Общий клинический анализ крови включает в себя определение скорости оседания эритроцитов, количества гемоглобина, эритроцитов, вычисление цветового показателя, подсчет лейкоцитарной формулы, количества ретикулоцитов, тромбоцитов и описание особенностей морфологии клеток периферической крови.

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ):

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) в норме равна для мужчин 4-10 мм/ч, для женщин - 4-15 мм/ч. Она зависит от количества эритроцитов, их диаметра и объема, вязкости крови, содержания в плазме белковых фракций, желчных кислот и пигментов. При снижении температуры помещения, где проводятся исследования (менее 20 °С), СОЭ замедляется, при повышении - увеличивается.

Расшифровка СОЭ:

Скорость оседания эритроцитов не является показателем, специфическим для какого-либо определенного заболевания, однако ускорение СОЭ, как правило, указывает на появление патологического процесса в организме инфекционно-воспали-тельного характера (пневмония, абсцесс легкого, перитонит, пиелонефрит и т.
п.), инфекционно-аллергического характера (ревматизм, коллагенозы), опухолевого характера (рак, саркома, гемобластозы) и анемического характера.

Особенно выраженное ускорение СОЭ (60-80 мм/ч) характерно для парапротеинемических гемобластозов (миеломная болезнь, болезнь Вальденстрема). Замедление СОЭ наблюдается при полицитемии (увеличении количества эритроцитов) у больных эритремией, хронической пневмонией, язвенной болезнью желудка и луковицы двенадцатиперстной кишки и др. и при значительном сгущении крови. Особенностью детского возраста является снижение СОЭ у детей первой недели жизни.

Расшифровка содержания гемоглобина:

Уменьшение количества гемоглобина в крови является основным лабораторным симптомом анемий различной этиологии.
Содержание гемоглобина варьирует в широком диапазоне в зависимости от степени анемии и ее формы. Так, при железо-дефицитной анемии снижение гемоглобина обычно колеблется в пределах 85-110 г/л. Резкое снижение уровня гемоглобина характерно для острой кровопотери, гипопластической анемии, гемолитической анемии в стадии криза (45-80 г/л), увеличение концентрации гемоглобина (180-210 г/л) наблюдается при эритремии (для диагностики которой важно исследование количества эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, которые при этом заболевании повышаются), легочно-сердечной недостаточности и сгущении крови.

Фракции гемоглобина:

У здорового человека имеется три основных типа гемоглобина: примитивный - Р, фетальный - F, взрослый - А. Тип гемоглобина Р преобладает у плода до трехмесячного возраста, у новорожденного гемоглобин представлен на 20% типом F и соответственно на 80% типом А. У ребенка 4-5 месяцев гемоглобин F составляет 1-2% (как у взрослого человека).

Расшифровка:

Повышение значений гемоглобина F является важным диагностическим критерием для В -талассемии, но также имеет место при других гемолитических анемиях, гипопластической анемии, лейкозах.

Количество эритроцитов, норма:

Количество эритроцитов в норме у мужчин составляет 4,0-5,0 х 10 12/л, у женщин 3,5-4,5 х 10 12/л, .

Расшифровка:

Увеличение количества эритроцитов (эритроцитоз) наблюдается при эритремии (истинной полицитемии Вакеза), у больных с недостаточностью функции внешнего дыхания, например: при хронической пневмонии, пневмосклерозе, синдроме Хамана-Рича и др., а также у людей, проживающих в условиях высокогорного климата.
Уменьшение количества эритроцитов (эритроцитопения) чаще всего имеет место при анемиях в результате кровопотери (постгеморрагические анемии), дефицитных анемиях (железодефицитная, витамин В12-фолиево-дефицитная и др.), анемиях вследствие усиленного распада эритроцитов (гемолитические).

Цветовой показатель:

Цветовой показатель отражает среднее содержание гемоглобина в одном эритроците.

Расшифровка цветового показателя:

По цветовому показателю судят о том, каким является содержание гемоглобина в эритроцитах - нормальным, пониженным или повышенным, что имеет большое диагностическое значение в установлении характера анемии (нормохромная, гипохромная, гиперхромная). При нормальном насыщении эритроцитов гемоглобином цветовой показатель (ЦП) равен единице. У новорожденного ребенка ЦП в среднем составляет 1,2, на 2-3-й день жизни повышается до 1,3, далее снижается, достигая к третьему месяцу жизни величин, нормальных для взрослого (0,85-1,15).
Цветовой показатель менее 0,85 характерен для гипохромных анемий (железодефицитная анемия и др.), для нормохромных анемий составляет от 0,85 до 1,15, а гиперхромные анемии характеризуются ЦП более 1,15 (витамин В12-фолиево-дефицитная анемия, анемия Аддисона-Бирмера).

В диагностике анемии большую роль играет микроскопическое исследование эритроцитов, которое определяет ее характер, и решается на основании изменения величины, формы, окраски эритроцитов и наличия в них различных включений.

Диаметр эритроцитов:

Диаметр эритроцитов в норме составляет в среднем 7,5 мкм.

Расшифровка:

Изменение величины отдельных эритроцитов называется анизоцитозом, который является ранним признаком анемии. Однако у новорожденных анизоцитоз встречается в норме в течение первых 2-3 месяцев жизни. Эритроциты диаметром более 9 мкм называются макроцитами, менее б мкм - микроцитами. Макро-цитоз наблюдается при усиленной регенерации крови, дефиците витамина В12 и др., микроцитоз - при хронических кровопотерях, при дефиците железа.

Эритроциты:

Эритроциты в норме имеют дискообразную форму.

Расшифровка эритроцитов:

Когда эритроциты теряют свою нормальную дискообразную форму и становятся сферовидными, вытянутыми, веретенообразными, то эти изменения формы эритроцитов называют пойкилоцитозом, который указывает на более тяжелое течение заболевания и встречается чаще всего при гемолитических анемиях. При врожденной гемолитической анемии Минковского-Шоффара эритроциты имеют форму маленьких шариков (микросфероциты), при талассемии обнаруживаются эритроциты овальной формы (овалоциты), при серповидноклеточной анемии - серповидные эритроциты (дрепаноциты).

Окраска эритроцитов:

Окраска эритроцитов зависит от количества содержащегося в них гемоглобина и от величины красных кровяных клеток.

Расшифровка:

Эритроциты с нормальной окраской называются нормохромными, с менее интенсивной окраской - гипохромными, с более интенсивной - гиперхромными. Различие в окраске отдельных эритроцитов называют анизохромией. Гипохромия встречается при железодефицитной, хронической постгеморрагической, гипоапластической и некоторых миелотоксических анемиях. Гиперхромия наблюдается при витамин В12-фолиево-дефицитной анемии, пернициозоподобных и некоторых гемолитических анемиях (например, при микросфероцитарной анемии).

Полихроматофилия (появление в мазках крови клеток кроме розово-красных эритроцитов синего, фиолетового и переходных цветов) характерна для различных гемолитических анемий и является показателем регенераторной способности костного мозга в отношении продукции эритроцитов. В норме полихроматофилия встречается только у новорожденных (до 1,5 месяцев жизни). Обнаружение в мазках периферической крови ядерных эритроидных клеток - нормо-бластов - имеет аналогичное диагностическое значение, как полихроматофилия, и характерно для гемолитических анемий, метастазов опухоли в костный мозг. Гигантские ядерные эритроциты - мегалобласты, как и появление базофильной пунктации в эритроцитах связано с патологическим кроветворением.

Резистентность эритроцитов:

Резистентность эритроцитов - стойкость эритроцитов к различным воздействиям. При этом принято определять осмотическую резистентность эритроцитов. У здорового человека начало гемолиза в свежей крови отмечают при концентрации хлорида натрия 0,5-0,45%. А полный гемолиз при 0,4-0,35% раствора хлорида натрия.

Расшифровка:

Понижение осмотической резистентности эритроцитов, то есть появление гемолиза эритроцитов при более высокой, чем в норме концентрации раствора натрия хлорида (0,7-0,75%) наблюдается при наследственном микросфероцитозе, также при аутоиммунной гемолитической анемии. Повышение осмотической резистентности эритроцитов характерно для талассемии, гемоглобинопатии.

Ферментопатия эритроцитов:

Ферментопатия эритроцитов - исследование активности ферментов в эритроцитах. Наиболее распространенной наследственной ферментопатией эритроцитов является дефицит глюкозо-б-фосфатдегидрогеназы (Г-б-ФД). Для диагностики дефицита Г-б-ФД используют количественное определение активности ферментов в эритроцитах. У здоровых людей имеет место образование в эритроцитах единичных телец красного цвета(тельца Гейнца-Эрлиха).

Расшифровка:

В патологических Г-б-ФД эритроцитах появляется большее количество телец (4-6), которые также характерны и для передозировки сульфаниламидов, отравлении анилиновыми красителями, при дефиците других ферментов (глютатион-редуктазы, б-фосфоглюконатдегидрогеназы).

Ретикулоциты:

Ретикулоциты являются важным показателем регенераторной способности кроветворной ткани. В норме на 1000 эритроцитов приходится от 2 до 10 ретикулоцитов.

Расшифровка:

Увеличение ретикулоцитов в периферической крови наблюдается при гемолитических анемиях, особенно в период криза (количество ретикулоцитов может быть 20-30), острых кровопотерях, лечении железом железодефицитной анемии, витамином В12 и фолиевой кислотой витамин В12-фолиево-дефицитной анемии, при полицитемии, а также у новорожденных. Наличие ретикулоцитоза позволяет заподозрить скрытое кровотечение. Снижение количества ретикулоцитов или их полное отсутствие отмечается при арегенераторных гипо-апластических анемиях, а также при не леченой витамин В12-фолиево-дефицитной анемии.

Лейкоцитарная формула:

Лейкоцитарной формулой называют процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов, которые считают в окрашенных мазках крови в пересчете на 100 лейкоцитов и выражают в виде процентного содержания каждого вида белых кровяных клеток. Помимо количественной характеристики лейкоцитарной формулы необходимо проводить качественную оценку морфологического состава кровяных клеток, поскольку это позволяет установить факт наличия у больного патологии кроветворной системы, конкретизировать клинический вариант патологического процесса, степень его выраженности, эффективность лечения (в динамике) и прогноз.

Лейкоциты:

Лейкоциты периферической крови делятся на гранулоциты (клетки, в протоплазме которых имеется зернистость) - базофилы, эозинофилы, нейтрофилы палочкоядерные и сегментарные и агранулоциты (клетки, в протоплазме которых зернистость отсутствует) - лимфоциты и моноциты.

Расшифровка лейкоцитов и норма:

Увеличение или уменьшение количества отдельных видов лейкоцитов может быть абсолютным и относительным. Изменение процентного содержания не всегда соответствует колебанию абсолютных величин, что необходимо принимать во внимание при анализе лейкоцитарной формулы крови.

В крови взрослого человека в норме насчитывают от 4 до 8 х 10 9/л лейкоцитов. Уменьшение числа лейкоцитов (лейкопения) встречается при очень тяжелых инфекционных заболеваниях и токсических состояниях: грипп и многие другие вирусные заболевания, брюшной тиф, дистрофия, голодание, анафилаксия, гиперспленизм, при применении некоторых лекарственных препаратов (сульфаниламиды, бутадион, левомицетин, цитостатики, иммунодепресеанты), токсических веществ (бензол, мышьяк), при лучевой болезни. Отчетливо выражена лейкопения при нейтропениях различного генеза, гипо- и апластической анемиях, а также некоторых заболеваниях эндокринной системы: болезнь Аддисона, болезнь Симмондса.

Увеличение количества лейкоцитов более 8 х 10 9/л называют лейкоцитозом, который, в свою очередь, может быть абсолютным и относительным. Относительный лейкоцитоз возникает вследствие поступления лейкоцитов в ток крови из органов, служащих для них депо. Наблюдается это после приема пищи (пищеварительный лейкоцитоз), интенсивной мышечной нагрузки (миогенный лейкоцитоз), горячих и холодных ванн, сильных эмоций (вегетососудистый лейкоцитоз).

Абсолютный лейкоцитоз может быть обусловлен гиперплазией кроветворной ткани, что наблюдается при лейкозах, а также является временной реакцией крови на воспалительный процесс в организме (пневмония, плеврит, воспалительные заболевания со стороны желчного пузыря и протоков, перитонит, гнойный абсцесс, сепсис, рожа, ангины, инфекционные заболевания бактериального происхождения). Кроме этого, лейкоцитоз может возникать вследствие воздействия экзогенных токсических веществ (угарный газ, нитробензол и др.).

Количество базофилов, норма:

Количество базофилов в периферической крови в норме невелико и колеблется от 0 до 1%.

Расшифровка:

Увеличение количества базофилов наблюдается при диабете, нефрозе, микседеме, в острой стадии аутоиммунной тромбоцитопении, при хроническом миелолейкозе, миелофиброзе. У большинства больных параллельно с увеличением концентрации базофилов прослеживается высокий уровень гистамина в крови и моче. Снижение количества базофилов отмечается при введении кортикостероидов, адреналина, при гипертиреозе и любой стрессовой ситуации.

Количество эозинофилов, норма:

У здоровых взрослых людей в периферической крови содержится от 0 до 5% эозинофилов. У ребенка в норме в крови содержание эозинофилов колеблется от 1 до 4%.

