К вопросу вакцинации коров следует подходить очень серьёзно, поскольку животные сельскохозяйственного назначения являются одними из главных производителей продуктов, которые мы употребляем в пищу. Главным аспектом в этой области является не защита состояния здоровья животных, а защита и забота о здоровье людей, которые употребляют в пищу продукты животноводства. Предотвратить попадание мяса и молока от больных животных в торговую сеть и профилактировать опасные для здоровья заболевания можно своевременной вакцинацией и исследованиями животных.
Исследования проводятся на такие болезни, как лейкоз, бруцеллёз. Обязательны вакцинации против бешенства, сибирской язвы, ящура, а так же .
Бытует мнение, что лучше приобретать мясо у частников, которые не делают вакцинацию, поэтому такое мясо — экологически чистое. Однако это не так. Такое мясо, бывает даже очень опасным. Частные фермеры, так же как и владельцы животноводческих комплексов обязаны проводить профилактические мероприятия — вакцинации и исследования.
Виды и назначения вакцин и дозы
Комплексные моновалентные вакцины:
- Вакцина ТАУРУС имеет достаточно большую линейку от различных заболеваний инфекционного характера, таких как — ринотрахеит (ИРТ), вирусной диареи (ВД), парагрипп-3 (ПГ-3) и лептоспироз.
- КОМБОВАК, Бовилис BVD — это вакцины от инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, респираторно-инцитиальной, рота- и коронавирусных инфекций.
- Ассоциированная вакцина — поливалентная вакцина,в состав входят штаммы сибирской язвы и ящура.
- Трихостав – поливалентная вакцина при профилактике трихофитии и грибковых заболеваний покрова кожи.
- Нобивак–поливалентная вакцина против бешенства.
- Так же существуют поливалентные вакцины и сыворотки на отдельный вид болезни.
В каком возрасте проводить исследования на инфекционные заболевания
- 2 месяца – проводят исследования на туберкулёз (туберкулизация);
- 4 месяца – исследуют бруцелёз;
- 6 месяцев – лейкоз.
После того, как корова начала лактацию необходимо проводить исследования два раза в год на бруцеллёз и туберкулёз.
В каком возрасте проводят плановую вакцинацию
- Вакцинацию начинают проводить у телят с раннего возраста, поскольку (это имунитет матери), который передаётся с молоком работает достаточно непродолжительный период.
- Комплексные моновалентные вакцины — телят следует вакцинировать с 1,5 месячного возраста с интервалом ревакцинации 3 недели.
- 6 месяцев – однократная вакцинация, в этом возрасте ревакцинация не требуется.
Ежегодная вакцинация обязательна, причём эти мероприятия делают за 2 недели до осеменения.
Поливалентные вакцины
- От 1,5 до 6 месяцев – вакцинация против бешенства, ящура сибирской язвы, сальмоналёза (с интервалом ревакцинации 8-12 дней), колибактериоза (ревакцинация через 2 недели), трихофитии.
- Животные старше 12 месяцев — эмфизематозный карбункул, ящур, бешенство, сибирская язва, тейлериоз, пастереллез, бруцеллез.
- Ежегодная вакцинация взрослых тёлок проводиться за 2-3 недели до осеменения.
Использовать продукты животноводства после вакцинации можно не сразу, на некоторые виды вакцин установлены свои сроки (утверждены Россельхознадзороми, ветсанэкспертизой), но если приводить примерное время, когда уже можно употреблять в пищу молоко и производить забой скота – это примерно 21-28 дней.
Существует множество заболеваний, которыми болеют животные. Одна из них - это ящур КРС. Эта болезнь поражает множество органов и несет за собой смерть скота.
Что собой представляет ящур?
Ящур - одно из опаснейших вирусных заболеваний рогатого скота. Животное лихорадит, обильно течет слюна, происходит поражение слизистых оболочек, болезнь конечностей и молочных желез и многое другое. Заболевание поражает только что родившихся животных. Кроме того, ящуром может заразиться и человек. Возбудителем инфекции является фильтрующий вирус. Болезнь очень распространена практически во всех континентах. Ее последствия губительны для фермерства и скотоводства.
Ящур крупного рогатого скота – это РНК, которая окружена специфической капсидой. Попадая в организм, он поражает лимфу и слизистые оболочки. Поле этого начинает активно развиваться и размножаться. Различают два вида образования:
- доброкачественное. Животное охотно поддается лечению, летальный исход не так распространен;
- злокачественное. Выражается появлением одышки, слабостью. При таком образовании поражаются большинство органов. Летальный исход распространен.
Вирус устойчив, победить его сложно. Воздействие температурой более 40ᵒ губительно для него, но на поверхности кожи или в корме он живет продолжительное время.
Причины появления
Чтобы избежать заболевания, необходимо знать причины его появления. Помимо того, что болезнь возникает при неправильном кормлении и условиях обитания, существуют и другие факторы, которые также могут послужить возбудителями, например:
- взаимодействие с уже заболевшими или недавно переболевшими животными. Всем понятно, что контакт с больным может послужить поводом для заражения. Но и недавно перенесшее заболевание животное может передать инфекцию, поэтому его следует отделить от общего стада до полного истребления вируса;
- плохой корм. К выбору корма нужно отнестись с полной ответственностью;
- кормление молодых особей молоком больного животного. Любой контакт с зараженным может стать причиной болезни;
- пренебрежение очисткой помещения. Необходимо постоянно проводить дезинфекцию. Кроме того, следует тщательно подбирать пастбище для скота;
- человек. Да, человек тоже может переносить вирус. Именно поэтому скот может заразиться и от людей;
- транспорт;
- другие животные, которые обитают вне стада;
- насекомые.
Список просто огромен и уследить сразу за всем очень сложно. Для того, чтобы избежать заражения скота, нужно соблюдать правила профилактики.
Признаки
Симптомы позволяют узнать о болезни до того, как лечение станет невозможным, поэтому следует отнестись к этому со всей ответственностью. Признаки распространения вируса в организме:
- животное лихорадит;
- воспаление слизистых оболочек носовой, ротовой полостей. Появление пены у рта, обильное слюноотделение;
- заболевание конечностей, животному сложно ходить;
- уменьшение молочной продуктивности, это возникает из-за того, что вирус поражает молочные железы;
- снижение веса. При нормальной кормежке уменьшение массы – один из главных признаков болезни;
Не стоит забывать, что существует два вида образования заболевания. От видов зависят и симптомы. Но в большинстве случаев они схожи. Если вовремя не обратить должного внимания на скот, то летальный исход гарантирован.
