для идентификации штаммов микроорганизмов с генетической устойчивостью к антибиотикам (тетрациклину, эритромицину), что представляет серьёзную эпидемиологическую проблему. Официально разрешено применение метода ПЦР в выявлении гонококков , хламидий, микоплазм, уреаплазм и т.д.

Лечение – сочетают назначение антибактериальных препаратов (желательно, с учётом чувствительности гонококков к ним, что определяется по результатам "посева") и средств, стимулирующих иммунитет. Лечение беременных проводят в стационаре с учётом влияния антибиотиков на плод. При хронической гонорее вводят убитую гонококковую вакцину с целью иммунотерапии.

Профилактика . Специфическая профилактика отсутствует.

Конкретн ые цели:

Ознакомиться с биологическими свойствами и классификацией вида Neisseria menigitidis.

Изучит методы микробиологической диагностики менингококковых заболеваний и бактерионосительства.

Ознайомиться с биологическими свойствами вида Neisseria gonorrhoeae и их патогенностью для человека.

Описывать патогенез острой и хронической гонореи.

Выучить методы микробиологической диагностикик гонореи.

Ознакомиться с методами профилактики и специальной терапии гонореи и бленнореи.

Уметь:

Проводить дифференциацию менингококков и грамотрицательных диплококков носоглотки.

Забирать материал для исследования от больных с заболеваниями, вызванными менингококками и гонококками.

Выделять чистые культуры нейссерий.

Трактовать результаты микроскопического исследования нативных препаратов.

Трактовать результаты серологического исследования сыворотки больных на гонорею (РСК).

Теоретические вопросы:

Семейство Neisseriaceae . Род нессерий (Neisseria).

• Биологические свойства.
• Классификация.
• Э волюция патогенности.

Менингококки (Neisseria menigitidis).

• Биологические свойства, классификация.
• Патогенез и микробиологическая диагностика менингококковых заболеваний и бактерионосительства.
• Дифференциация менингококков и грамотрицательных диплококков носоглотки.

Гонококки (Neisseria gonorrhoeae).

• Биологические свойства.
• Патогенность для человека, изменчивость.
• острая и хроническая гонорея.
• И ммунитет. Микробиологическая диагностика гонореи.
• Профилактика и специальная терапия гонореи и бленнореи.

Практические задания, используемые на занятии:

Микроскопия микропрепаратов из чистых культур нейссерий, их анализ и зарисовывание в протокол.

Микроскопия демонстрационных микропрепаратов: мазок из уретры больного гонореей (окраска метиленовым синим), мазок из уретры больного гонореей (окраска по грамму), менингококк в спинно-мозговой жидкости (окраска по Грамму).

Зарисовывание демонстрационных микропрепаратов в протокол.

Оформление протокола .

Литература:

1. Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С. Микробиология с вирусологией и имму-нологией.– Киев: Высшая школа, 1992.- 431с.

2. Воробьев А.В., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбакова А.М. Микробиоло-гия.- М.: Медицина, 1998.- 336с.

3. Медицинская микробиология /Под редакцией В.П. Покровского.– М.: ГЕОТАР-МЕД, 2001.– 768с.

4. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммуноло-гия и вирусология /Учебник для медицинских ВУЗов, С-Пб.: «Специальная литература», 1998.- 592с.

5. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология /Учебник.- 2-е изд., перераб. и доп.– М.: Медицина, 1983.- 512с.

6. Конспект лекции.

Дополнительная литература:

1. Титов М.В. Инфекционные болезни.- К., 1995.– 321с.

2. Шувалова Е.П. Инфекционные болезни.– М.: Медицина, 1990.- 559с.

3. БМЭ, Т. 1,2,7.

Краткие методические указания для работы на практическом занятии.

В начале занятия проводится проверка уровня подготовки студентов к занятию.

Самостоятельная работа состоит из изучения методов микробиологической диагностики менингококковой инфекции. Студенты изучают схему выделения чистой культуры менингококка и микроскопируют готовые зафиксированные мазки из чистой культуры менингококка.