Расшифровка:

Увеличение числа эозинофилов (эозинофилия) наблюдается при гельминтозах (аскаридоз, энтеробиоз, анкилостомидоз, трихинеллез), лямблиозе, лимфогранулематозе, хроническом миелолейкозе, эозинофильной гранулеме, аллергических состояниях (бронхиальная астма, крапивница, сенная лихорадка, пищевая и лекарственная аллергия).

Снижение количества эозинофилов (эозинопения) или полное отсутствие (анэозинофилия) наблюдается в начальном периоде острых инфекционных и воспалительных процессов, инфаркта миокарда. Появление в этих случаях эозинофилов в крови является хорошим прогностическим признаком «эозинофильная заря выздоровления».

Палочко-ядерные и сегментоядерные нейтрофилы, норма:

В норме в периферической крови обнаруживаются палочко-ядерные и сегментоядерные нейтрофилы. У здоровых людей содержится от 1 до 6% палочкоядерных нейтрофилов и от 45 до 70% сегментоядерных.

Расшифровка:

В патологических условиях в периферической крови могут появляться нейтрофилы с круглым ядром, так называемые юные нейтрофилы, либо их предшественники - миелоциты, что обозначается как сдвиг лейкоцитарной формулы влево. Сдвигом лейкоцитарной формулы вправо называется увеличение более зрелых нейтрофилов, то есть сегментоядерных.

Моноциты, норма:

У здоровых людей количество моноцитов в периферической крови составляет 2-9%.

Расшифровка:

При различных патологических состояниях отмечается также уменьшение или увеличение числа моноцитов. В большинстве случаев моноцитоз свидетельствует развитии патоиммунных реакций в организме. Моноцитоз в сочетании с нейтрофилезом наблюдается при затяжном септическом эндокардите, гнойно-воспалительных процессах в организме, при туберкулезе. Абсолютный моноцитоз развивается как специфическая реакция на вирус Эпштейн-Барра и характерен для инфекционного мононуклеоза. Моноцитопения характерна для тяжелых септических заболеваний и гипертоксических форм инфекционных процессов.

Лимфоциты, норма:

Количество лимфоцитов в норме в периферической крови составляет 18-40%.

Расшифровка лимфоцитов:

Увеличение количества лимфоцитов (лимфоцитоз) часто встречается при заболеваниях, сопровождающихся нейтропенией, и является относительным. Абсолютный лимфоцитоз встречается при инфекционном мононуклеозе, хроническом лимфолейкозе, туберкулезе и некоторых инфекционных болезнях (корь, краснуха, ветряная оспа, коклюш). Лимфопения нередко встречается у больных с нейтрофилезом, то есть является относительной.

Абсолютная лимфоцитопения наблюдается при всех заболеваниях, сопровождающихся замещением лимфоидной ткани другими клеточными элементами (лимфогранулематоз, лимфосаркома, острый и хронический миелоидный лейкоз), а также при уремии, тяжелых септических состояниях, распространенном и прогрессирующем туберкулезе, лучевой болезни, длительном применении гормонов.

Изменения морфологического состава периферической крови:

Помимо количественной оценки лейкоцитарной формулы микроскопическое исследование мазков крови позволяет установить качественные изменения морфологического состава периферической крови.

Расшифровка:

Наиболее значительными эти изменения бывают при лейкозах. У больных с острым лейкозом общее количество лейкоцитов может быть сниженным, нормальным или повышенным. Качественный состав периферической крови при этом характеризуется наличием незрелых анаплазированных родоначальных клеток кроветворения - бластов (лимфобластов, монобластов, миелобластов, эритробластов, плазмобластов, мегакариобластов и морфологически не распознаваемых полипотентных и унипотентных клеток-предшественниц.

Нередко периферическая кровь на 90-95% состоит из бластных клеток и только на 5-10% из зрелых лейкоцитов. Разрыв в гемограмме между бластными клетками и зрелыми очень характерен для острого лейкоза и обозначается как лейкемическое зияние, лейкемический провал (hiatus leucemicus). В зависимости от преобладания того или иного вида бластных клеток выделяют соответствующие формы лейкоза: лимфобластный, миелобластный, миеломонобластный, плазмобластный, мегакариобластный, эритролейкоз, эритромиелоз.

При остром лейкозе морфологические изменения касаются не только белой крови, выявляются изменения, касающиеся красной крови в виде анемии (происходит угнетение красного ростка кроветворения, нарушение созревания тромбоцитов). При хроническом лейкозе морфологические изменения периферической крови в основном определяются формой лейкоза, стадией развития патологического процесса, его остротой. Наиболее часто встречаются хронический миелолейкоз и лимфолейкозы. Морфологические изменения периферической крови при хроническом миелолейкозе характеризуются увеличением количества Лейкоцитов за счет выраженного сдвига лейкоцитарной формулы влево вплоть до миелоцитов и промиелоцитов. Нередко при этом в периферической крови повышается количество базофилов и эзинофилов различной степени зрелости (базофильно-эозинофильная ассоциация).

Определенную гематологическую характеристику остроты и степени выраженности хронического миелолейкоза дает сопоставление процентного соотношения зрелых и незрелых нейтрофилов. Небольшое количество миелобластов, промиелоцитов, миелоцитов и метамиелоцитов (незрелых форм) в пределах 10-15% может свидетельствовать о доброкачественном течении лейкемического процесса. При обострении хронического миелолейкоза в периферической крови увеличивается количество бластных клеток, что обозначается как бластный криз. Количество тромбоцитов при хроническом миелолейкозе в ранних стадиях заболевания бывает повышенным или нормальным, а в конечной стадии уже сниженным. Анемия не характерна для начальных стадий хронического миелолейкоза, а появляется только в развернутой стадии и прогрессивно нарастает в терминальной.

При хроническом лимфолейкозе морфологические изменения лейкоцитарной формулы представлены в виде лейкоцитоза, главным образом за счет лимфоцитов, количество которых может доходить до 80-90%, причем лимфоциты обычно малого размера. Большинство клеток представлено зрелыми элементами. При относительно доброкачественном течении заболевания количество незрелых лимфоидных клеток (пролимфоцитов, лимфобластов) составляет около 5-10%. Увеличение количества этих клеток указывает на обострение патологического процесса.

Показатели гемограммы при хроническом моноцитарном лейкозе характеризуются увеличением количества моноцитов до 30-40% на фоне выраженного лейкоцитоза до 15000-30 000.

Эритремия (болезнь Вакеза) характеризуется изменениями в гемограмме в виде эритроцитоза, лейкоцитоза, тромбоцитоза, повышением концентрации гемоглобина до 160-200 г/л на фоне уменьшения СОЭ до 1-2 мм/ч.

Тромбоциты, норма:

Количество тромбоцитов в норме колеблется от 180 х 10 9/л до 320х10 9/л.

Расшифровка тромбоцитов:

Уменьшение количества тромбоцитов (тромбоцитопения) имеет место при болезни Верльгофа, лейкозах, отравлении бензолом, анилином. Увеличение количества тромбоцитов (тромбоцитоз) отмечается при кровопотерях, после спленэктомии и при некоторых формах злокачественных новообразований.

Плазматические клетки:

Плазматические клетки в норме практически не встречаются.

Расшифровка:

Увеличение числа плазматических клеток наблюдается при всех заболеваниях, сопровождающихся напряжением лимфоидного аппарата, в частности при инфекционном мононуклеозе. Также имеет место при таких инфекционных заболеваниях, как корь, краснуха, ветряная оспа, скарлатина, серозные менингиты.

Волчаночные клетки:

Волчаночные клетки (L Е-клетки) образуются в результате фагоцитоза нейтрофильными лейкоцитами, реже моноцитами ядер клеток, содержащих ДНК. У здоровых людей волчаночные клетки отсутствуют.

Расшифровка:

Обнаружение L Е-клеток является специфическим симптомом системной красной волчанки. Однако получение отрицательного результата не исключает данного заболевания, так как это бывает в раннем периоде заболевания.

Цель занятия. Научиться дифференцировать форменные элементы крови по окрашенным мазкам, выводить лейкограмму.

Объекты исследования и оборудование. Окрашенные мазки крови животных разных видов.

Микроскопы, препаратоводители, 11-клавишные счетчики, стеклянные палочки, иммерсионное масло, бензин, вата.

Исследование окрашенных мазков крови. Окрашенные мазки крови исследуют под микроскопом, используя при этом объектив X 90 и иммерсионное масло. Последнее после работы удаляют с мазка сухой ваткой, чтобы сохранить препарат.

В окрашенных мазках крови определяют размер, форму, характер окраски клеток и их структурных элементов - ядра, цитоплазмы и включений; соотношение между форменными элементами различных видов.

Эритроциты. При оценке эритроцитов обращают внимание на их размер, форму, окраску и клеточные включения. Эритроциты млекопитающих в мазках крови округлой формы (у верблюдов и лам овальной), у птиц и рыб - овальной формы и содержат ядро. Эритроциты окрашиваются кислыми красителями в розовый цвет (ацидофильны), причем центральная часть оказывается более бледной, так как центр эритроцита вогнут. Такое окрашивание - более интенсивное по периферии и бледное в центре - называют ортохромазией, а эритроциты - ортохромными клетками. Диаметр эритроцитов составляет (1 · 10" 3 мм): у крупного рогатого скота 4,4-7,7; овец 3-5,6; коз 2,1-4,9; лошадей 4,5-7,5; свиней 4-9; собак 4,2-10; кошек 5-6,2; кур 9,3 ? 5,6-12,2 х 7,2; рыб 9,8 ? 14-10,2 ? 16,8.

Тромбоциты. В мазках крови тромбоциты, или кровяные пластинки, овальной, округлой или угловатой формы. Периферическая, гомогенная их часть - гиаломер - окрашивается в голубой цвет, а центральная, состоящая из зернышек, - грануломер - в фиолетовый или в красно-фиолетовый. Чаще тромбоциты в мазках лежат группами, образуя конгломераты из пяти-шести пластинок и более, что указывает на их хорошую способность к агглютинации. Диаметр тромбоцитов 1-4 мкм.

Лейкоциты. В зависимости от свойств цитоплазмы и характера зернистости лейкоциты подразделяют на гранулоциты, или зернистые (базофилы, эозинофилы и нейтрофилы), и агранулоциты, или незернистые (лимфоциты и моноциты) (см. цв. вкл., рис. 9-15).

Базофилы (Б) - округлой или овальной формы клетки диаметром 11 - 17 10" 3 мм. У зрелых форм ядро полиморфное, плохо заметное, с неясными очертаниями, окрашено в фиолетовый цвет или слабо-фиолетовый с бордовым оттенком цвета. Цитоплазма бледно-розовая или бледно-фиолетовая, что обусловлено растворением гранул в процессе приготовления мазка. Крупные гранулы округлые или расплывчатые, окрашены в темно-фиолетовый, темносиний или черный цвет, нередко разрушены - на их месте образуются вакуоли.

Эозинофилы (Э) - крупные округлой формы клетки диаметром 9-22 10’ 3 мм. Ядро окрашено в фиолетовый цвет. Цитоплазма нежно-голубая с розово-красной или ярко-красной зернистостью (гранулы круглые или слегка овальные). Характер ядра зависит от степени зрелости клетки: у зрелых форм ядро сегментировано, у молодых округлое. У лошадей, крупного рогатого скота и свиней ядро чаще состоит из двух сегментов, а у овец, коз и собак - из трех. Наиболее крупные гранулы встречаются в цитоплазме эозинофилов у лошадей (до 3 10" 3 мм), собак и кроликов

(до 1,5 10мм); у кошек гранулы расположены очень густо, нередко они палочковидной формы и неодинаковых размеров. При растворении гранул на их месте образуются вакуоли, в раздавленных клетках гранулы лежат свободно, «рассыпавшись».

Нейтрофилы (Н) - клетки округлой формы, размером 9,5- 14,5 · 10" 3 мм. В зависимости от формы и степени окраски ядра различают миелоциты, юные (метамиелоциты), палочкоядерные и сегментоядерные нейтрофилы.

Миелоциты (М) - наиболее молодые клетки с неравномерно окрашенным в фиолетовый цвет массивным круглым или овальным ядром, расположенным чаще эксцентрично. Для ядерного хроматина характерно чередование темных и светлых участков. Цитоплазма клеток розового или светло-синего цвета, с мелкой нежной розовой зернистостью. В крови здоровых животных миелоциты не встречаются.

Юные (Ю) нейтрофилы содержат окрашенное в фиолетовый цвет ядро: широкое с центральным вдавлением (бобовидной формы) или немного вытянутое (подковообразное). Светлые участки хроматина сменяются более темными. Цитоплазма розового цвета, иногда плохо прокрашена, с мелкой, нежной розовой зернистостью. В периферической крови взрослых животных юные нейтрофилы не всегда удается обнаружить.

Палочкоядерные (Я) нейтрофилы характеризуются трансформацией ядра в колбасовидную или палочковидную форму. Ядро неравномерно окрашено в темно-фиолетовый цвет; приблизительно одного диаметра по всей длине, но может быть изогнуто в виде дужки, полумесяца, латинской буквы S, на концах булавовидно вздуто; в отдельных местах на ядре заметны небольшие перехваты-мостики шириной не менее */ 2 основной части ядра. Цитоплазма бледно-розового цвета, с азурофильной зернистостью, содержит множество мелких (часто плохо видимых), равномерно расположенных гранул.