Лечение
Если животное заболело, то необходимо уделить ему максимально много внимания. При халатном отношении хозяина, скотина может погибнуть от ящура. Заболевшего необходимо отделить от общего скота. Подготовить ему специальное место для проживания. Обеспечить необходимым количеством воды и еды. Слизистые оболочки нужно обработать раствором уксусной кислоты или марганцовки.
Если животному совсем плохо, то стоит дать ему обезболивающее. Копыта желательно постоянно мыть и смазывать дегтем.
К сожалению, нет единого препарата, который сможет вылечить ящур, поэтому используются лекарства, которые уничтожают симптомы болезни. Иногда фермеры делают укол глюкозы скоту.
Профилактика
Прививки тщетны, если животное живет в полной антисанитарии. Какие бы вы средства по лечению не использовали, они не смогут помочь, если условия противоречат здоровью. Давайте разберемся в необходимых мерах по пресечению развития инфекции:
- вакцинация. Существует специальная прививка, которая предотвращает заболевание ящуром;
- тщательный выбор корма и добавок. Прежде чем дать корм животному нужно проверить его на наличие вредоносных веществ;
- постоянно следите за состоянием ваших животных: аппетит, активность. Все это очень важно;
- проводите регулярную дезинфекцию помещения. Сарай необходимо регулярно чистить и обеззараживать специальными средствами;
- изолируйте больных животных, чтобы избежать распространения вируса;
- используйте специальные дезинфицирующие средства при общении со скотом.
Важно! Профилактика является главным этапом противодействия заболеванию. Если отнестись с должной ответственностью, то ваши животные будут расти и радовать вас каждый день.
Заключение
Ящур КРС – это очень опасное заболевание, которое поражает рогатый скот и даже человека. Проявляется в поражении практически всех органов, в частности слизистых оболочек. Образования вируса могут быть доброкачественными и злокачественными. На заражение влияют не только условия окружающей среды, но и сам человек. Он также является переносчиком болезни. К счастью, болезнь поддается лечению. Если серьезно отнестись к этой проблеме, то ваше животное сможет выздороветь. И самое главное, конечно, это профилактика заболевания. Если после лечения, уделить огромное внимание профилактическим мерам, то все будет в порядке в вашем хозяйстве.
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и касается вакцины против ящура типа А. Вакцина содержит авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма вируса Aphtae epizooticae, сем. Picornaviridae, рода Aphtovirus, серотипа A, депонированного в коллекции ФГУ «ВГНКИ» под регистрационным номером № 2045/Киргизия/2007-ДЕПА № 2045/Киргизия/2007-ДЕП, полученный в перевиваемой культуре клеток ВНК-21, представляющий собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура, адъюванты гидроокись алюминия с сапонином и поддерживающую среду в эффективных соотношениях. Вакцина обладает высокой иммуногенностью и способна обеспечить эффективную защиту от возбудителя инфекции ящура, циркулирующего в странах Закавказья, Центральной Азии, Ближнего и Дальнего Востока. 11 з.п. ф-лы, 14 табл., 1 ил, 4 пр.
Рисунки к патенту РФ 2526570
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и может быть использовано при разработке и изготовлении вакцины против ящура типа А инактивированной сорбированной.
Ящур - это острое контагиозное вирусное заболевание парнокопытных животных. Для него характерна тенденция к широкому распространению и эпизоотическому течению. Болезнь сопровождается большими потерями молока, мяса и других видов животноводческой продукции, затрудняет коммерческие операции и хозяйственную деятельность. Для обеспечения устойчивого благополучия страны по ящуру в Российской Федерации реализуется система мероприятий, приоритетными в которой являются предупреждение заноса вируса ящура на территорию, а в районах высокой степени риска - вакцинопрофилактика. В настоящее время в Российской Федерации и странах СНГ для иммунизации крупного и мелкого рогатого скота против ящура применяют, как правило, инактивированные сорбированные, а для иммунизации свиней - инактивированные эмульсионные вакцины .
Технология изготовления противоящурной вакцины из инактивированного вируса начинается с подбора производственных штаммов на основе эпизоотологического анализа динамики ящура в стране и сопредельных государствах. При создании препаратов для специфической профилактики используют соответствующие типы вируса ящура и подбирают штаммы с широким антигенным спектром внутри типа с выраженной перекрестной иммуногенностью. Штамм с широким спектром иммуногенности и удовлетворяющий требованиям региона выбирают с помощью его испытания в реакции перекрестной защиты или чаще в реакции перекрестной нейтрализации. Как правило, в качестве производственного штамма используется популяция вируса, которая в совокупности с системой и условиями промышленного культивирования обеспечивает гарантированное и высокое накопление 146S и 75S компонентов вируса и получение иммуногенной вакцины.
Кроме того, к производственному штамму предъявляются требования стабильности вируса в процессе очистки от тканевых компонентов и концентрирования, а также сохранения вируса при инактивации и длительном его хранении .
Возбудитель ящура обладает значительной антигенной вариабельностью штаммов в пределах одного серотипа, которая выявляется в различные временные промежутки и на разных территориях и зависит от видового состава восприимчивого поголовья, его иммунного статуса и множества других различных факторов. Антигенная изменчивость вируса ящура обусловлена заменами аминокислот в полипептидных фрагментах (антигенных эпитопах), экспонированных на поверхности капсидных белков . Сдвиги антигенного спектра, соответствующие обновлению структуры нового полевого штамма, могут варьировать от незначительных, улавливаемых моноклональными антителами, до существенных, регистрируемых с помощью традиционных поликлональных иммуноглобулинов. Существенные изменения антигенных характеристик природного штамма с большой вероятностью вызывают ослабление специфического иммунитета, индуцированного негомологичным антигеном. Они вызывают также затруднения штаммоспецифической диагностики.
В результате возникает необходимость создания новых средств диагностики и специфической иммунопрофилактики.
Известны штаммы вируса ящура типа А, использовавшиеся в качестве производственных на территории СССР и РФ в течение последних 50 лет.