Дальше студенты изучают схему выделения чистой культуры гонококка, знакомятся с правилами забора материала от больных гонореей для проведения прямой микроскопии исследуемого материала и микроскопируют готовые зафиксированные мазки гноя из уретры больных.

Потом студенты зарисовывают микропрепараты и дают необходимые пояснения.

В состав самостоятельной работы входит также микроскопия демонстрационных препаратов и их зарисовывание.

В конце занятия проводится оформление протокола, тестовый контроль и анализ результатов самостоятельной работы каждого студента.

Технологическая карта проведения практического занятия

№ п\п	Этапы	Время в мин.	Способы обучения	Оборудования	Место проведения
	Проверка и кор-рекция выходно-го уровня подго-товки к занятию	20 ’	Тестовые задания выходного уровня	Таблицы, атлас	Учебная комната
	Самостоятель-ная работа	35’	Граф логичной структуры	Иммерсионный мик-роскоп, краски, предметное стекло, бактериологические петли, посевы чистых культур бактерий.
	Самоконтроль и коррекция усвоенного материала	15’	Целевые обучающие программы
	Тестовый контроль	15’	Тесты
	Анализ резуль-татов работы	5 ’

Целевые учебные задания:

1. При бактериоскопическом исследовании слизи с задней стенки носоглотки выделены грамотрицательные кокки, напоминающие кофейные зерна и расположенные парами или тетрадами. Назовите возбудитель, который был изолирован бактериологом?

A. Acinetobacter calcoaceticum.

В. Staphylococcus aureus.

С. Neisseria gonorrhoeae.

D . Moraxella lacunata.

Е. Neisseria meningitidis.

1. При исследовании гнойных выделений с шейки матки выявлено в них грамнегативные диплококки, расположенные как в лейкоцитах, так и вне них. Назовите возбудителя гнойного воспаления шейки матки в этом случае.

А . Chlamidia trachomatis.

В . Neisseria gonorroeae.

С . Trichomonas vaginalis.

D. Haemophilus vaginalis.

Е. Toxoplasma gondii.

1. При бактериологическом исследовании материала от больного с подозрением на хроническую гонорею, роста микроорганизмов на специальных питательных средах не обнаружено. Какие методы диагностики следует применить, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз хронической гонореи?

Поставить РСК, аллергическую пробу с гонококковым аллергеном.

Определить титр антител в сыворотке крови больного, используя РПГА

Биологический метод

Иммунную электронную микроскопию

Повторить посев исследуемого материала на дифференциально-диагностические среды

1. Из гноя, взятого из уретры больного с подозрением на острую гонорею, приготовлен мазок и окрашен по Граму. При микроскопии его обнаружено большое количество кокков. Какие тинкториальные свойства увиденны х микроорганизмов и характер их расположения в препарате будут свидетельствовать в пользу предполагаемого диагноза?

А. Грамположительные кокки, расположенные внутри и вне лейкоцитов

В. Грамотрицательные диплококки, расположенные внутри и вне лейкоцитов

С. Грамположительные тетракокки, расположенные вне лейкоцитов

D . Грамотрицательные тетракокки

Е. Грамположительные кокки, расположенные в виде цепочек

1. На специальной питательной среде после посева гнойного выделения из уретры появились нежные голубые колонии. При микроскопии препаратов в них выявлены грамотрицательные бобовидные диплококки. Возбудителем какой болезни они являются?

А. Уреаплазмоза

В. Сифилиса

С. Хламидиоза

D . Гарднерелеза

Е. Гонореи

1. При посеве осадка спинномозговой жидкости, полученной у ребенка с диагнозом «эпидемический цереброспинальный менингит» на специальной среде выросли нежные колонии с голубоватым оттенком. Микроорганизмы, которые их образовали, были идентифицированы как нейссерии. Какой тест необходимо использовать для определения патогенности выделенных у этого больного нейссерий?