Сегментоядерные (С) нейтрофилы отличаются от палочкоядерных лишь характером ядра, которое состоит из двух - пяти сегментов, соединенных тонкими, иногда едва заметными перемычками. Ядро окрашивается неравномерно в темно-фиолетовый цвет.

Лимфоциты (Л) по размеру подразделяют на малые (6-9 · 10’ 3 мм), средние (10-14 · 10" 3 мм) и большие (14 · 10~ 3 мм и более). Доминирующий компонент лимфоцита - ядро округлой или слегка овальной формы, интенсивно окрашенное в темно-синий цвет. Хроматин распределен таким образом, что более темные участки переходят без резкой границы в более светлые. Цитоплазма светло-синяя, обычно с перинуклеарной зоной (просветление вокруг ядра), иногда в ней выявляют азурофильную зернистость. Больше всего в периферической крови обнаруживают малые лимфоциты (до 95 %), у которых цитоплазма расположена в виде узкого ободка, или «серпа», вокруг темноокрашенного ядра.

Моноциты (М) - это крупные клетки диаметром 12-24· 10’ 3 мм, округлой или нередко неправильной формы. Ядро характеризуется разнообразием формы: может быть бобовидным, округлым, многолопастным, подковообразным; окрашивается неравномерно в слабофиолетовый цвет с темно-фиолетовыми пятнами, так как хроматин ядра рыхлый, распределен неравномерно, как бы образуя ячейки разных размеров и формы. Цитоплазма моноцитов серо-голубого, серо-синеватого цвета со светлым фиолетовым оттенком, вблизи от ядра содержит мелкую пылевидную зернистость.

Особенности клеток крови птиц. У всех птиц в отличие от млекопитающих эритроциты овальной (эллипсоидной) формы, по размеру больше лейкоцитов, содержат ядро. Тромбоциты веретенообразной формы и тоже содержат ядро. Среди лейкоцитов выделяют псевдоэо- зинофилы, которые соответствуют нейтрофилам млекопитающих. Цитоплазма псевдоэозинофилов содержит крупные красного цвета гранулы в виде зерен или палочек; ядро окрашено в сине-фиолетовый цвет. У истинных эозинофилов гранулы округлой формы и неодинаковые по размерам, розового цвета; ядро состоит из двух - пяти сегментов, окрашивается в темно-сине-фиолетовый цвет более интенсивно, чем у псевдоэозинофилов.

Выведение лейкограммы (лейкоцитарной формулы). Лейкограмма представляет собой процентное соотношение между отдельными видами лейкоцитов в крови.

Методы дифференциального подсчета лейкоцитов. Лейкограмму выводят по окрашенным мазкам в иммерсионной системе путем дифференциального подсчета 100 (лучше 200) лейкоцитов одним из приводимых далее методов (рис. 7.11).

Четырехпольный метод (по Шиллингу): с каждой стороны мазка в начале и в конце его (т.е. на четырех исследуемых участках) определяют по 25 лейкоцитов (или по 50, если считают 200 клеток). При этом от края мазка углубляются на три-четыре поля зрения, затем продвигаются на два-три поля вдоль мазка и возвращаются к его краю. Каждый найденный лейкоцит регистрируют на 11-клавишном счетчике.

Рис. 7.11.

1 - четырехпольный; 2 - трехпольный; 3 - однопольный; 4 - ступенчатый

Трехпольный метод (по Филиппченко): клетки подсчитывают на трех участках, расположенных поперек мазка (от одного края до другого). В начале мазка подсчитывают 35 (или 70) лейкоцитов, в середине 30 (или 60) и в конце мазка 35 (или 70) клеток.

Однопольный метод (по Мухину): подсчитывают 100 лейкоцитов в средней части мазка, проходя поперек его от одного края до другого и обратно.

Ступенчатый метод: подсчет клеток начинают от одного края и ведут по зигзагообразной линии к концу мазка. Выводить лей- кограмму этим способом рекомендуют у крупного рогатого скота при диагностике лейкозов.

При записи результатов отдельные виды лейкоцитов располагают в такой последовательности: базофилы (Б), эозинофилы (Э), нейтрофилы - миелоциты (М), юные (Ю), палочкоядерные (П), сегментоядерные (С), лимфоциты (Л), моноциты (М). Лейкограмма крови здоровых животных представлена в табл. 7.3.

Для дифференциального подсчета лейкоцитов можно использовать такие приборы, как «Техникой», Hemalog В (Н-В), «Культер» модель ВИГ-3.

Таблица 7.3

Лейкограмма крови здоровых животных, %

Нейтрофилы

животного

* Псевдоэозинофилы.

Определение абсолютного числа отдельных видов лейкоцитов в 1 10 3 мл крови. Сначала необходимо подсчитать лейкоциты и вывести лейкограмму. Затем число лейкоцитов умножают последовательно на процент клеток каждого вида лейкограммы и делят на 100, получая абсолютное количество отдельных форм лейкоцитов в 1 · КГ 3 мл крови.

Например, у коровы в 1 · 10 мл крови определено 8000 лейкоцитов, а в лейкограмме процентное содержание лейкоцитов составляет: Б - 1, Э - 5, П - 4, С - 28, Л - 55, М - 7. Чтобы вычислить содержание лейкоцитов каждого вида в 1 · 10" 3 мл крови, составляют соответствующие пропорции. Для базофилов пропорция будет иметь следующий вид: 100% лейкоцитов - 8000 лейкоцитов; 1% базофилов - X базофилов, откуда х = 1 · 8000: 100 = 80. Таким образом, в 1 · 10‘ 3 мл крови содержится 80 базофилов. Подобным образом определяют абсолютное количество лейкоцитов других видов и получают следующие значения: Б - 80, Э - 400, П - 320, С - 2240, Л - 4400, М - 560.

Изменения лейкограммы. При различных заболеваниях лейкограм- ма у животных может изменяться в трех направлениях: увеличиваться или уменьшаться содержание лейкоцитов отдельных видов (видовые лейкоцитозы и лейкопении - нейтрофилия и ней- тропения, лимфоцитоз и лимфоцитопения, эозинофилия и эозино- пения, моноцитоз и моноцитопения); появляться молодые незрелые формы (нейтрофилии со сдвигом ядра влево); возникать патологические изменения в ядре и цитоплазме лейкоцитов.

Каждый вид лейкоцитоза может быть абсолютным и относительным. Абсолютный видовой лейкоцитоз характеризуется увеличением абсолютного числа лейкоцитов данного вида при нормальном или повышенном общем числе лейкоцитов в крови. Относительный видовой лейкоцитоз сопровождается уменьшением общего числа лейкоцитов и преобладанием в крови лейкоцитов данного вида за счет уменьшения числа других форм клеток, при этом абсолютное число лейкоцитов преобладающего вида остается в пределах нормы.

Нейтрофилия (нейтрофилез, нейтрофильный лейкоцитоз) - увеличение числа нейтрофилов. В клинической практике встречается чаще всего. Одновременно с увеличением процента нейтрофилов в лейкограмме возрастает процент палочкоядерных форм и могут появиться юные нейтрофилы и миелоциты, т.е. происходит ядерный сдвиг «влево» (в лейкограмме эти разновидности нейтрофилов записывают левее сегментоядерных форм). Заметное возрастание процента только сегментоядерных нейтрофилов обозначают как ядерный сдвиг «вправо». Различают четыре разновидности нейтрофилии.

Нейтрофилия с простым регенеративным сдвигом характеризуется увеличением числа палочкоядерных нейтрофилов до 10-13%; процент сегментоядерных клеток при этом в норме или слегка уменьшен; общее число лейкоцитов увеличено незначительно. Наблюдают при хронических и скрытых инфекциях (сап, туберкулез легких), при легкопротекающих острых инфекциях, протозойных заболеваниях, эндокардите, гнойных осумкованных процессах с доброкачественным течением (нагноившиеся раны, местные гнойные очаги).

Нейтрофилия с резким регенеративным (гиперрегенеративным) сдвигом сопровождается появлением в периферической крови юных нейтрофилов и миелоцитов, процент палочкоядерных нейтрофилов также повышен; общее число клеток увеличено. Встречается при острых инфекциях (острый сап, контагиозная плевропневмония, мыт, перипневмония крупного рогатого скота и др.), сепсисе, перитоните, тяжелом фарингите и других септических процессах.

Нейтрофилия с дегенеративным (гипопластическим) сдвигом характеризуется увеличением числа палочкоядерных нейтрофилов, при этом процент сегментоядерных клеток уменьшен; в нейтрофилах наблюдают признаки дегенеративных изменений (бесструктурный характер ядра, наличие токсической зернистости и вакуолей в цитоплазме), появляются атипические клетки. Общее число лейкоцитов в норме или даже уменьшено. Это состояние развивается при длительном и сильном воздействии на кроветворные органы бактерийных токсинов, отравлениях химическими веществами, при тяжелых гельминтозах, гиповитаминозах, кахексии, раке.

Нейтрофилия со сдвигом ядра вправо характеризуется увеличением содержания старых, гиперсегментированных (более пяти сегментов) нейтрофилов при нормальном или незначительно сниженном проценте палочкоядерных форм. Она может быть трех вариантов:

  • незначительное повышение процента сегментоядерных нейтрофилов на фоне небольшого лейкоцитоза, наблюдаемое после кро- вопотерь, при легком течении инфекций, мышечном напряжении;
  • увеличение числа сегментоядерных нейтрофилов при нормальном или пониженном числе лейкоцитов, что встречается у старых и истощенных животных;
  • значительное возрастание числа сегментоядерных нейтрофилов с появлением в них признаков дегенерации при понижении или отсутствии в лейкограмме палочкоядерных форм и выраженной лейкопении, что отмечают при хронических септических процессах, раке, тяжелопротекающих инвазионных заболеваниях. Нейтропения - уменьшение процента нейтрофилов в лейкограмме. Наблюдают в период выздоровления при инфекционных, вирусных болезнях, протекающих с лимфоцитозом (чума свиней, инфекционная анемия). Резко выраженную нейтропению (агранулоцитоз) отмечают при апластических и гипопластических процессах, в результате применения некоторых лекарственных средств (ци- тостатические препараты, используемые при лечении рака, сульфаниламиды, антибиотики и др.), воздействия ионизирующего излучения.

Л имфоцитоз - увеличение (относительное и абсолютное) процента лимфоцитов в лейкограмме - встречается преимущественно при хронических вирусных и бактериальных инфекциях (бруцеллез, туберкулез), хрониосепсисе, интоксикациях, при истощении, анаплазмозе, бабезиозе (пироплазмозе), чуме свиней, стахиботриотокси- козе, хроническом катаре желудка, сильных ожогах кожи, при поражении желез внутренней секреции (сахарный диабет, тиреотоксикоз), в период выздоровления при острых инфекциях, а также при лимфолейкозе.

Лимфоцитопения (лимфопения) - понижение содержания лимфоцитов в крови. Чаще всего лимфопения сопровождает нейтро- филию, что наблюдают при сепсисе (тяжелопротекающие гнойные и септические заболевания), туберкулезе, ботулизме, кровопятнистой болезни, чуме свиней. Устойчивая лимфопения служит одним из важных признаков приобретенного иммунодефицита, для диагностики которого важно также знать общее число лимфоцитов и их субпопуляций - В- и Т-лимфоцитов.

Эозинопения (анэозинофилия) - понижение процента эозинофилов в лейкограмме. Наблюдают при сепсисе, вирусных заболеваниях, бабезиозе (пироплазмозе), интоксикациях, уремии, при апластических состояниях, в стрессовых ситуациях, при В ^-дефицитной анемии, в терминальную стадию лимфолейкоза, а также после применения стероидных гормонов.

Моноцитоз - увеличение процента моноцитов в лейкограмме. Наблюдают при затухании инфекционного процесса, что указывает на благоприятный исход болезни. Моноцитоз может встречаться при нейтрофилиях (сепсисе) и лимфоцитозах с нейтропенией (пиро- плазмидозы, нутталиоз, трипанозамоз) и др., а также при хронической инфекционной анемии, туберкулезе, листериозе, ботулизме, некоторых формах лейкоза, злокачественных новообразованиях, язвенном перикардите.

Моноцитопения - уменьшение процента моноцитов в лейкограмме. Встречается при сильно выраженных нейтрофилиях, вызванных септическими заболеваниями. Полное исчезновение моноцитов считают неблагоприятным прогностическим признаком.

Базофилия - увеличение процента базофилов в лейкограмме. Отмечают при хроническом миелолейкозе, гельминтозах, аллергических состояниях, голодании, чуме свиней, паралитической миоглобинурии.

Микроскопия мазка крови – исследование под микроскопом препарата, приготовленного из капли крови.

Выполнение микроскопии мазка крови является опциональной частью общего анализа крови или лейкоцитарной формулы и отдельно не производится.

Синонимы русские

Микроскопическое исследование мазка крови, мазок крови, микроскопия крови, ручной подсчет лейкоцитарной формулы, мазок периферической крови.

Синонимы английские

Blood Smear, Peripheral smear, Manual differential, Red blood cell morphology, White Blood cell morphology, Peripheral blood smear, Blood Film Examination, Blood Film

Для чего используется этот анализ?