К ним относятся следующие штаммы: А 7 № 103, выделенный в 1962 году в Куйбышевской области; А 7 № 2, выделенный в 1965 году в Таджикской ССР; А № 717/73, выделенный в 1973 году в Ставропольском крае.
Указанные штаммы использовались для получения диагностикумов и противоящурных вакцин, применявшихся в различных регионах страны.
Однако после ликвидации ящура, вызываемого близкими им в антигенном отношении штаммами вируса, они были сняты с производства и в настоящее время поддерживаются лишь в коллекции штаммов микроорганизмов ФГБУ «ВНИИЗЖ» .
Известна вакцина инактивированная сорбированная против ящура типа А, содержащая активное вещество в виде авирулентного и очищенного антигенного материала из гомологичного возбудителю инфекции штамма A 22 № 550, полученного в чувствительной биологической системе, и целевые добавки в виде адъюванта и поддерживающей среды в эффективном соотношении .
Штамм А 22 № 550 вируса ящура выделен в 1964 году в Азербайджане и используется в Российской Федерации в качестве производственного при изготовлении средств специфической профилактики и диагностики, применяемых на всей территории России и в странах постсоветского пространства .
Известна инактивированная сорбированная вакцина из штамма A (Грузия) 1999/ № 1721 вируса ящура Aphtae epizooticae типа A, выделенного в 1999 году в Республике Грузия .
Известна инактивированная сорбированная вакцина из штамма № 1707 «Армения-98» вируса ящура Aphtae epizooticae типа А .
Вакцина против вируса ящура типа A из производственного штамма A № 1707 «Армения-98», применявшегося в буферной зоне Закавказья.
Недостатки вакцин, изготовленных из данных штаммов, состоят в недостаточной антигенной и иммуногенной активности относительно эпизоотических изолятов вируса ящура типа A, циркулирующих в настоящее время в странах Закавказья, Центральной Азии и Ближнего Востока (Турция, Иран и т.д.) ввиду имеющихся существенных антигенных отличий.
Наиболее близкой предлагаемому изобретению по совокупности существенных признаков является вакцина инактивированная сорбированная против ящура типа A, содержащая активное вещество в виде авирулентного и очищенного антигенного материала из штамма A (Грузия) 1999/ № 1721, полученного в чувствительной биологической системе, и целевые добавки в виде адъювантов ГОА с сапонином и поддерживающую среду в соотношении, мкг:
Штамм A (Грузия) 1999/ № 1721-ДЕП выделен в 1999 году в Республике Грузия и используется в Российской Федерации в качестве производственного при изготовлении средств специфической профилактики и диагностики, применяемых на всей территории России и в странах СНГ .
В качестве чувствительной биологической системы используют суспензионную культуру клеток ВНК-21, а в качестве поддерживающей среды - раствор Эрла без сыворотки с добавлением ФГМС, ГБКС и антибиотиков при pH 7,4÷7,6.
Для очистки вируссодержащей суспензии от балластных примесей используют полигексаметиленгуанидин (ПГМГ), а для инактивации вируса - аминоэтилэтиленимин (АЭЭИ). Для нейтрализации АЭЭИ в суспензию добавляют тиосульфат натрия.
Авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A (Грузия) 1999/ № 1721 представляет собой суспензию преимущественно из 146S и 75S иммуногенных компонентов вируса ящура. В качестве адъювантов используют ГОА с сапонином.
Основной недостаток известных вакцин, в том числе и вакцины-прототипа, состоит в антигенных отличиях от изолятов вируса ящура типа A, выделенных в различные временные промежутки, и приготовленные на их основе вакцины обеспечивают эффективную защиту животных только против заражения гомологичным вирусом.
В 2003 году на территории Ирана был выделен новый изолят вируса ящура типа A, значительно отличающийся от ранее изученных штаммов этого типа. В течение 2005÷2006 гг. ящур типа A получил широкое распространение в странах Западной Азии - Иране, Турции, Саудовской Аравии и Пакистане. В феврале 2006 года ящур типа A линии Иран/05 попал во Фракию - европейскую часть Турции, которая граничит с Болгарией и Грецией. Проведение 100% вакцинации всех жвачных с применением штамма A 22 во Фракии в феврале-марте 2006 г. предотвратило распространение ящура в соседние Грецию и Болгарию, однако через 3÷4 месяца появились свежие случаи заболевания .
В связи с этим возникла необходимость получить новую вакцину против вируса ящура серотипа A из штамма А № 2045/Киргизия/2007 для обеспечения безопасности территории России и сопредельных государств от этого возбудителя.
В задачу создания настоящего изобретения входила разработка вакцины противоящурной инактивированной сорбированной, создающей эффективную защиту восприимчивых животных против эпизоотического вируса ящура типа A, циркулирующего в странах Закавказья, Центральной Азии, Ближнего и Дальнего Востока.
Технический результат от использования предлагаемого изобретения заключается в расширении арсенала инактивированных сорбированных вакцин против ящура типа A.
Указанный технический результат достигнут созданием вакцины против ящура типа A инактивированной сорбированной, охарактеризованной следующей совокупностью признаков.
Предлагаемая вакцина содержит в 1 см 3 препарата: активное вещество в виде авирулентного и очищенного антигенного материала из штамма A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП, полученного предпочтительно в суспензионной культуре клеток ВНК-21 в количестве не менее 3,0 мкг и целевые добавки: ГОА предпочтительно в количестве 11000,0÷15000,0 мкг, сапонин предпочтительно в количестве 500,0÷1500,0 мкг и поддерживающую среду в количестве до 1000000,0 мкг.
Исходный вирус для получения штамма A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП выделен в 2007 году в Республике Киргизия. Штамм получен путем многократных последовательных пассажей на чувствительных гетеро- и гомологичных культурах клеток. Штамм адаптирован к первично трипсинизированным клеткам свиной почки и перевиваемым клеточным культурам ВНК-21, IBRS-2 и ПСГК-30.
Для изготовления вакцины в качестве чувствительной биологической системы используют предпочтительно суспензионную культуру клеток ВНК-21, а в качестве поддерживающей среды раствор Эрла без сыворотки с добавлением ФГМС, ГБКС и антибиотиков при pH 7,4÷7,8.