А. Реакция гемолиза

В. Лецитовителазная активность

С. Реакция плазмокоагуляции

D . Оксидазная реакция

Е. Реакция ферментации манита в анаэробных условиях

1. От больного ребенка цереброспинальным менингитом получили спинномозговую жидкость мутного характера, содержащую большое количество лейкоцитов. Какую из серологических реакций следует провести для экспресс-диагностики заболевания?

A . Реакцию преципитации

B . Реакцию агглютинации

C . Реакцию связывания комплемента

D . Р еакцию гемагглютинации

E . Реакцию нейтрализации

1. У больного ребенка с явлениями гнойного кератоконъюнктивита врач-офтальмолог заподозрил бленнорею (гонорейный конъюнктивит). Какими методами лабораторной диагностики следует воспользоваться для подтверждения диагноза?

A . Микроскопическим и бактериологическим

B . Серологическим и аллергическим

C . Биологическим и методом фагодиагностики

D . Биологическим и аллергическим

E . Микроскопическим и серологическим

1. Больному ребенку врач поставил диагноз «менингококковый назофарингит». Какой метод лабораторной диагностики наиболее рациональный для подтверждения диагноза?

A . Бактериологический

B . Биологический

C . Серологический

D . Микроскопический

E . Аллергический

1. У больного С., который лечится в кожно-венерологическом диспансере по поводу хронической гонореи, диагностировали острую гонорею. Какой вид инфекции развился у больного в этом случае?

A . Реинфекция

B . Суперинфекция

C . Вторичная инфекция

D . Персистирующая инфекция

E . И напарантная инфекция

1. В детском саду провели обследование детей и персонала в целях выявления менингококкового носительства. Подберите метод микробиологического исследования.

A . Бактериологический

B . Аллергический

C . Бактериоскопический

D . Биологический

E . Серологический

1. При бактериоскопии осадка спинномозговой жидкости больного с подозрением на менингит были выявлены грамотрицательные диплококки. Для подтверждения диагноза осадок спинномозговой жидкости посеяли на питательную среду. Какая среда из перечисленных была использована?

A . Сывороточный агар

B . МПА с линкомицином

C . Кровяной агар с пенициллином

D . Кровяной агар с линкомицином

E . МПА с ристомицином

Алгоритм лабораторной работы:

1. Проверка уровня подготовки студентов к занятию: решение исходных тестов.

2. Изучение методов микробиологической диагностики менингококковой инфекции – схемы выделения чистой культуры менингококка.

3. Микроскопия готовых зафиксированных мазков из чистой культуры менингококка.

4. Изучение схемы выделения чистой культуры гонококка.

5. Ознакомление с правилами забора материала от больных гонореей для проведения прямой микроскопии исследуемого материала.

6. Микроскопия готовых зафиксированных мазков гноя из уретры больного.

7. Зарисовывание микропрепаратов в протокол.

8. Анализ результатов самостоятельной работы каждого студента.

9. Оформление протокола.

Грамотрицательные кокки

Грамотрицательные кокки входят в семейство нейссерий (Neisseriaceae). Семейство получило название на честь А. Нейссера, который первым открыл в 1879 г. один из видов этой группы - возбудителя гонореи. Важное значение в инфекционной патологии человека имеет еще возбудитель менингококковой инфекции. Другие виды принадлежат к условно-патогенным микроорганизмам, которые являются представителями нормальных микробиоценозов человека, но иногда могут вызывать госпитальные инфекции.