  • Чтобы определить нарушения формы и размера, а также изменения количества эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, различные типы лейкоцитов (включая незрелые формы) и их процентное соотношение.
  • Для диагонстики различных заболеваний, которые связаны с нарушениями образования, функции или с избыточным разрушением форменных элементов крови.
  • Чтобы отслеживать образование клеток крови и степень их зрелости при лейкозах, после химио- или лучевой терапии, а также при нарушениях образования гемоглобина.
  • Когда по результатам общего анализа крови и лейкоцитарной формулы, назначаемым по самому широкому кругу показаний, выявлено значительное увеличение количества лейкоцитов, атипичные или незрелые клетки.
  • При подозрении на заболевание, влияющее на клетки крови.
  • При приеме лекарств, которые могут влиять на производство клеток крови.

Какой биоматериал можно использовать для анализа?

Венозную или капиллярную кровь.

Общая информация об исследовании

Исследование позволяет морфологически оценить клетки (форменные элементы) крови (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты), а также выполнить их подсчет. Клетки крови образуются и созревают в красном костном мозге и затем выбрасываются в общий кровоток. У каждой разновидности клеток свои функции: лейкоциты отвечают за борьбу с инфекционными агентами, эритроциты – обеспечивают доставку кислорода в ткани и удаление из них углекислого газа, тромбоциты являются важнейшим звеном системы гемостаза. В физиологических условиях количество и морфологические признаки клеток крови стабильны и не выходят за рамки референсных значений. При различных заболеваниях количество и свойства (форма, объем, цвет, наличие включений, их количество и пр.) закономерно изменяется. По этой причине оценка клеточных элементов в мазке крови является универсальным тестом при диагностике многих патологических состояний и широко применяется в практике врача практически любой специализации.

Мазок периферической крови – это «моментальный снимок» клеток крови в том виде, в каком они находятся в момент взятия образца. Для выполнения исследования венозную или капиллярную кровь помещают на предметное стекло, которое должно быть тщательно обезжирено. Затем другое стекло ставят на предметное стекло под углом 45" и проводят вдоль капли крови так, чтобы она растеклась тонким слоем по ширине шлифованного стекла. Затем мазок фиксируют, чтобы форменные элементы крови были более устойчивы. После этого мазок окрашивают специальным красителем, который делает клетки и их элементы более яркими, и высушивают. После чего врач в лаборатории изучает мазок под микроскопом.

Врач может определить различные типы лейкоцитов (эозинофилы, нейтрофилы, лимфоциты, базофилы, моноциты), их незрелые формы, а также процентное содержание каждого из типов этих клеток, посмотрев больше 100 клеток.

По цвету эритроцитов можно судить о содержании в нем гемоглобина.

Эритроциты

Нормальные зрелые эритроциты имеют одинаковый размер – около 7,5 мкм. Это безъядерные клетки в виде пончика (двояковогнутые диски). Такая форма увеличивает площадь поверхности газообмена, что способствуют выполняемой им функции – переносу кислорода от легких к тканям и двуокиси углерода (СО2) обратно в легкие путем связывания их с гемоглобином. Кроме того, эта форма позволяет эритроцитам деформироваться и проходить через узкие кровеносные сосуды – капилляры (диаметром до 2-3 мкм). Благодаря наличию гемоглобина при обычной окраске эритроциты имеют красный цвет, менее яркий в центре клетки.

Продолжительность жизни эритроцита в норме около 120 дней.

Не все эритроциты в кровяном русле имеют одинаковую форму и размер, однако значительное количество измененных клеток свидетельствует о какой-то патологии.

Нейтрофилы

При окраске по Романовскому нейтрофилы выглядят как светлые клетки, содержащие маленькие розово-фиолетовые гранулы. Поэтому их еще называют гранулоцитами. Эти гранулы содержат определенные ферменты и белки, способные нейтрализовывать и уничтожать микроорганизмы. Нормальные зрелые нейтрофилы имеют ядра с 4-5 долями или сегментами, поэтому называются сегментоядерными нейтрофилами.

Для чего используется исследование?

Пока не появились автоматические анализаторы, каждый раз, когда выполнялся общий анализ крови, проводилось микроскопическое исследование мазка крови, так как определить процентное соотношение различных форм лейкоцитов (лейкоцитарную формулу) по-другому было нельзя. В современных анализаторах подсчет лейкоцитарной формулы осуществляется автоматически. Однако при подозрении на наличие патологических форменных элементов крови микроскопия мазка крови опытным врачом по-прежнему является лучшим способом выявления и оценки атипичных и незрелых клеток.

Когда назначается исследование?

Существует достаточно широкий круг заболеваний и расстройств, при которых могут изменяться свойства клеток, циркулирующих в кровяном русле. В норме в кровь из костного мозга попадают только зрелые клетки, однако при ряде заболеваний, например при лейкозах, в кровь могут попадать незрелые клетки – бласты. При некоторых состояниях, например при массивной инфекции, в лейкоцитах могут появляться характерные примеси, сами клетки могут становиться атипичными, как при инфекционном мононуклеозе. При недостатке железа или витамина B12, при врожденных нарушениях синтеза гемоглобина могут изменяться свойства и внешний вид эритроцитов. Обнаружение в мазке таких патологических клеток в большом количестве позволяет заподозрить вызвавшее их заболевание и назначить дополнительное обследование.

Мазок крови может регулярно назначаться пациентам с онкологическими заболеваниями костного мозга, лимфоузлов для наблюдения за динамикой состояния и контроля за эффективностью лечения.

Что означают результаты?

Изменения в мазке крови не всегда позволяют поставить диагноз. Как правило, они указывает на наличие некоего заболевания, что предполагает дальнейшее обследование в целях постановки точного диагноза.

www.helix.ru

Микроскопия - это что такое?

Важность науки в жизни всего общества отрицать очень сложно. Учёные и их разработки дали обществу всё то, чем оно теперь пользуется с радостью и наслаждается. Разработки учёных в разных областях позволяют побеждать смертельные болезни, бороться с психическими расстройствами, создавать уникальную «умную» технику и даже роботов. Возможности науки поистине безграничны. Новые лица всегда приносят с собой новые идеи, которые становятся основой для будущих разработок. Однако множество разработок базируется на простых и проверенных методах.

Многие мудрецы прошлого говорили о том, что существует макро-, микромир. На том этапе развития люди не могли осознать всю глубину этих слов. Ведь макро- и микромир действительно существуют и очень тесно взаимодействуют. Крохотные изменения в структуре клетки могут быть вызваны глобальными изменениями в Солнечной системе. На сегодняшний день доказать или опровергнуть такую взаимосвязь очень сложно, но исследования мира бактерий и клеток говорят о том, что клетка – это маленькая Вселенная.

Микроскопия

Микроскопия – это научное исследование объектов при помощи микроскопа. В переводе с греческого это слово означает «маленький, небольшой». Микроскопия может подразделяться на несколько подвидов: оптическую, многофотонную, рентгеновскую, лазерную и электронную. Цель этого способа исследования заключается в увеличенном наблюдении за объектом и регистрацией замеченных изменений.

История микроскопа

В начале своего исторического развития микроскопы представляли собой оптические приборы, которые использовали лучи видимого света. Такие приборы были очень слабы для наблюдения и подходили только для простейших операций. Идея возникновения электронного микроскопа возникла в тот момент, когда учёные задумались о замене электромагнитного излучения на электронный пучок. Это событие стало опорной точкой для развития электронного микроскопа, который значительно расширил возможности наблюдения за объектом.

Методы микроскопии

Для того чтобы правильно и тщательно обследовать какой-либо объект, необходимо работать по определённому алгоритму. Подобные алгоритмы вырабатываются один раз и применяются годами. Для того чтобы изучать окружающий мир при помощи специальной техники, необходимо владеть особыми методами. Методы микроскопии – это совокупность различных алгоритмов, следуя которым, можно основательно и системно изучить конкретный объект микромира. Прохождение пучка света через микроскоп сопровождается некоторыми изменениями первоначальных характеристик, которые могут быть вызваны структурным строением предмета. Этот процесс может сопровождаться рядов оптических эффектов, таких как отражение, поглощение, преломление, дисперсия и т.д.

Методы световой микроскопии

Световая микроскопия – это система методов, которые используют различные оптические эффекты для достоверного отображения результатов. Видимые элементы и характер полученного изображения будут во многом зависеть от освещения. Всего насчитывается большое количество методов микроскопии: светлого поля, косого освещения, интерференционного контраста, тёмного поля, поляризационный метод, фазово-контрастная, ультрафиолетовая, люминесцентная, инфракрасная микроскопия, конфокальный микроскоп.

Все эти методы имеют определённые достоинства и недостатки. При работе с образцом выбирать тот или иной метод следует исходя из его адекватности в данной ситуации. Сильные и слабые стороны каждого метода не важны в целом, главное, чтобы метод был применим в заданных условиях.

Микроскопия и медицина

Применение микроскопии в медицине имеет огромный потенциал. На сегодняшний день благодаря микроскопам можно исследовать различные клетки организма человека для того, чтобы точно определять состояние здоровья. Клетки организма дают наиболее точный и достоверный результат, который до недавнего времени было невозможно получить, так как микроскопы не могли дать исчерпывающей информации.

Использование таких приборов очень перспективно, ведь методы лечения и диагностики могут разительно преобразиться и вовсе перейти на новый уровень. Исследование с помощью микроскопов известно и применяется длительное время, однако наука стоит на пороге того, чтобы лечить человека клетками. Это уникальная возможность, которая позволит отойти от привычных методов лечения и забыть о лекарствах. Клетка – самый мощный элемент организма. Говорить о том, какую пользу может принести пересадка больному человеку здоровых клеток, просто бессмысленно, ведь это очевидно.

Исследование мочи

Общий анализ мочи – это комплекс мероприятий, которые направлены на исследование свойств мочи и её физико-химического состава. Важными показателями при этом являются цвет, запах, реакция, прозрачность, плотность, а также содержание в моче различных веществ. Микроскопия осадка мочи позволяет определить наличие солей, клеточных элементов и цилиндров. Следует понимать, что моча - это конечный продукт деятельности почек, который может очень точно отображать состояние обменных процессов и крови в организме.

Анализ осадка мочи

Микроскопия мочи позволяет создать более полную картину при полном обследовании организма. Также мазок часто используют для обычной и дифференциальной диагностики болезней мочевыводящих путей и почек. Во время лечения микроскопию мочи могут назначать для того, чтобы получить оценку эффективности докторского вмешательства. Исследование мочи позволяет выявить конкретные или потенциальные проблемы в водно-электролитном балансе организма, также в процессе обмена веществ. Анализ мочи весьма эффективен при диагностике на болезни желудочно-кишечного тракта, а также при инфекционных и воспалительных процессах в организме. Иногда микроскопию мочи используются для того, чтобы следить за состоянием пациента в период терапевтического или хирургического лечения.

Исследование крови под микроскопом

Кровяные тельца формируются в красном костном мозге, а затем выбрасываются в кровоток. Каждая клетка крови выполняет свою определённую функцию. Лейкоциты нужны для борьбы с инфекционными клетками, эритроциты способствуют обогащению клеток кислородов и удалению из них углекислого газа, тромбоциты очень важны для гемостаза. В нормальных условиях тело человека вырабатывает нормативное значение всех клеток, которое не выходит за определённые рамки. При возникновении каких-либо осложнений или при болезни клетки крови могут менять свои размеры, форму, цвет и количество. Только благодаря точному микроскопическому исследованию можно определить состояние клеток и сделать соответствующие выводы.

Кровь – это живительная жидкость организма, которая обеспечивает обмен полезными веществами между всеми клетками. Микроскопия мазка крови – это исследование, которое производится под микроскопом. Исследуется препарат, приготовленный из одной капли крови. Эта процедура входит в общий анализ крови или лейкоцитарную формулу и отдельно не совершается.

Микроскопия мазка

Для чего нужен мазок крови? Микроскопия мазка крови даёт специалисту очень важные знания о состоянии здоровья человека. При помощи этого анализа можно определить количественное соотношение эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов, а также их формы и размер. Кроме того, клинический анализ крови позволяет определять количественное выражение незрелых лейкоцитов, что является очень важным моментом в ряде заболеваний. Также мазок крови позволяет качественно диагностировать заболевания, которые могут быть связаны с нарушениями функций крови, её образования, свёртываемостью, а также разрушением форменных элементов крови. Очень важной задачей микроскопического мазка на кровь является регулярное отслеживание состояния клеток крови, их зрелость после лучевой и химиотерапии, при проблемах с гемоглобином, а также при лейкозах.

Назначается мазок на кровь в том случае, если общий анализ крови показал, что увеличено количественное выражение лейкоцитов, незрелых или атипичных клеток. Для мазка можно использовать биоматериал из крови или капилляров.

Биология и микроскопы

Биология значительно расширяет возможности использования микроскопов. Как уже говорилось раньше, цитология во многом опирается на современные и мощные микроскопы. Микроскопия в биологии открывает для учёных невиданные просторы для опытов и исследований. Современные разработки позволяют уже сейчас говорить о том, какое будущее нас ждёт.

Микроскопия в биологии имеет очень широкое применение. Приборы позволяют исследовать организмы, которые недоступны глазу человека, но очень важны для научных экспериментов. В биологии чаще всего используют метод электронной микроскопии, который даёт изображение за счёт направленного потока электронов. При этом даже световой микроскоп позволяет исследовать живые биологические объекты.