Для инактивации вируса используют АЭЭИ, который добавляют в вируссодержащую суспензию до концентрации 0,025÷0,05%. По окончании инактивации АЭЭИ нейтрализуют внесением в суспензию тиосульфата натрия .
Полученный антиген очищают от балластных примесей с помощью ПГМГ, который вносят в суспензию до концентрации 0,005÷0,007% .
Авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП представляет собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура.
Количественное и качественное содержание вирусного сырья определяют методом турбидиметрии .
Для приготовления вакцины используют вирусный материал, содержащий в 1 см 3 не менее 0,5 мкг 146S и 75S иммуногенных компонентов вируса ящура.
Необходимую концентрацию 146S и 75S иммуногенных компонентов вируса ящура в предлагаемой вакцине, составляющую не менее 3 мкг в 1 см 3 готового препарата, получают путем добавления в авирулентный и очищенный антигенный материал расчетного количества адъюванта-сорбента ГОА. Оптимальным является содержание ГОА в 1 см 3 готового препарата в диапазоне от 11000,0 мкг до 15000,0 мкг.
К полученному концентрату добавляют дополнительно 10% водный раствор сапонина из расчета 1500,0 мкг на прививную дозу. Например, для оптимальной прививной дозы 2 см 3 конечная концентрация составляет 0,075%, что соответствует 750,0 мкг его содержания в 1 см 3 готового препарата.
Полученная вакцина представляет собой жидкость светло-желтого цвета с рыхлым осадком сорбента, который образуется на дне флакона при хранении и легко разбивается в гомогенную взвесь при встряхивании.
Предлагаемое изобретение включает следующую совокупность существенных признаков, обеспечивающих получение технического результата во всех случаях, на которые испрашивается правовая охрана.
2. Активное вещество в виде авирулентного и очищенного антигенного материала из штамма A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП в эффективном количестве.
3. Целевые добавки.
Признаками изобретения, характеризующими предлагаемую вакцину и совпадающими с признаками прототипа, в том числе родовое понятие, отражающее назначение, являются:
1. Вакцина против ящура типа A инактивированная сорбированная.
2. Активное вещество.
3. Целевые добавки.
По сравнению с вакциной-прототипом существенным отличительным признаком предлагаемой вакцины является то, что в качестве активного вещества она содержит авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура типа A в эффективном количестве.
Предлагаемое изобретение характеризуется также другими отличительными признаками, выражающими конкретные формы выполнения или особые условия его использования.
1. Авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007, полученный в чувствительной биологической системе и представляющий собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура типа A.
2. Авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007, полученный предпочтительно в перевиваемой культуре клеток животного происхождения и представляющий собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура типа A.
3. Авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007, полученный предпочтительно в перевиваемой культуре клеток ВНК-21 и представляющий собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура типа A.
4. Авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП, полученный предпочтительно в перевиваемой культуре клеток ВНК-21 и представляющий собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура типа A в количестве не менее 3,0 мкг в 1 см 3 готового препарата.
5. В качестве целевой добавки вакцина содержит адъювант-сорбент ГОА.
6. ГОА предпочтительно в количестве 11000,0÷15000,0 мкг в 1 см 3 готового препарата.
7. В качестве целевой добавки вакцина содержит адъювант сапонин.
8. Сапонин предпочтительно в количестве 500,0÷1500,0 мкг в 1 см 3 готового препарата.
9. В качестве целевой добавки вакцина содержит поддерживающую среду.
10. Поддерживающая среда в количестве до 1000000,0 мкг в 1 см 3 готового препарата.
11. Авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007, полученный предпочтительно в перевиваемой культуре клеток ВНК-21 и представляющий собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура типа A, ГОА, сапонин и поддерживающую среду в соотношении, мкг:
Предлагаемая вакцина обладает высокой иммуногенной активностью и обеспечивает надежную защиту против вируса ящура серотипа A, циркулирующего в странах Закавказья, Центральной Азии, Ближнего и Дальнего Востока.
Достижение технического результата от использования изобретения достигается тем, что в состав предлагаемой вакцины введен в качестве активного вещества антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура серотипа A, обладающего высокой биологической, антигенной и иммуногенной активностью в нативном виде и после инактивации и обеспечивающего получение противоящурной вакцины сорбированной инактивированной, создающей эффективную защиту восприимчивых животных против вируса ящура серотипа A, вызывающего вспышки заболевания в последние годы в странах Закавказья, Центральной Азии, Ближнего и Дальнего Востока.
Штамм A № 2045/Киргизия/2007 является новым, ранее неизвестным . Исходный вирус для получения штамма A № 2045/Киргизия/2007 был выделен из проб афтозного материала от больной телки, поступивших в ФГУ «ВНИИЗЖ» в декабре 2007 года из Республики Киргизия (экспертиза № 2045 «Киргизия/07»). Производственный штамм A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура типа A получен путем последовательных пассажей на чувствительных гетеро- и гомологичных культурах клеток.
Полученный штамм депонирован 7 июля 2009 года во Всероссийскую государственную коллекцию штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве, Федерального государственного учреждения «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ») под регистрационным номером (ссылкой): производственный штамм A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП вируса ящура типа A.
Штамм A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП вируса ящура типа A характеризуется следующими признаками и свойствами.
Морфологические свойства
Штамм A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП относится к семейству Picornaviridae, роду Aphtovirus, серотипу A и обладает морфологическими признаками, характерными для возбудителя ящура: форма вириона икосаэдрическая, размер 23-25 нм. Вирион состоит из молекулы РНК, заключенной в белковую оболочку. Белковая оболочка состоит из 32 капсомеров, расположенных в кубической симметрии.
Антигенные свойства
По своим антигенным свойствам штамм A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура относится к серотипу A. Вирус стабильно нейтрализуется гомологичной антисывороткой. Вирус не проявляет гемагглютинирующей активности (ГА-активности). У переболевших животных в сыворотке крови образуются антитела, выявляемые в иммуноферментном анализе (ИФА) и реакции микронейтрализации (РМН). При иммунизации КРС вакциной из инактивированного вируса индуцирует образование специфических антител, выявляемых в ИФА, РДП и РМН.
При гипериммунизации морских свинок концентрированный антиген из инактивированного вируса ящура типа A штамма A № 2045/Киргизия/2007 индуцирует образование вирусспецифических и вируснейтрализующих антител, выявляемых в РСК в разведениях 1:80÷1:160 и в ИФА в разведениях 1:10000÷1:12000.