Гонококки (Род Neisseria)

Морфология и физиология. Гонококк (Neisseria gonorrhoeae) - возбудитель гонореи и бленнореи - имеет достаточно характерную морфологию. Бактериальные клетки бобовидной формы, расположенные парами, вогнутыми сторонами внутрь и выпуклыми - наружу, грамотрицательные. Размеры их - 0,7-1,8 мкм. В мазках с гноя располагаются внутри лейкоцитов, а в мазках с чистых культур гонококки имеют форму кофейных зерен. Они не образуют спор, неподвижные, но имеют фимбрии, с помощью которых прикрепляются к эпителиальным клеткам мочеполового тракта. При хронической гонорее, а также под воздействием лекарственных препаратов гонококки изменяют форму, размеры, окраску, что необходимо учитывать при лабораторной диагностике заболевания. К питательным средам нейссерии гонореи очень требовательные. В аэробных условиях растут на свежеизготовленных средах с нативным белком (кровь, сыворотка, асцитическая жидкость) при достаточной влажности, 3-10 % СО2 в атмосфере. Колонии мелкие, прозрачные, круглые, с ровными краями и блестящей поверхностью. В бульоне образуют слабую муть и пленку на поверхности. Их ферментативные свойства слабо выражены, из углеводов ферментируют только глюкозу, протеолитические ферменты отсутствуют. Экзотоксин гонококки не выделяют, но имеют термостабильный эндотоксин, токсический для человека и лабораторных животных. Антигенная структура гонококков гетерогенна и изменчива. Она представлена белковыми и полисахаридными комплексами. Описано 16 сероваров, но определение их в лабораториях не проводится.

Экология. Гонореей болеет только человек. Главными биотопами гонококков являются слизистая оболочка половых органов и конъюнктива. Вне организма они существовать не могут, так как быстро погибают от высыхания, охлаждения и действия температуры выше 40°С. Очень чувствительны к растворам нитрата серебра, фенола, хлоргексидина и многим антибиотикам. Однако в связи со значительным увеличением заболеваний в последние годы и неправильным лечением выросло количество нейссерий, стойких к антибиотикам и сульфаниламидным препаратам.

Заболевание человека. Источником гонококковой инфекции является только больной человек. Возбудитель передается половым путем, реже - через бытовые предметы (полотенца, губки и др.). Попав на слизистую оболочку мочеполовых органов, гонококки благодаря фимбриям проявляют высокие адгезивные свойства, фиксируются на эпителиальных клетках, размножаются и проникают в соединительную ткань. Возникает гнойное воспаление уретры, шейки матки. У женщин поражаются также трубы и яичники, у мужчин - предстательная железа и семенные пузырьки. Гонококки редко вызывают генерализируемые процессы, но порою могут вызывать сепсис, воспаление суставов, эндокардит, менингит. При бленнорее новорожденных возникает гнойное воспаление слизистой оболочки глаз.

Иммунитет. Видового иммунитета к гонококкам у человека не существует. Перенесенное заболевание также не оставляет стойкого и длительного иммунитета. Образованные антитела не имеют защитных свойств. Клеточный иммунитет не формируется, фагоцитоз имеет незавершенный характер: гонококки не только хранятся в лейкоцитах, но и размножаются и могут переноситься в другие органы.

Лабораторная диагностика. Исследуемый материал - выделение из уретры, влагалища, шейки матки, моча; при бленнорее - гной из конъюнктивы глаза Основной метод диагностики - микроскопический. Мазки окрашивают по Граму и метиленовой синькой. Выявление при микроскопии бобовидных диплококков внутри лейкоцитов дает возможность поставить диагноз гонореи. Значительно реже проводят выделение чистой культуры и ее идентификацию. При хроническом ходе заболевания используют РСК или реакцию непрямой гемагглютинации. Профилактика и лечение. Предупредительные мероприятия заключаются в проведении санитарно-образовательной работы среди населения, своевременном выявлении и лечении больных. Для индивидуальной профилактики после случайных половых контактов используют 0,05 % раствор хлоргексидина. С целью предупреждения бленнореи всем новорожденным закапывают в глаза раствор пенициллина или нитрата серебра. Вакцинопрофилактика не проводится. Лечат гонорею пенициллином и сульфаниламидными препаратами. При хронических формах с лечебной целью применяют гонококовую убитую вакцину.