Метод микроскопии в биологии применяется очень активно, так как практически все разновидности применимы для биологических исследований. Интерференционная микроскопия позволяет исследовать прозрачные жидкости и объекты, а также давать их качественный анализ. Это возможно благодаря тому, что луч света, проходя через прибор, раздваивается: одна его часть проходит через объект, а другая - мимо. Таким образом, два луча интерферируют и соединяются, давая полноценное изображение.

Микроскопия в разных областях применения

Область применения микроскопии очень широка. Несмотря на то что изначально микроскопы были предназначены для исследований в области биологии, на сегодняшний день сфера их влияния значительно расширилась. Микроскопия – это комплекс методов, который нашёл своё применение при анализе твёрдых и кристаллических тел, структуре и строений поверхностей. Также микроскопы активно используются в медицине не только для диагностики, но и при выполнении микрохирургических операций. Более того, известно, что учёными был разработан подводный лазерный микроскоп, цель которого состоит в поиске внеземной жизни на Европе.

Также не следует забывать о бурном развитии нанотехнологий, которые немыслимы без микроскопов. Развитие этой отрасли приводит к тому, что разновидности микроприборов постоянно совершенствуются. Более того, появляются новые виды микроскопов, которые предназначены для исследования определённой среды.

Подводя некоторые итоги, следует сказать о том, что микроскопия – это перспективная область, которая с каждым годом развивается всё более активно. Интерес к стволовым клеткам человека, а также развитие нанотехнологий ведёт к тому, что микроскопы становятся неотъемлемой частью любой исследовательской работы.

fb.ru

Лейкоцитарная формула (микроскопия)

    При обнаружении клеток в результате указывается их количество на 100 просчитанных клеток (например, 1/100 или 5/100).

    Микроскопия окрашенного мазка крови является «золотым стандартом» диагностики.Имеет большое значение в диагностике гематологических, инфекционных, воспалительных заболеваний, а также в оценке тяжести состояния и эффективности проводимой терапии.

    1. Несоблюдение правил подготовки к исследованию - взятие крови не натощак, сразу же после проведения диагностических процедур (УЗИ, рентгенография и т.п.), после физиотерапевтических процедур.2. Повышенные физические нагрузки, эмоциональное напряжение, беременность.

    3. Приём некоторых лекарственных препаратов (сульфаниламидов, нестероидных противовоспалительных средств, левомицетина, тиреостатиков, цитостатиков, кортикостероидов, гепарина, леводопа, фенитоина, вальпроевой кислоты, наркотических анальгетиков).

    Единицы измерения

    Нейтрофилы: %Эозинофилы: %Базофилы: %Моноциты: %

    Лимфоциты: %

    Референсные значения

    Палочкоядерные нейтрофилы: 1 – 5%

    Сегментоядерные нейтрофилы:

    Эозинофилы: 0 – 6%Базофилы: 0 – 1,0%

    Моноциты:

    Лимфоциты:

    Повышение

    Прием препаратов (леводопа, фенитоин, вальпроевая кислота, наркотические анальгетики)

    Снижение

    Нейтрофилы: Бактериальные инфекции (брюшной тиф, паратифы, бруцеллез); вирусные инфекции (грипп, корь, ветряная оспа, вирусный гепатит, краснуха); затяжные инфекции у пожилых и ослабленных людей. Гипо- и апластические анемии Наследственные агранулоцитозы Анафилактический шок Тиреотоксикоз Прием цитостатиков Лекарственные нейтропенииЭозинофилы: Тяжелые гнойные инфекции Шок, стресс Отравление солями тяжелых металловМоноциты: Апластическая анемия Волосатоклеточный лейкоз Пиогенные инфекции Роды Оперативные вмешательства Шоковые состояния Приём глюкокортикоидовЛимфоциты: Острые инфекции Милиарный туберкулёз Лимфогранулематоз Системная красная волчанка Апластическая анемия Почечная недостаточность Терминальная стадия онкологических заболеваний Иммунодефициты Рентгенотерапия

    Приём цитостатиков

    Интерпретация результатов исследований

    1. Результаты исследования должны оцениваться в комплексно, т.е. учитывать не только процентное отношение различных популяций лейкоцитов, но и их морфологические изменения, и морфологические изменения эритроцитов.2. Наиболее часто выявляемые изменения морфологии эритроцитов: Изменения размеров (микроцитоз, макроцитоз, мегалоцитоз, анизоцитоз) Изменения формы (пойкилоцитоз, микросфероцитоз, серповидные клетки, мишеневидные клетки, акантоциты, стоматоциты, эллиптоиды, дакриоциты и др.) Изменения окраски (гипохромия, гиперхромия) Включения в эритроцитах (кольца Кебота, тельца Жолли, базофильная зернистость, тельца Гейнца-Эрлиха3. Наиболее часто выявляемые изменения морфологии лейкоцитов: Токсигенная зернистость нейтрофилов Вакуолизация цитоплазмы Тельца Князькова-Деле Гиперсегментация ядер нейтрофилов Пельгеровская аномалия Псевдопельгеровская аномалия Клетки лейколиза4. Некоторые варианты изменения лейкоцитарной формулы:а). Сдвиг влево: большое количество палочкоядерных нейтрофилов, возможно появление метамиелоцитов и миелоцитов. Данные изменения возможны при: Острых инфекционных заболеваниях, сепсисе Ацидозе и коматозных состояниях Физическом перенапряженииб). Сдвиг вправо: в крови появляются гиперсегментированные нейтрофилы, возможно наличие токсигенной зернистости в их цитоплазме. Данные изменения возможны при: Мегалобластной анемии Болезни почек и печени Состояния после переливания крови.

    5. Данное исследование обычно назначается вместе с исследованиями 10.001 Общий анализ крови CBC без лейкоцитарной формулы, 10.050 Общий анализ крови CBC/Diff с лейкоцитарной формулой (5 фракций лейкоцитов), 10.200 Скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

www.likar.info

Общий анализ крови с "ручной" микроскопией мазка крови

Общий анализ крови – набор тестов, направленных на определение количества различных клеток крови, их параметров (размера, объема) и показателей, отражающих их соотношение и функционирование. Анализ используется для диагностики и контроля лечения многих заболеваний.

Общий анализ кровивключает в себя определение концентрации гемоглобина, количества эритроцитов, их специфических показателей (MCV, MCH, MCHC, RDW), лейкоцитов, тромбоцитов, величины гематокрита, лейкоцитарной формулы, также определяется скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Лейкоцитарная формула - процентное соотношение различных видов лейкоцитов (нейтрофилы, лимфоциты, эозинофилы, моноциты, базофилы). Подсчет лейкоформулы проводится на автоматическом гематологическом анализаторе методом многоуглового разделения рассеянного поляризованного света, в сочетании с лазерной проточной цитометрией. Анализатор выдаёт результаты в виде абсолютного (количество клеток в 1 л) и относительного количества (проценты). Параллельно выполняется просмотр мазка крови под микроскопом врачом клинической лабораторной диагностики с дополнительным уточнением лейкоцитарной формулы и описанием морфологии клеток. В этом случае оценивается содержание палочкоядерных нейтрофилов, и других типов клеток в процентном содержании (сегментоядерные нейтрофилы, моноциты, лимфоциты, эозинофилы, базофилы). Исследование лейкоцитарной формулы имеет большое значение в диагностике гематологических, инфекционных, воспалительных заболеваний, а также оценке тяжести состояния и эффективности проводимой терапии. В то же время, изменения лейкоцитарной формулы не являются специфичными - они могут иметь сходный характер при разных заболеваниях или, напротив, могут встречаться непохожие изменения при одной и той же патологии у разных больных. Лейкоцитарная формула имеет возрастные особенности, поэтому её сдвиги должны оцениваться с позиции возрастной нормы (это особенно важно при обследовании детей).

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)- неспецифический показатель воспаления. Определение СОЭ проводится на анализаторе TEСT 1. В основе метода лежит телеметрическое измерение способности эритроцитов к агрегации с помощью измерения оптической плотности. Оптическая плотность автоматически переводится в мм/ч. Измерение агрегации осуществляется в микрокапилляре анализатора, который моделирует кровеносный сосуд. Результаты измерений сопоставимы со значениями, полученными методом Вестергрена.

Общий анализ крови совместно с лейкоцитарной формулой широко используется как один из самых важных методов обследования при большинстве заболеваний. Изменения, происходящие в периферической крови, неспецифичны, но в то же время отражают изменения, происходящие в целом организме.

Не принимать пищу в течение 8 часов перед исследованием, можно пить чистую негазированную воду. Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение и не курить в течение 30 минут до исследования.

Материал для исследования: цельная кровь с ЭДТА.

Общий анализ крови широко используется как один из самых важных методов обследования при большинстве заболеваний. Изменения, происходящие в периферической крови, неспецифичны, но в то же время отражают изменения, происходящие в целом организме.

  • Диагностика гематологических, инфекционных, воспалительных заболеваний, оценка тяжести состояния и эффективности проводимой терапии.
  • Плановые медицинские осмотры, подготовка к оперативному вмешательству, медкомиссия при устройстве на работу.
  • Наличие жалоб на утомляемость, слабость или признаки инфекционного заболевания, воспаления.

Интерпретация результатов содержит аналитическую информацию для лечащего врача. Лабораторные данные входят в комплекс всестороннего обследования пациента, проводимого врачом и не могут быть использованы для самодиагностики и самолечения.

Общий анализ крови самый распространенный лабораторный анализ, используемый для оценки общего состояния здоровья. Множество различных патологических состояний могут приводить к изменениям количества основных клеточных популяций в крови. Общий анализ крови назначается для контроля за эффективностью лечения анемии или инфекционного заболевания, а также для оценки негативного влияния на клетки крови некоторых лекарств.Значительное повышение количества лейкоцитов обычно подтверждает воспаление.

Снижение эритроцитов и гемоглобина свидельствует об анемии и требует дополнительных обследований для уточнения ее причины.С помощью показателя MCV(средний объем эритроцитов) можно провести первичную дифференциальную диагностику анемий:

Ø MCV менее 80 fl (микроцитарная анемия). Причины: железодефицитная анемия, талассемия, анемия хронического заболевания, сидеробластическая анемия.

Поскольку самой частой причиной микроцитарной анемии является дефицит железа, то при выявлении микроцитарной анемии рекомендуется определение концентрации ферритина, трансферрина, а также железа в сыворотке крови. Рекомендуется обратить внимание на показатель RDW(индекс анизоцитоза эритроцитов) (увеличен только при железодефицитной анемии) и количество тромбоцитов (часто увеличено при железодефицитной анемии).

Ø MCV 80-100 fl (нормоцитарная анемия). Причины: кровотечение, анемия при хронической почечной недостаточности, гемолиз.

Ø MCV более 100 fl (макроцитарная анемия). Причины: злоупотребление алкоголем,

лекарственные препараты (гидроксимочевина, зидовудин), дефицит витамина B12 и фолиевой кислоты.

Повышение уровня гемоглобина:

§ эритремия.

Повышение концентрации эритроцитов:

§ обезвоживание (при выраженной диарее, рвоте, повышенном потоотделении, диабете, ожоговой болезни, перитоните);

§ физиологические эритроцитозы (у жителей высокогорья, лётчиков, спортсменов);

§ симптоматические эритроцитозы (при недостаточности дыхательной и сердечно-сосудистой системы, поликистозе почек);

§ эритремия.

Повышение гематокрита:

§ обезвоживание (при выраженной диарее, рвоте, повышенном потоотделении, диабете, ожоговой болезни, перитоните);

§ физиологические эритроцитозы (у жителей высокогорья, лётчиков, спортсменов);

§ симптоматические эритроцитозы (при недостаточности дыхательной и сердечно-сосудистой системы, поликистозе почек);

§ эритремия.

Понижение гематокрита:

§ анемии различной этиологии;

§ гипергидратация.

Повышение значений МСН:

§ апластическая анемия;

§ заболевания печени;

§ гипотиреоз;

§ аутоиммунные анемии;

§ курение и употребление алкоголя.

Понижение MCH:

§ железодефицитная анемия;

Следует учитывать, что величина MCH не является специфическим, показатель следует использовать для диагностики анемий только в комплексе с другими показателями общего анализа крови и биохимического исследования крови.

Повышение значений MCHC (средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах):

§ наследственная микросфероцитарная анемия.

Понижение значений МСНС:

§ железодефицитная анемия;

§ анемия хронических заболеваний;

§ некоторые виды гемоглобинопатий.

Следует учитывать, что величина MCHC не является специфическим, показатель следует использовать для диагностики анемий только в комплексе с другими показателями общего анализа крови и биохимического исследования крови.

Повышение концентрации тромбоцитов:

§ физическое перенапряжение;

§ воспалительные заболевания, острые и хронические;

§ гемолитические анемии;

§ анемии вследствие острой или хронической кровопотери;

§ состояния после перенесённых хирургических вмешательств;

§ состояние после спленэктомии;

§ онкологические заболевания, в том числе, и гемобластозы.

Понижение концентрации тромбоцитов:

§ беременность;

§ В12-дефицитная и фолиеводефицитная анемия;

§ апластическая анемия;

§ приём лекарственных препаратов, угнетающих продукцию тромбоцитов;

§ врождённые тромбоцитопении;

§ спленомегалия;

§ аутоиммунные заболевания;

§ состояния после перенесённых массивных гемотрансфузий.