Антигенное родство штамма A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура типа A с производственным штаммом вируса ящура A 22 № 550 и штаммами, ранее выделенными на Азиатском континенте, изучено в РСК, ИФА и РМН.
Результаты исследований в РСК представлены в таблице 1. Антигенное родство (R) штамма A № 2045/Киргизия/2007 с другими вирусами ящура серотипа A составило для A/Иран/97 - 8%, A 22 /Ирак 24/64 - 28%, A/Иран/05 - 68%, A/Турция/06 - 66%, A 22 № 550 - 14%.
Результаты исследований в РМН представлены в таблице 2. Антигенное соответствие (r 1) составило для A/Иран/97 - 0,125, A 22 № 550 - 0,17, A 22 /Ирак 24/64 - 0,6, A/Турция/06 - 0,5. При значении r 1 >0,3 полевой изолят и производственный штамм являются близко родственными, и вакцина из производственного штамма будет защищать от эпизоотического вируса, при значении r 1 <0,3 полевой изолят отличается от производственного штамма, и вакцина из данного штамма не защищает от эпизоотического вируса .
Результаты исследований в ИФА представлены в таблице 3. Антигенное соответствие (r 1) составило для A 22 № 550 - 0,24, A 22 /Ирак 24/64 - 0,24, A/Иран/97 - 0,19, A/Турция/06 - 0,5. При значении r 1, равном 0,4÷1,0, полевой изолят и производственный штамм находятся в близком антигенном родстве; при значении r 1 0,2÷0,39 полевой изолят антигенно родственен производственному штамму, вакцина из производственного штамма может быть использована, если не будет найдено более родственного штамма, и при условии, что животные будут иммунизированы более 1 раза; при значение r 1 <0,2 полевой изолят отличается от производственного штамма, вакцина из которого не приемлема для защиты от заражения полевым вирусом .
Молекулярно-генетическая характеристика
Методом нуклеотидного секвенирования была определена первичная структура гена VP 1 вируса ящура типа A штамма А № 2045/Киргизия/2007 и выведена первичная структура белка VP 1. Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей показал, что штамм A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура типа A имеет близкое филогенетическое родство со штаммами A/Иран/05 и A/Турция/06 (процент нуклеотидных различий 3,82÷4,3 и 4,46÷5,57 соответственно) и значительно отличается от вакцинного штамма A 22 № 550. Кроме того, он отличается от штаммов вируса этого типа, выделенных в 1998 г. в Армении и Турции, а также в Грузии и Иране в 1999 г. (смотри дендрограмму). Степень нуклеотидных различий последовательностей штамма A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура типа A со штаммами вируса ящура серологического типа A составила: со штаммом A 22 № 550 - 18,15%, со штаммом A № 1707 «Армения-98» - 17,68%, со штаммом A/Турция/98 - 17,2%, со штаммом A (Грузия) 1999/ № 1721 - 18,79%, со штаммом A/Иран/99 - 17,68%.
Таким образом, филогенетический анализ показал, что штамм A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура типа A принадлежит к новой генетической линии вируса ящура серологического типа A.
Биотехнологические характеристики
Штамм A № 2045/Киргизия/2007 репродуцируется в монослойной культуре клеток почки свиньи (СП), перевиваемых культурах клеток ПСГК-30, ВНК-21 и IB-RS-2, и в течение 20÷24 часов инкубирования урожай вируса в указанных культурах клеток достигает значений от 6,33 до 8,25 lg ТЦД 50 -/см 3 (таблица 4). При массированном заражении (1÷10 ТЦД/клетку) вызывает ЦПД через 5 часов. Сохраняет исходные характеристики при пассировании в клеточных культурах на протяжении 10 пассажей (срок наблюдения).
Хемо- и генотаксономическая характеристика
Штамм A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура типа A является РНК-содержащим вирусом с молекулярной массой 7×10 6 Д.
Нуклеиновая кислота представлена одноцепочечной линейной молекулой молекулярной массой 2,8×10 6 Д. Вирион имеет белковую оболочку, состоящую из четырех основных белков VP 1 , VP 2 , VP 3 и VP 4 . Липопротеидная оболочка отсутствует.
Основным антигенным белком является VP 1 . В вирионе содержится приблизительно 31,5% РНК и 68,5% белка. Вирионная РНК является инфекционной и участвует в образовании белков-предшественников в инфицированных клетках. Предшественники, в свою очередь, расщепляются с образованием более стабильных структурных и неструктурных полипептидов вируса. Из 8 неструктурных полипептидов, накапливающихся в инфицированных клетках, один (BP 56a) является РНК-зависимой РНК-полимеразой, участвующей в репликации РНК новых вирионов.
Физические свойства
Масса вириона составляет 8,4×10 -18 г. Коэффициент седиментации 146S в градиенте сахарозы. Плавучая плотность 1,45 г/см 3 .
Устойчивость к внешним факторам
Штамм A № 2045/Киргизия/2007 устойчив к эфиру, хлороформу, фреону, ацетону и другим органическим растворителям и детергентам. Наиболее стабилен при pH 7,2÷7,6. Сдвиги pH как в кислую, так и в щелочную сторону ведут к инактивации вируса.
Чувствителен к формальдегиду, УФ-облучению, -облучению, высоким температурам.
Дополнительные признаки и свойства
Иммуногенная активность - иммуногенен в составе инактивированной вакцины.
Реактогенность - реактогенными свойствами не обладает.
Патогенность - патогенен для парнокопытных животных, новорожденных мышат, морских свинок.
Вирулентность - вирулентен для естественно восприимчивых животных при контактном, аэрозольном и парентеральном заражении.
Стабильность - сохраняет исходные биологические свойства при пассировании в чувствительных биологических системах в течение 10 пассажей.
Штамм A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура типа A проявляет высокую биологическую, антигенную и иммуногенную активность как в нативном виде, так и после инактивации.
Исходя из полученных данных, можно утверждать, что штамм A № 2045/Киргизия/2007 по антигенному и иммунологическому спектрам является оригинальным, в таксономическом отношении новым, ранее неизвестным вариантом вируса ящура типа A.