Повышение концентрации лейкоцитов:

§ физиологический лейкоцитоз (эмоциональные и физические нагрузки, воздействие солнечного света, холода, приём пищи, беременность, менструация);

§ воспалительные процессы;

§ вирусные и бактериальные инфекции;

§ состояния после перенесённых операционных вмешательств;

§ интоксикации;

§ ожоги и травмы;

§ инфаркты внутренних органов;

§ злокачественные новообразования;

§ гемобластозы.

Понижение концентрации лейкоцитов:

§ вирусные и некоторые хронические инфекции;

§ приём лекарственных препаратов (антибиотики, цитостатики, нестероидные противовоспалительные средства, тиреостатики и др.);

§ аутоиммунные заболевания;

§ воздействие ионизирующего излучения;

§ истощение и кахексия;

§ анемии;

§ спленомегалия;

§ гемобластозы.

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ): показатель СОЭ меняется в зависимости от множества физиологических и патологических факторов. Значения СОЭ у женщин несколько выше, чем у мужчин. Изменения белкового состава крови при беременности ведут к повышению СОЭ в этот период.

Изменение СОЭ может служить косвенным признаком текущего воспалительного или иных патологических процессов, таких как злокачественные опухоли и диффузные заболевания соединительной ткани.

Основным фактором, влияющим на образование, определяющим СОЭ, является белковый состав плазмы крови. Острофазовые белки (СРБ, альфа-1-антитрипсин, гаптоглобин) адсорбируясь на поверхности эритроцитов, снижают их заряд и отталкивание друг от друга, способствуют образованию «монетных столбиков» и ускоренному оседанию эритроцитов. При острых воспалительных и инфекционных процессах изменение СОЭ отмечается через 24 часа после повышения температуры и увеличения количества лейкоцитов. При хроническом воспалении повышение СОЭ обусловлено увеличением концентрации фибриногена и иммуноглобулинов. Определение СОЭ в динамике, в комплексе с другими тестами используют при контроле эффективности лечения воспалительных и инфекционных заболеваний.

Выраженное повышение СОЭ (60-80 мм/ч) характерно для парапротеинемических гемобластозов (миеломная болезнь, болезнь Вальдстрема).

Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой и СОЭ – это скрининговый метод, с помощью которого можно заподозрить или исключить многие заболевания. Этот анализ, однако, не всегда позволяет установить причину изменений, при выявлении которых, как правило, требуются дополнительные лабораторные, в том числе патоморфологические и гистохимические исследования. Наиболее точная информация может быть получена при динамическом наблюдении изменений показателей крови.

medlabexpress.perm.ru

Кровь представляет собой жидкость сложного состава - плазму, в которой суспензированы форменные элементы: эритроциты (Red Blood Cells, RBCs - красные кровяные клетки), лейкоциты (White Blood Cells, WBCs - белые кровяные клетки) и тромбоциты (Platelets, Plt). При коагуляции крови после отделения сгустка остается жидкость, которая называется сывороткой, В периферической крови в норме содержатся зрелые клеточные элементы. Незрелые предшественники находятся в органе кроветворения - красном костном мозге.

Из методов количественного и качественного исследования форменных элементов крови наиболее распространен общеклинический анализ крови: определение концентрации гемоглобина, цветового показателя, содержания эритроцитов, лейкоцитов, лейкоцитарной формулы, описание особенностей морфологической картины клеток крови, оценка скорости оседания эритроцитов (СОЭ). При наличии изменений данных показателей дополнительно определяют количество ретикулоцитов и тромбоцитов. Эти исследования проводят всем стационарным больным. В амбулаторных условиях нередко ограничиваются недостаточно информативным определением количества гемоглобина, лейкоцитов и СОЭ (так называемой «тройки»). Клинический анализ периферической крови является одним из важнейших лабораторных тестов и иногда дает возможность сразу определить направление диагностического поиска (например, при появлении бластов в формуле крови или наличии гиперлейкоцитоза с абсолютным лимфоцитозом, тенями Гумпрехта). На основании клинического анализа крови трудно судить о гемопоэзе в целом. Более полное представление дает параллельное изучение костного мозга (цитологическое, цитохимическое и цитогенетическое).

При патологических состояниях гематологические изменения варьируют в зависимости от тяжести процесса, стадии заболевания и наличия осложнений, сопутствующей патологии, проводимой терапии. Необходимо учитывать, что изменения лабораторных показателей (например, изменение количества лейкоцитов и формулы крови) наблюдаются не только при патологических состояниях, но и при проведении некоторых диагностических процедур, изменении физиологического статуса организма (смена климата, время суток, возраст, физические нагрузки, гормональный фон).

Взятие и обработка крови

Исследование рекомендуется проводить утром натощак или через 1 ч после легкого завтрака. Исследуют, главным образом, капиллярную кровь, можно использовать венозную кровь (также взятую натощак). Не рекомендуется брать кровь после физической и умственной нагрузки, применения медикаментов, особенно при внутривенном или внутримышечном их введении, воздействия рентгеновских лучей и после физиотерапевтических процедур. В экстренных случаях этими правилами пренебрегают.

Гемоглобин (Hb)

Гемоглобин - основной дыхательный пигмент и главный компонент эритроцита, относящийся к хромопротеинам и выполняющий важную функцию переноса кислорода из легких в ткани и транспорта углекислого газа и протонов из тканей в легкие. Он также играет существенную роль в поддержании кислотно-основного равновесия крови. Буферная система, создаваемая Hb, способствует сохранению рН крови в определенных пределах.

Гемоглобины представляют собой тетрамерные белки, молекулы которых образованы различными типами полипептидных цепей. В состав молекулы входят по две цепи двух разных типов. Полипептидная цепь каждой из субъединиц гемоглобина специфическим образом уложена вокруг большого плоского железосодержащего кольца гема - соединения протопорфирина IX с железом. Гем придает гемоглобину характерную окраску.

Свойства индивидуальных гемоглобинов неразрывно связаны как с их четвертичной, так и с вторичной и третичной структурами. Наиболее распространенные гемоглобины имеют следующую тетрамерную структуру: НЬА (нормальный гемоглобин взрослого человека) a 2 b 2 ; HbF (фетальный гемоглобин) - a 2 g 2 ; HbS ((гемоглобин при серповидноклеточной анемии) - a 2 s 2 ; HbA 2 (минорный гемоглобин взрослого человека) -a 2 d 2 . Четвертичная структура способствует выполнению гемоглобином его уникальной биологической функции и обеспечивает возможность строгой регуляции его свойств.

Нормальные величины. У здоровых людей концентрация гемоглобина в крови составляет: мужчины 132-164 г/л

женщины 115-145 г/л

Дневные колебания. Значения гемоглобина минимальны утром и максимальны вечером. Значимым изменением гемоглобина считается 15 г/л или более.

Клиническое значение

Снижение содержания гемоглобина в крови ниже нормы для данного пола и возраста называют анемией. Согласно критериям ВОЗ, анемия как клинический синдром определяется при снижении концентрации гемоглобина в периферической крови ниже 110 г/л для любого возраста и пола.

Следует иметь в виду, что диагностика анемии не может проводиться лишь на основании определения концентрации гемоглобина в крови. Это исследование только устанавливает факт наличия анемии. Для уточнения ее характера необходимо определение количества эритроцитов, цветового показателя, изучение морфологии эритроцитов и др. показателей.

Эритроциты (RBC - red blood cells - красные кровяные клетки)

Эритроциты - наиболее многочисленные форменные элементы крови, основное содержание которых составляет гемоглобин. Зрелые эритроциты - безъядерные клетки, имеющие двояковогнутую дисковидную форму. Плоский диск лучше всего адаптирован к транспорту веществ как из клетки, так и внутрь ее, а также к диффузии газов к центру клетки. Площадь поверхности диска в 1,7 раза больше поверхности соответствующей по объему сферы и может умеренно изменяться без растяжения мембраны клетки. Двояковогнутая форма, эластичность, деформируемость и сохранение структуры клетки при удалении из нее гемоглобина зависят от особенностей строения эритроцита, прежде всего его цитоскелета. Цитоскелет эритроцитов отличается от цитоскелета ядерных клеток. У эритроцитов есть только поверхностный цитоскелет, который представляет собой устойчивое к действию детергентов соединение белков друг с другом и с мембраной, образующее своеобразную сеть вдоль внутренней поверхности плазматической мембраны, обращенную к цитоплазме. Этот цитоскелет называют еще скелетом мембраны, т.к. он делает ее прочнее и обеспечивает единство с липидным слоем, придает внутреннюю подвижность и гибкость.

Цитоскелет эритроцита играет важную роль в его способности к деформации. Дисковидный эритроцит может легко пройти через микропоровый фильтр 3 мкм, через стенку синуса селезенки.

В эритроцитах осуществляется множество ферментативных реакций. Они адсорбируют аминокислоты, липиды, токсины. Благодаря содержанию в них гемоглобина, участвуют в регуляции кислотно-основного равновесия. За счет того, что мембрана эритроцитов проницаема для анионов и непроницаема для катионов и гемоглобина, они участвуют в регуляции ионного состава плазмы. Кроме того, эритроциты обладают антигенными свойствами, но основная их роль - снабжение тканей кислородом и участие в транспорте углекислоты.

Клиническое значение.

Снижение количества эритроцитов (эритроцитопения) является одним из основных критериев анемического синдрома. От истинной анемии необходимо отличать гидремию, связанную с увеличением объема плазмы за счет притока тканевой жидкости (например, при схождении отеков). Причинами анемий являются кровопотери, нарушения кроветворения в костном мозге (дефицит железа, фолиевой кислоты, витамина В 12 , апластические процессы) и повышенный гемолиз. Степень эритроцитопении варьирует и в тяжелых случаях (апластическая анемия, гемолитическая анемия в период криза, В 12 -дефицитная анемия) может достигать 1х10 12 /л и менее. Кроме этого, уменьшение количества эритроцитов имеет место при лейкозах, множественной миеломе, неходжкинских лимфомах, системной красной волчанке, ревматоидном артрите, метастазах злокачественных опухолей и др. Уменьшение количества эритроцитов наблюдается также при недостаточном содержании белка в пище, голодании, вегетарианской диете.

Увеличение количества эритроцитов в единице объема крови называется полиглобулией или эритроцитозом. В физиологических условиях наблюдается у новорожденных в первые 3 дня жизни (временное сгущение крови в результате потери жидкости организмом при внезапном переходе к легочному дыханию и кожной респирации), у взрослых при усиленном потоотделении, голодании. При подъемах на большую высоту эритроцитоз обусловлен не сгущением крови, а действительным повышением продукции эритроцитов в связи с гипоксией. Эритроцитозы наблюдаются при патологических состояниях как симптомы целого ряда заболеваний (вторичные эритроцитозы). Вторичные симптоматические эритроцитозы делят на абсолютные и относительные. Причиной абсолютных полиглобулии является реактивное усиление эритропоэза с увеличением массы циркулирующих эритроцитов (при врожденных пороках сердца, хроническом обструктивном бронхите, гипернефроидном раке, гемангиобластоме мозжечка и др.). Сгущение крови без увеличения количества эритроцитов в результате уменьшения объема плазмы при длительной рвоте, диарее, ожогах лежит в основе относительных полиглобулий.

От симптоматических эритроцитозов следует отличать заболевания крови, относящиеся к гемобластозам (истинная полицитемия).

Изменения размера эритроцитов

Микроцитоз - преобладание в мазках крови эритроцитов с диаметром малой величины (5,0-6,5 мкм). Этот признак наблюдается при наследственном сфероцитозе, железодефицитной анемии, талассемии и др. Эти клетки имеют уменьшенный объем и количество гемоглобина. Основным фактором является нарушение синтеза гемоглобина, что характерно для железодефицитной анемии, а также некоторых гемоглобинопатий.

Шизоциты - мелкие фрагменты эритроцитов, либо дегенеративно измененные клетки неправильной формы диаметром 2,0- 3,0 мкм. Они встречаются в мазках крови при микроангиопатической гемолитической анемии, васкулитах, гломерулонефритах, уремии, маршевой гемоглобинурии, гемоглобинопатиях, ДВС-синдроме, миелодиспластическом синдроме и других заболеваниях.

Макроцитоз - присутствие в мазках крови эритроцитов диаметром >9,0 мкм. Этот признак выявляется у новорожденных как физиологическая особенность, а также у взрослых при макроцитарных анемиях, заболеваниях печени, дефиците витамина В 12 и фолиевой кислоты, при анемии беременных, у больных со злокачественными опухолями, при понижении функции щитовидной железы, миелопролиферативных заболеваниях.

Мегалоцитоз - появление в мазках крови эритроцитов диаметром 11,0-12,0 мкм, гиперхромных, без просветления в центре, овальной формы. Обнаруживаются при анемии, обусловленной дефицитом витамина В 12 и фолиевой кислоты, при анемии беременных, глистной инвазии, дизэритропоэзах.

Анизоцитоз - присутствие в мазках крови эритроцитов, различающихся по размеру: с преобладанием эритроцитов малого диаметра - микроанизоцитоз, с преобладанием эритроцитов большого размера - макроанизоцитоз. Анизоцитоз наблюдается при железодефицитной анемии как в начальном периоде заболевания, так и как вследствие проводимой терапии железом, в результате чего в крови появляются эритроциты, богатые гемоглобином, сформировавшиеся в период восстановления уровня железа в крови, одновременно циркулируют эритроциты малого размера, которые образовались до начала лечения. Анизоцитоз имеет место при заболеваниях, характеризующихся наличием нормального и патологически измененного пула эритроцитов. Так при гипопластической анемии, пароксизмальной ночной гемоглобинурии, миелопролиферативных заболеваниях, талассемии присутствуют как микроциты, так и нормоциты, а также макроциты. Анизоцитоз характерен для большинства анемий различного типа.

Изменения формы эритроцитов

Изменения формы эритроцитов разной степени выраженности (пойкилоцитоз) могут наблюдаться практически при любой анемии, вне зависимости от ее генеза. В норме незначительная часть клеток также может иметь форму, которая отличается от дисковидной.

Лишь немногие типы эритроцитов оказываются специфически характерными для конкретных патологий. Это наследственные заболевания: наследственный сфероцитоз - болезнь Минковского-Шоффара (микросфероциты) и серповидно-клеточная анемия (серповидные клетки) . Остальные формы могут появляться при различных патологических состояниях. Здесь важно разграничить обратимые формы (эхиноциты и стоматоциты), которые еще могут быть возвращены в нормальное состояние, и необратимо измененные формы (акантоциты, кодоциты - мишеневидные клетки, сфероциты, необратимо измененные стоматоциты).

Эхиноциты - сферические клетки, на поверхности которых достаточно регулярно располагается 30-50 спикул. При этом отношение поверхности к объему остается нормальным. Трансформация дискоцит-эхиноцит в начальной стадии обратима, причем было показано, что спикулы вновь появляются на поверхности клетки каждый раз в одном и том же месте. Близость стеклянной поверхности часто вызывает образование эхиноцитов. Полагают, что этот эффект связан с локальным защелачиванием среды рН > 9.0. Изменение рН от нейтрального до щелочного и обратно вызывает обратимый переход дискоцита в сфероцит и обратно.

При суспендировании эритроцитов в изотонической среде часто происходит образование эхиноцитов. Добавление альбумина может вернуть клетки к нормальной дискоцитной форме. Эхиноциты обнаруживаются in vivo обычно в тех случаях, когда в клетках низко содержание АТФ или нарушен жирнокислотный состав плазмы. Если клетка долго пребывает в состоянии эхиноцита, возникает процесс потери липидного компонента мембраны, и изменения формы становятся необратимыми. Эхиноциты часто появляются как артефакт, возможно появление их при уремии совместно с акантоцитами, наследственном дефиците пируваткиназы, фосфоглицераткиназы.

Стоматоциты (или гидроциты) имеют увеличенный на 20--30% объем и площадь поверхности, щелевидную форму центрального просвета (пэллора). Эти клетки образуются под действием весьма разнообразных факторов: низкого рН, не проникающих анионов, катионных детергентов, хлорпромазина, винбластина, витамина А.

Серповидные клетки - характерны для серповидно-клеточной анемии и других гемоглобинопатий, содержат гемоглобин S, способный полимеризоваться и деформировать мембрану, особенно при низком содержании кислорода в крови. На этом основана "проба жгута", когда для увеличения содержания этих клеток в препарате перед взятием крови на палец пациента накладывают жгут, чтобы вызвать местную гипоксию.

Мишеневидные клетки (кодоциты) имеют увеличенную площадь поверхности за счет избыточного содержания холестерина. Они имеют окрашенную периферию и на фоне светлой центральной части небольшой более темный сферический участок. Эти формы характерны для а- и b- талассемии, гемоглобинопатий С и S, свинцовой интоксикации и болезней печени, в частности, длительной механической желтухи. Кодоциты особенно часто встречаются при обструктивной желтухе (по Bessis до 75%).

Акантоциты (поверхность клетки имеет зубчатую форму), в отличие от эхиноцитов, не способны к возврату в нормальное состояние при помещении в свежую плазму. Подобные клетки сфероидальны (не имеют пэллора), имеют от 3 до 12 спикул с булавовидными расширениями на концах. Длина и толщина спикул сильно варьируют. Объем, площадь поверхности, содержание гемоглобина обычно нормальны. Акантоциты встречаются при тяжелых формах гемолитической анемии, болезнях печени, наследственной абеталипопротеинемии, наследственном дефиците пируваткиназы, наследственном сфероцитозе (тяжелые формы). Незначительное число акантоцитов можно наблюдать у пациентов после спленэктомии.

Слезовидные клетки (дакриоциты) в отличие от акантоцитов имеют одну большую спикулу и часто содержат включение - тельце Гейнца; обычно являются микроцитами. Эти клетки особенно часто выявляются при миелофиброзе, реже при различных формах анемии.

Стоматоциты наблюдаются при наследственном стоматоцитозе. Причиной их появления является повышенная проницаемость мембраны для натрия и калия. После того как компенсаторное увеличение ионного транспорта оказывается уже не эффективным, цитоплазма обогащается натрием, теряет калий и гидратируется. У мишеневидных клеток также увеличена концентрация натрия и снижена концентрация калия. Большой объем стоматоцита не мешает ему достаточно долго выживать при микроциркуляции. В меньшем числе (приблизительно в 3% от общей популяции клеток) стоматоциты встречаются при обструктивных болезнях печени, алкогольном циррозе, кардиоваскулярной патологии, злокачественных опухолях. Возможно выявление стоматоцитов как артефактов.

Ксероциты - уплотненные дегидратированные клетки нерегулярной формы, которые характерны для наследственной болезни - семейного ксероцитоза. В физиологическом смысле эти клетки противоположны стоматоцитам и возникают при потере катионов и, следовательно, воды. Тем не менее, ксероцит иногда по форме напоминает стоматоцит (но с уплотненной, дегидратированной цитоплазмой).

Микросфероциты - специфические клетки для наследственного микросфероцитоза. Изменение спектрина приводит к нарушениям устойчивости мембраны. Выявление их на мазках крови иногда требует большой тщательности. Характерно, что микросфероциты в мазке выглядят как однородные, без существенного пойкилоцитоза, их количество - от 1-3 до 20-30 в поле зрения (остальные клетки нормальны, всего в поле зрения 50 клеток). Если популяция микросфероцитов разнородна, то это более характерно для гемолитической анемии. Выявляемый на препаратах микросфероцитоз, который сочетается с анизоцитозом и пойкилоцитозом также может свидетельствовать о механическом повреждении эритроцитов (синдром фрагментации эритроцитов), ожоговой болезни, дефиците глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы. Сфероцитоз можно рассматривать как терминальную, предгемолитическую стадию, в которую переходят эхиноциты, акантоциты и стоматоциты при необратимом повреждении.

Эллиптоциты в норме составляют менее 1% всех клеток. При различных анемиях (талассемия, железодефицитная и особенно мегалобластная анемии) их содержание доходит до 10%. При этом популяция эллиптоцитов неоднородна по размерам. Если эллиптоциты однородны и составляют более 25%, то это более характерно для наследственного эллиптоцитоза.

Дегмациты (укушенные клетки) часто содержат тельца Гейнца и наблюдаются при гемолитической анемии, вызванной отравлением окислителями. В очень тяжелых случаях отравлений на препаратах можно наблюдать полутени эритроцитов (эксцентроциты).

Шистоциты (шлемовидные и треугольные клетки) наблюдаются при микроангиопатии, гемолитической анемии под действием физических факторов, злокачественной гипертонии, уремии, а также в случаях осложнений при протезировании сосудов и клапанов.

Индексы эритроцитов

Показатели MCV (mean corpuscular volume, средний объем эритроцита, средний корпускулярный объем), МСН (mean corpuscular hemoglobin, среднее содержание гемоглобина в эритроците), МСНС (mean corpuscular hemoglobin concentration, средняя корпускулярная концентрация гемоглобина), а также методы их вычисления были введены в 1929 г. Винтробом (Wintrobe, 1993).

Средний объемэритроцита (MCV) вычисляется путем деления гематокритной величины 1 мм 3 крови на число эритроцитов в 1 мм 3 по формуле:

MCV=ГЕМАТОКРИТ 1 мм 3 /ЧИСЛО ЭРИТРОЦИТОВ В 1 мм 3

Результат выражают в кубических микронах (мкм 3), или в фентолитрах (фл). На практике средний объем эритроцита вычисляют путем умножения гематокрита (%) на 10 и деления полученного произведения на число эритроцитов в миллионах в кубическом миллиметре крови:

MCV=ГЕМАТОКРИТ(%)х10/ЧИСЛО ЭРИТРОЦИТОВ(млн. кл./мм 3)

Среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН) устанавливается по формуле:

MCH=ГЕМОГЛОБИН(г/100мл)х10/ЧИСЛО ЭРИТРОЦИТОВ (млн/мкл.)

Результат выражают в пикограммах (пг), норма составляет 27-31 пг. Этот показатель характеризует среднее содержание гемоглобина в отдельном эритроците. Он аналогичен цветовому показателю, который входит в общий анализ крови и широко используется в клинике. На основе этих индексов анемии разделяют на нормо-, гипо- и гиперхромные.

Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (МСНС) вычисляется путем деления концентрации гемоглобина в г/100 мл на гематокрит и умножения на 100:

MCHC = ГЕМОГЛОБИН(г/дл)/ГЕМАТОКРИТ(%)х100

Выражается этот индекс в г/дл. Различия между двумя последними индексами должны быть понятны. Первый показатель указывает на массу гемоглобина в среднем эритроците и выражается в долях грамма (пикограммах). Второй индекс показывает концентрацию гемоглобина в среднем эритроците, т.е. соотношение содержания гемоглобина к объему клетки. Он отражает насыщение эритроцита гемоглобином и в норме составляет 30-37 г/дл. В отличие от среднего содержания гемоглобина в эритроците (МСН) МСНС не зависит от среднего клеточного объема и является чувствительным тестом при нарушениях процессов гемоглобинообразования. Информативность МСНС при железодефицитных анемиях составляет 85% (Золотницкая Р.П., 1982).

При нормохромных анемиях повышение или понижение среднего размера эритроцитов связано с соответствующим повышением или снижением массы гемоглобина, содержащегося в клетке, средняя концентрация гемоглобина (МСНС) остается нормальной. При гипохромных анемиях снижение среднего содержания гемоглобина в эритроците более значительно, чем уменьшение среднего объема клеток. Поэтому МСНС субнормальна.

За исключением наследственного микросфероцитоза, в некоторых случаях серповидноклеточной анемии и гемоглобиноза С, МСНС не превышает 37 %. Следовательно, предельная гиперхромия встречается очень редко. Величина 37% - практически верхний предел, насыщения эритроцита гемоглобином, и дальнейшее увеличение концентрации может закончиться кристаллизацией.

Показатель MCV является наиболее информативным для исследования и диагностики анемий. МСН и МСНС несут меньшую клиническую информацию. Взаимосвязь эритроцитарных индексов выражается формулой:

МСН (пг)=МСНС(г/л)хМСV(фл)/1000

Современные гематологические автоматы получают величины МСН и МСНС расчетным путем по программе, заложенной в процессор. При отсутствии автоматов эритроцитарные индексы удобно вычислять по номограмме Мазона.

Цветной показатель

(ЦП) - относительная величина, характеризующая среднее содержание гемоглобина в эритроците. Формула для вычисления цветового показателя имеет вид:

ЦП=ГЕМОГЛОБИН (г/л)х3 / первые 3 цифры содержания эритроцитов

В норме ЦП составляет 0,86-1,05. Этот показатель имеет такую же клиническую интерпретацию, как среднее содержание гемоглобина в эритроците. Однако цветовой показатель определяется в условных единицах, поэтому имеет отвлеченное значение.

Показатель анизоцитоза (RDW) характеризует неоднородность размеров эритроцитов значительно точнее, чем это можно получить при визуальной оценке мазка крови, измерении среднего диаметра эритроцитов и построении кривой Прайс-Джонса. Оценка степени анизоцитоза под микроскопом сопровождается целым рядом ошибок. При высыхании эритроцитов их диаметр уменьшается на 10-20%, в толстых мазках он меньше, чем в тонких. В отличие от морфологических методов оценки анизоцитоза автоматизированный кондуктометрический подсчет обладает более высокой точностью и воспроизводимостью результатов.

Таблица 1


Похожая информация.


Содержание гемоглобина, скорость оседания эритроцитов (СОЭ) число эритроцитов и лейкоцитов в 1 мкл крови, лейкоцитарная формула (процентное содержание различных групп лейкоцитов), а также цветной показатель (коэффициент, свидетельствующий о степени насыщения гемоглобином эритроцитов) составляют данные общего клинического анализа крови.
Кровь для анализа берется в утренние часы (необязательно до завтрака), в поликлинических же условиях кровь следует брать после 10- 15-минутного отдыха.
Для исследования кровь берут из безымянного пальца левой руки после тщательной обработки его спиртом. Прокол делают на боковой поверхности мякотной части первого фаланга стерильной иглой-скарификатором, причем плоскость иглы следует располагать перпендикулярно рисунку кожи пальца - в этом случае ранка зияет и кровь выделяется длительно.