Для снижения его эпизоотической опасности необходима своевременная вакцинопрофилактика вновь возникающих очагов болезни, для чего необходимы актуальные высокоиммуногенные вакцины.
Проведенный заявителем анализ уровня техники, включающий поиск по патентным и научно-техническим источникам информации, и выявление источников, содержащих сведения об аналогах предлагаемого изобретения, позволил установить, что заявитель не обнаружил источники, характеризующиеся признаками, тождественными (идентичными) всем признакам предлагаемого изобретения. Определение из перечня выявленных аналогов прототипа, как наиболее близкого по совокупности признаков аналога, позволило установить совокупность существенных по отношению к усматриваемому заявителем техническому результату отличительных признаков предлагаемой вакцины, изложенных в независимом пункте формулы.
Следовательно, заявляемая вакцина соответствует уровню патентоспособности «новизна».
Для проверки соответствия предлагаемой вакцины условию патентоспособности «изобретательский уровень» проведен дополнительный поиск известных решений для выявления признаков, включенных в отличительную часть независимого пункта формулы изобретения. Результаты поиска показали, что предлагаемое решение не вытекает для специалиста явным образом из известного уровня техники, изложенного в соответствующем разделе описания (не выявлены решения, имеющие признаки, совпадающие с отличительными признаками предлагаемого изобретения), а также не выявлено влияние предусматриваемых существенными признаками предлагаемой вакцины преобразований для достижения технического результата.
Следовательно, предлагаемая вакцина соответствует условию патентоспособности «изобретательский уровень».
Сущность изобретения пояснена в перечнях последовательностей, в которых:
SEQ ID NO:1 представляет последовательность нуклеотидов гена белка VP 1 штамма A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура типа A.
SEQ ID NO:2 последовательность аминокислот белка VP 1 штамма A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура типа A.
Сущность изобретения пояснена на дендрограмме, отражающей филогенетические взаимоотношения штамма A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура серологического типа A с эпизоотическими и вакцинными штаммами вируса ящура типа A. Дендрограмма основана на сравнении полных нуклеотидных последовательностей гена VP 1 .
Сущность предлагаемого изобретения пояснена примерами его использования, которые не ограничивают объем изобретения.
Штамм A № 2045/Киргизия/2007 вирус ящура типа A был изолирован из полевого материала, поступившего в ФГУ «ВНИИЗЖ» в виде эпителия афт от КРС, подозреваемого в заболевании ящуром, при проведении лабораторной диагностики этого заболевания и дифференциации его от других везикулярных болезней. При изоляции вируса использован комплекс биологических, вирусологических и биохимических методов.
Биологические и вирусологические методы включали инокуляцию материала полевого изолята КРС и последующую адаптацию вируса к культурам первично трипсинизированных и перевиваемых линий клеток. Были использованы культуры клеток СП, ПСГК-30, IB-RS-2 и ВНК-21. Первичные и перевиваемые культуры клеток для постановки биопробы выращивали на соответствующих питательных средах в стационарных условиях во флаконах емкостью 50÷100 см 3 , отмывали от ростовой среды и заражали 10% суспензией афтозного материала (множественность заражения составляла 1÷10 ТЦД 50 на клетку), приготовленной в растворе Хенкса с 0,5% ГЛА и антибиотиками по стандартной рецептуре. Для удаления микрофлоры и балластных клеточных компонентов суспензию обрабатывали хлороформом в отношении 1:10. После 30-минутного инкубирования при 37°C во флаконы вносили по 5÷10 см 3 поддерживающей среды и инкубировали при 37°C до появления ЦПД вируса. При наличии ЦПД (округление клеток, повышение их оптической плотности, дегенерация и отделение клеток от стекла) флаконы подвергали замораживанию-оттаиванию, очистке клеточной взвеси хлороформом и центрифугированию при 3000g в течение 15 минут. Полученный вируссодержащий материал использовали для последующих пассажей и исследования в РСК и ИФА на наличие вирусного антигена, при этом использовали набор коммерческих типоспецифических сывороток и сыворотки, хранившихся в музее штаммов ФГУ «ВНИИЗЖ».
Результаты адаптации вируса к различным клеточным культурам представлены в таблице 4.
Данные, приведенные в таблице 4, свидетельствуют о хорошей адаптационной активности штамма A № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура типа A к использованным клеточным культурам.
Изолированный с помощью перечисленных методов вирус был исследован в РСК с набором диагностикумов на все типы вируса ящура, с целью идентификации типовой принадлежности.
Результаты типирования вируса в РСК представлены в таблице 5.
Приведенные в таблице 5 результаты свидетельствуют о том, что выделенный вирус относится к типу A.
Вакцину против ящура типа A инактивированную сорбированую готовят из вируса штамма A № 2045/Киргизия/2007, выращенного в суспензионной культуре клеток ВНК-21. В качестве поддерживающей среды используют раствор Эрла без сыворотки с добавлением ФГМС, ГБКС и антибиотиков при pH 7,4÷7,8. Культуру клеток заражают вирусом из расчета 0,001÷0,05 ТЦД 50 на клетку.
Культивирование вируса ведут при температуре 36÷37°C. Через 11÷13 часов инкубирования проводят подсчет живых и мертвых клеток при окраске трипановым синим. Если количество живых клеток составляет 15÷20%, то инкубирование продолжают еще 2÷3 часа. При достижении количества мертвых клеток 90÷95% культивирование прекращают и вируссодержащую суспензию контролируют на стерильность и содержание 146S и 75S компонентов. Количество 146S+75S компонентов в суспензии должно составлять не менее 0,5 мкг/см 3 .
В таблицах 6, 7, 8 и 9 приведены результаты культивирования штаммов A № 2045/Киргизия/2007, A (Грузия) 1999/ № 1721-ДЕП, A № 1707 «Армения-98-ДЕП» и A 22 № 550 вируса ящура типа A, из которых следует, что культуральные свойства перечисленных штаммов существенно отличаются по двум изученным параметрам:
1) штамм A № 2045/Киргизия/2007 имеет более короткий период репродукции (12,5 часа) по сравнению со штаммом A (Грузия) 1999/ № 1721-ДЕП и A № 1707 «Армения-98-ДЕП» (15÷16 часов);
2) штаммы A № 2045/Киргизия/2007 и A 22 № 550 дают более высокий процент выхода иммуногенных компонентов (90,1% и 89,9% соответственно) по сравнению со штаммами A (Грузия) 1999/ № 1721-ДЕП и A № 1707 «Армения-98-ДЕП» (61,5% и 58,1% соответственно).
Сразу по окончании цикла репродукции вируса, не прекращая термостатирования, в вируссодержащую суспензию добавляют 15÷20% раствор АЭЭИ, подкисленный ледяной уксусной кислотой до pH 8,0÷8,5. Конечная концентрация АЭЭИ в вируссодержащей суспензии должна быть равной 0,025÷0,05%. Инактивацию инфекционности вируса проводят в течение 12÷24 часов при 36÷37°C и pH 7,2÷7,6 с перемешиванием через 5÷6 часов в течение 3÷5 минут. Остаток АЭЭИ нейтрализуют добавлением тиосульфата натрия.
В теплую суспензию добавляют 10% раствор ПГМГ до концентрации 0,005÷0,007% для флокуляции балластных примесей и инактивации возможных контаминантов. Флокулированные балластные примеси подвергают седиментации с последующей декантацией.
В таблице 10 приведены результаты исследований по изучению влияния инактивации и очистки антигенного материала с помощью АЭЭИ и ПГМГ на иммуногенные (146S и 75S) компоненты вируса ящура штаммов A № 2045/Киргизия/2007 и A (Грузия) 1999/ № 1721-ДЕП.
Приведенные в таблице 10 данные свидетельствуют о том, что иммуногенные компоненты вируса ящура штамма A № 2045/Киргизия/2007 не уступают в устойчивости к инактивации и очистке в условиях производства вирусу ящура штамма A (Грузия) 1999/ № 1721-ДЕП. Особенно важным является тот факт, что в процессе инактивации и очистки вируса из штамма A № 2045/Киргизия/2007 не произошло существенных изменений в количестве 146S и 75S компонентов, полученных при репродукции вируса.
Полученный антиген контролируют на авирулентность, содержание вирусспецифического белка, 146S и 75S компонентов вируса и стерильность. Необходимую концентрацию 146S и 75S компонентов в прививной дозе адсорбированной вакцины получают путем концентрирования антигена ГОА.
Расчетный объем ГОА 3% концентрации добавляют в охлажденную суспензию антигена при работающей мешалке. Перемешивание ведут в течение 30 минут. После седиментации ГОА сливают расчетный объем оставшейся суспензии. Конечная концентрация ГОА должна быть в пределах 1,62±0,488 Р<0,01 мг/см 3 n=10, а концентрация 146S и 75S компонентов вируса ящура, по меньшей мере, 3,0 мкг/см 3 готового препарата. Затем в суспензию добавляют дополнительно 10% раствор сапонина до конечной концентрации 0,05÷0,15%, что соответствует 500,0÷1500,0 мкг сапонина в 1 см 3 готовой вакцины.
Полученную вакцину расфасовывают в стеклянные флаконы и проводят контроль ее стерильности в соответствии с ГОСТ 28085.
Авирулентность и безвредность вакцины проверяют на 5 головах КРС, вводя вакцину сначала под слизистую языка в дозе 2,0 см 3 , а затем подкожно в дозе 10,0 см 3 . Наблюдение за клиническим состоянием животных ведут в течение 10 суток. Авирулентную, безвредную и стерильную вакцину проверяют на иммуногенную активность на КРС или на морских свинках.
Полученная вакцина представляют собой жидкость светло-желтого цвета с рыхлым белым осадком сорбента, который образуется на дне флакона при хранении и легко разбивается в гомогенную взвесь при встряхивании.
Оптимальный компонентный состав полученной адсорбат-вакцины против ящура типа A приведен в таблице 11.
Авирулентность и безвредность вакцины проверили на 5 головах КРС. Препарат вводили каждому животному под слизистую языка в дозе 2,0 см 3 , а затем подкожно в дозе 10,0 см 3 . Наблюдение за клиническим состоянием животных вели в течение 10 суток.
По окончании контроля на авирулентность и безвредность вакцину проверили на иммуногенную активность. Испытание провели на 4 головах телят массой 70÷80 кг. Адсорбат-вакцину вводили подкожно в дозе 2,0 см 3 . Контрольное заражение телят проводили гомологичным штаммом вируса ящура на 28 день после вакцинации (ДПВ). Результаты исследований представлены в таблице 12.
Приведенные в таблице 12 данные показали, что заболел 1 теленок из 4 голов, 3 были защищены от генерализации процесса на 28 день после вакцинации. Уровень гуморального иммунитета у привитых животных составил 4,81±0,53 log 2 .
Проведены испытания адсорбат-вакцины против ящура типа A, изготовленной так, как описано в примере 2, и содержащей, мкг:
Авирулентность и безвредность полученной вакцины проверили на 5 головах КРС. Препарат вводили каждому животному под слизистую языка в дозе 2,0 см 3 , а затем подкожно в дозе 10,0 см 3 . Наблюдение за клиническим состоянием животных вели в течение 10 суток после заражения.
По окончании контроля на авирулентность и безвредность вакцину проверили на иммуногенную активность. Испытание провели на 5 головах КРС массой 250÷300 кг и 5 головах телят массой 70÷80 кг. Адсорбат-вакцину вводили подкожно в дозе 2,0 см 3 . Контрольное заражение проводили гомологичным штаммом вируса ящура на 28 день после вакцинации (ДПВ) для телят и на 90 день для быков. Результаты исследований представлены в таблицах 13÷14.
Приведенные в таблицах 13÷14 данные показали, что заболел 1 бык из 5 голов, а 4 были защищены от генерализации процесса на 90 день после вакцинации а, все 5 голов телят были защищены от генерализации процесса на 28 день после вакцинации. Уровень гуморального иммунитета у привитых животных на момент заражения составил 5,00±0,27 log 2 для быков и 6,20±0,63 log 2 для телят, что свидетельствует об эффективности испытанной вакцины.