Определение концентрации гемоглобина

Среди методов определения гемоглобина наиболее широкое распространение получили методы, основанные на колориметрии, т. е. определении интенсивности окраски.
Наиболее простым из них является определение гемоглобина при помощи визуальной колориметрии в гемометре Сали, который представляет собой деревянный штатив с центральной градуированной пробиркой, по бокам которой расположены запаянные стеклянные трубочки с цветным стандартом (солянокислый гематин в глицерине).
В центральную пробирку предварительно наливают 0,1% раствор соляной кислоты до метки, соответствующей 2 или 3 г%, затем осторожно вносят (точно!) 0,02 мл крови, взятой из пальца специальной пипеткой, приложенной к гемометру. Поверхностным слоем кислоты промывают пипетку и, перемешав стеклянной палочкой кровь и кислоту, оставляют на 5 мин для образования солянокислого гематина. Затем добавляя дистиллированную воду и постоянно перемешивая палочкой, добиваются полного совпадения цвета жидкости в центральной пробирке со стандартами. Концентрация гемоглобина соответствует отметке уровня раствора по нижнему мениску. Концентрацию гемоглобина можно выражать или в г% гемоглобина или в условных единицах. 16,67 г гемоглобина принято за 100 единиц.
Концентрация гемоглобина в крови у женщин бывает от 11,7 до 15,8 г°/о или от 117 до 158 г/л,-у мужчин - от 13,3 до 18 г% или от 133 до 180 г/л.

Взятие крови для подсчета форменных элементов

Для подсчета форменных элементов кровь разводят в смесителях (меланжерах) или пробирках, что последнее время получило более широкое применение.
Для подсчета эритроцитов кровь разводят в 200 раз 3% раствором хлорида натрия; если для взятия крови мы пользуемся пипеткой от гемометра, объем которой 0,02 мл, то мы должны брать 4 мл раствора хлорида натрия.
Для подсчета лейкоцитов кровь разводят в 20 раз, следовательно берут 0,02 мл крови и 0,38 мл 3% подкрашенного раствора метиленовой синькой уксусной кислоты, которая необходима, чтобы вызвать разрушение эритроцитов.
Взятие крови должно производиться с большой точностью, так как при таких небольших объемах попадание пузырька воздуха или остатка крови на внешней стороне пипетки ведет к увеличению ошибки определения.
Перед заполнением камеры необходимо протереть в камере шлифованное стекло так, чтобы появились радужные кольца.
Перед заполнением камеры разведенную кровь тщательно перемешивают, так как клетки оседают на стенки пробирки или ампулы смесителя, после этого каплю крови вносят под притертое шлифованное стекло камеры и оставляют на 1 мин в покое для оседания клеток.
Подсчет форменных элементов производят при малом увеличении микроскопа (объектив 8Х, окуляр 15Х или 10Х) в затемненном поле зрения.

Эритроциты считают в 5 больших квадратах (16x5 = 80 малых квадратов), расположенных в разных участках камеры, можно брать квадраты, расположенные по диагонали.
Счету подлежат эритроциты, лежащие внутри квадрата, и те, которые находятся на верхней и левой его сторонах; эритроциты, лежащие на нижней и правой сторонах, не считают, так как они относятся уже к другим квадратам.
Подсчитав число эритроцитов (А) в 5 больших квадратах, находят среднее арифметическое число эритроцитов в одном малом квадрате A/80, т. е. в 1/4000 мкл. Поэтому, чтобы найти число эритроцитов в 1 мкл, мы должны умножить полученное от деления число на 4000 и на 200 (разведение) .

Таким образом, мы получаем следующую формулу:

X=A*4000*200/80,

где X - число эритроцитов в 1 мкл, а А - число эритроцитов в 5 больших квадратах.
Если мы считали эритроциты в 5 больших квадратах и разводили кровь в 200 раз, то общий множитель для числа А будет 10 000.
Нормальное содержание эритроцитов в крови женщин 4-5*10 6 , мужчин - 4,5-5,5*10 6 .
Лейкоциты считают в 100 больших квадратах, не разделенных на малые, что соответствует 1600 малым. Таким образом, число лейкоцитов, найденное в 100 квадратах, делят на 1600, умножают на 4000 и на 20 (разведение). В данном случае для получения результата достаточно число сосчитанных лейкоцитов умножить на 50. Нормальное содержание лейкоцитов в крови 5*10 3 - 8*10 3 в 1 мкл.

Цветовой показатель крови. Цветовым показателем крови называют число, которое показывает, каково в среднем насыщение гемоглобином отдельного эритроцита данной крови по сравнению с насыщением отдельного эритроцита нормальной крови.
За нормальное содержание гемоглобина принимают 100 единиц, а нормальное количество эритроцитов равно 5 000 000.
Величина цветового показателя здоровых людей колеблется от 0,9 до 1,1.
Изучение мазка периферической крови. В мазках крови изучают морфологию эритроцитов и считают лейкоцитарную формулу, т. е. процентное соотношение между различными видами лейкоцитов.
Для того чтобы исследование было успешным, приготовление, фиксация и окраска мазков крови должны проводиться с большой тщательностью.
Для приготовления мазка поверхностью чистого, обезжиренного стекла на расстоянии 0,5 см от края предметного стекла прикасаются к капле крови у места прокола на пальце, а затем шлифованное покровное стекло помещают под углом 45° к предметному и подводят первое к капле крови так, чтобы она растекалась по заднему краю покровного стекла и легким движением, без резкого нажима делают мазок. Мазок должен кончаться на предметном стекле «метелочкой». Мазок высушивают на воздухе, при высыхании хороший, тонкий мазок имеет желтую окраску.
Простым, остро отточенным карандашом по середине мазка надписывают фамилию больного и дату исследования, после этого мазки фиксируют в метиловом спирте не менее 5 мин и красят по методу Романовского-Гимзы.

Краска состоит из смеси кислого (эозина) и основного (Азур II) красителей. Такой метод окраски дает возможность дифференцировать клетки. Первым этапом работы с мазком является оценка морфологии эритроцитов. Для этого выбирают тонкое место, где клетки лежат отдельно, а не в виде монетных столбиков. Нормальные эритроциты - безъядерные, окрашенные в розовый цвет клетки, округлые, приблизительно одинакового диаметра - 7,5 мкм, эритроциты имеют форму двояковогнутого диска, поэтому в мазке имеют просветление в центре и более интенсивно окрашенную периферию.

{module директ4}

Приготовление толстой капли

Для исследования крови на плазмодии малярии делают толстую каплю. Кровь берут обычным способом из мякоти пальца. К капле крови, выступившей из места укола, прикасаются поверхностью предметного стекла. Нанесенные отдельно 2-3 капли размазывают углом другого стекла. Сухой мазок заливают (без фиксирования) краской Романовского на 30-40 мин, потом окрашенную каплю осторожно ополаскивают водой и просушивают препарат в вертикальном положении.

Примерные данные анализа

Повышенное количество эритроцитов и гемоглобина в крови может быть при заболевании красных элементов крови - эритремии, тогда число эритроцитов достигает до 9-106 и больше.
Увеличенное содержание эритроцитов в крови может возникнуть вторично, т. е. тогда, когда нет заболевания красного листка кроветворения, а количество эритроцитов повышается в результате болезни других органов и систем (при декомпенсированном диффузном пневмосклерозе, эмфиземе легких, некоторых видах врожденных пороков сердца, склерозе сосудов системы легочной артерии, пороках правого сердца, недостаточности кровообращения III степени и др.). Этот симптом называется эритроцитозом.
Морфологически измененные эритроциты появляются при гиперхромной (мегалобластической) анемии. При этом в крови находят крупные эритроциты с большим содержанием гемоглобина (макроциты), эмбриональные эритроциты (мегалобласты), которые обычно в периферической крови не встречаются. Морфология эритроцитов изменяется также и при гипохромной анемии: появляются малые эритроциты (микроциты), измененные по своей форме (пойкилоциты) и эритроциты с малым содержанием гемоглобина (гипохромные эритроциты).

Подсчет лейкоцитарной формулы

При подсчете лейкоцитарной формулы необходимо определение структурных особенностей цитоплазмы и ядер клеток. Принадлежность клетки к той или иной группе определяется на основании совокупности всех признаков цитоплазмы и ядра.
При подсчете формулы надо придерживаться одного и того же способа передвижения стекла под микроскопом. Чаще всего применяется способ микроскопирования в 4 местах мазка. Известно, что лейкоциты распределяются в мазке неравномерно: лимфоцитов по краям меньше, чем в середине, а моноцитов в конце мазка больше, чем в начале. Поэтому при подсчете лейкоцитарной формулы лучше всего передвигаться по ломаной линии, просчитывая все встречающиеся клетки.
Подсчет 200 клеток - практический минимум для обычных клинических исследований.
Лейкоциты периферической крови в зависимости от наличия или отсутствия зернистости в цитоплазме делятся на гранулоциты (нейтрофильные, эозинофильные, базофильные) и агранулоциты (моноциты и лимфоциты).
Нейтрофилы . Размер клеток 10-12 мкм. Цитоплазма клеток бледно-розового цвета с мелкой, обильной, фиолетового цвета зернистостью. В норме в крови встречаются палочкоядерные (2-4%) и сегментоядерные (60-65%) нейтрофилы.
Эозинофилы . По величине клетки такие же, как нейтрофилы, иногда немного крупнее, цитоплазма заполнена крупными гранулами желтовато-красного цвета, ядро обычно имеет два сегмента одинаковой величины. Эозинофилов в норме 2-4%.
Базофилы . По размеру это самый маленький гранулоцит. Ядро неправильной, многолопастной формы, занимает почти всю клетку, бледно-розовая цитоплазма содержит крупные темно-фиолетовые гранулы. Гранулы базофилов растворяются в воде, и иногда в результате смывания при окраске препарата на месте гранул остаются не смытые бесцветные ячейки. В норме базофилов 0,1%.
Лимфоциты . Размер клеток колеблется от 7 до 10 мкм. Ядро компактной структуры, округлое или бобовидное. Цитоплазма клеток нежно-голубая с зоной просветления вокруг ядра (перинуклеарной), иногда в цитоплазме встречаются отдельные азурофильные зерна красно-фиолетового цвета. В периферической крови в норме 20-35% лимфоцитов.
Моноциты. Размер клеток колеблется от 12 до 20 мкм. Ядро чаще подковообразной, иногда неправильной формы. Цитоплазма более обширна чем у лимфоцитов, пепельно-голубого цвета с мелкой, нежной, красноватой зернистостью.
Моноцитов в норме 6-8%.
Повышенное содержание в крови лейкоцитов называется - лейкоцитозом, а пониженное - лейкопенией.

Окраска и подсчет ретикулоцитов

Ретикулоциты представляют собой молодые эритроциты с тонкой синей сетчаткой или зернистостью в цитоплазме. Эти клетки характеризуют активность красного кроветворения.
Для выявления подсчета ретикулоцитов пользуются методом суправитальной (прижизненной) окраски. На предметных стеклах делаются мазки краски бриллианткрезилблау в абсолютном спирте, а затем на покрытом краской стекле делают обычным образом мазок крови и помещают его на 3-5 минут во влажную камеру, после чего сушат и микроскопируют с иммерсионным объективом. В норме на 1000 эритроцитов встречается 8-10 ретикулоцитов, число их принято выражать в процентах (0,8-1%) или в промиллях (8-10%о) по отношению к эритроцитам.
Ретикулоциты - клетки, которые характеризуют повышенную выработку эритроцитов в костном мозге.
Они в большом проценте появляются в периферической крови при гипохромной анемии («злокачественной анемии»), при гемолитической анемии и др. заболеваниях. Пониженное содержание ретикулоцитов и полное их исчезновение в периферической крови наблюдаются при обострении гиперхромной анемии.

Для предупреждения агрегации (склеивания) кровяных пластинок прокол кожи делают через каплю 14% раствора сернокислой магнезии, нанесенной на палец. Кровь смешивают с магнезией и готовят тонкие мазки на предметных стеклах, которые затем фиксируют и окрашивают по Романовскому в течение 2-х часов.
Определяют количество кровяных пластинок на 1000 эритроцитов, а зная число эритроцитов в 1 мкл, подсчитывают число тромбоцитов в 1 мкл крови. В норме тромбоцитов содержится от 250 000 до 400 000.
Повышение содержания в крови тромбоцитов обнаруживается при эритремии, при заболеваниях селезенки, при некоторых формах злокачественных заболеваний (например, поджелудочной железы). Пониженное количество тромбоцитов возникает при анемиях.

Определение СОЭ

Скорость оседания эритроцитов определяется в крови, смешанной в соотношении 4:1с лимоннокислым натрием.
Реакция ставится в аппарате Панченкова. Капилляр Панченкова промывают цитратом натрия, затем набирают цитрат до метки 50, где стоит буква Р (реактив) и выдувают его в видалевскую пробирку. Этим же капилляром берут кровь дважды до метки К (кровь) и смешивают ее с цитратом. Смешанной с цитратом кровью заполняют этот же капилляр до деления 0 и ставят вертикально в штатив на час. Через час отмечают в миллиметрах величину столбика плазмы, образовавшегося над осевшими эритроцитами, что и является мерой скорости оседания эритроцитов.
В норме СОЭ у мужчин равна 10 мм/ч, у женщин-14 мм/ч.
Скорость оседания эритроцитов повышается при воспалительных, острых и хронических заболеваниях, при злокачественных опухолях и других заболеваниях.

Проба на совместимость резус-фактора

В пробирку без цитрата берут 2-3 мл крови реципиента, после свертывания крови сгусток обводят стеклянной палочкой и кровь центрифугируют. Две капли сыворотки из этой пробирки наносят на чашку Петри, добавляют к ней полкапли крови донора, перемешивают и чашку помещают в водяную баню (42-45°). Через 10 мин чашку вынимают и просматривают на свету при легком покачивании. Появление агглютинации укажет на недопустимость переливания данной крови.