Таким образом, приведенная выше информация свидетельствует о выполнении при использовании предлагаемой вакцины следующей совокупности условий:
вакцина против ящура типа A инактивированная сорбированная, воплощающая предлагаемое изобретение, предназначена для использования в сельском хозяйстве, а именно в ветеринарной вирусологии и биотехнологии;
Для предлагаемого изобретения в том виде, как оно охарактеризовано в независимом пункте формулы изобретения, подтверждена возможность его осуществления с помощью приведенных в заявке или известных до даты приоритета средств и методов;
вакцина против ящура типа A сорбированная инактивированная, изготовленная из штамма A № 2045/Киргизия/2007 в соответствии с предлагаемым изобретением, обладает высокой иммуногенной активностью и способна обеспечить эффективную защиту восприимчивых животных против эпизоотического вируса ящура типа A, циркулирующего в странах Закавказья, Центральной Азии, Ближнего и Дальнего Востока.
Источники информации
1. Bojko A. A. Declaration sur I apparition en URSS d un type virus aphteux different des souches de type A anterieurement etudiees dans le Pays. BOIE, 1965, 64, V. 2. - P. 1075-1077.
2. Pepep X. Ящур: пер. с нем./ Г.А.Сурковой; под ред. и с предисл. П.В. Малярца. - М.: Колос, 1971. - 432 с.
3. Ящур: монография / А.Н. Бурдов, А.И. Дудников, П.В. Малярец [и др.]. - М.: Агропромиздат, 1990. - 320 с.
4. Вирусные болезни животных / В.Р. Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьев [и др.]. - М.: ВНИИТИБП, 1998. - С.532-548.
5. Временная инструкция по изготовлению и контролю противоящурной концентрированной гидроокись алюминиевой формолвакцины из лапинизированного вируса A 22 . Утверждена ГУВ СССР 25.03.1971 г.
6. Промышленный регламент на производство вакцины против ящура типов A, O, C, Азия-1, Сат-1, Сат-2 и Сат-3 инактивированной сорбированной моно- и поливалентной (из вируса, выращенного в клетках ВНК-21): утв. Директором ФГУ «ВНИИЗЖ» 11.09.2009. - Владимир, 2009. - 216 с.
7. Промышленный регламент на производство вакцины против ящура инактивированной эмульсионной моно- и поливалентной для профилактики ящура свиней (из вируса, выращенного в клетках ВНК-21): утв. Директором ФГУ «ВНИИЗЖ» 11.09.2009. - Владимир, 2009. - 240 с.
8. Пат. РФ 2294760, МПК A61K 39/135, Вакцина инактивированная сорбированная против ящура типа A/ В.В. Михалишин, Т.Н. Лезова, А.В. Щербаков, Д.В. Михалишин, Н.С. Мамков; ФГБУ «ВНИИЗЖ» - Заявл. 21.12.2004; опубл. 10.06.2006 г. (прототип).
9. Пат. РФ 2140452, МПК A61K 39/135, Штамм N 1707 "АРМЕНИЯ-98" вируса ящура типа A для изготовления диагностических и вакцинных препаратов/ В.М. Захаров, В.К. Спирин, А.И. Гриценко [и др.]; ФГБУ «ВНИИЗЖ» - Заявл. 15.03.1999; опубл. 27.10.1999 г.
10. Пат. РФ 2242513, МПК A61K 39/135, Штамм A (ГРУЗИЯ) 1999/ № 1721 вируса ящура типа A для изготовления диагностических и вакцинных препаратов; ФГУ «ВНИИЗЖ» - Заявл. 24.11.2003; опубл. 20.12.2004 г.
11. Foot-and-mouth Disease. Sitiation worldwide and major epidemiological events in 2005-2006/ K. Sumption, J. Lubroth, T. Murrai, S. De la Rocque// Empress/Focus on. - 2007. - № 1.
12. Пат. РФ 594771, МПК A61K 39/12, Средство для инактивации вирусов при изготовлении противовирусных препаратов/ Н.А. Улупов, А.И. Дудников, П.А. Гембицкий, Д.С.Жук; ВНИЯИ - Заявл. 07.05.1973; опубл. 07.07.93 г.
13. Пат. РФ 2054039, МПК A61K 39/135, Способ очистки и стерилизации культурального вируса ящура/ Т.Н. Лезова, Н.А. Улупов, В.В. Борисов, В.В. Михалишин, А.И. Дудников, П.А. Гембицкий; ВНИЯИ - Заявл. 07.02.1992; опубл. 10.02.1996 г.
14. Авт.свид. СССР 784335, C12Q 1/02, Способ определения качества вирусного сырья/ А.Ф. Бондаренко; ВНИЯИ - Заявл. 04.07.1979; опубл. 20.03.2000 г.
15. Пат. 2451745 Российская Федерация, МПК A61K 39/135, Штамм A 2045/Киргизия/2007 вируса ящура Aphtae epizooticae типа A для контроля антигенной и иммуногенной активности противоящурных вакцин и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа A/ Е.В. Белик, В.В. Борисов, А.В. Щербаков, С.Р. Кременчугская [и др.]; ФГБУ «ВНИИЗЖ» - Заявл. 26.07.2010; опубл. 27.05.2012 г.
16. OIE. Manual of diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial animals (Mammals, Birds and Beers). - 6 th ed. - Paris, 2008. - Vol.1.- P 203÷207.
17. Selection of foot and mouth disease vaccine strains - a review/ D.J. Paton, J.F. Valacher, J. Bregman // Rev. Sci. Techn. OIE. -2005. - Vol.24, № 3. - P. 981÷993.
| Таблица 1 | |||
| Антигенный спектр штамма А № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура серотипа А по данным РСК | |||
| Сравниваемые штаммы | Показатели | ||
| r 1 | r 2 | R% | |
| А/Иран/97 | 0,05 | 0,11 | 8 |
| А22/Ирак 24/64 | 0,08 | 1 | 28 |
| А/Иран/05 | 0,46 | 1 | 68 |
| А/Турция/Об | 0,59 | 0,76 | 66 |
| А22 № 550/64 | 0,02 | 1 | 14 |
| Примечание: R s: 40% - штаммы вируса ящура относятся к одному подтипу R=(%): 25÷40 - к разным подтипам. |
|||
| Таблица 4 | ||||
| Биологические свойства вируса эпизоотического штамма А № 2045/Киргизия/2007 вируса ящура типа А | ||||
| Система репродукции вируса | Время проявления биологической активности (часы) | Количество адаптационных пассажей | Характеристика адаптированного материала | |
| Активность в РСК | Титр инфекционной активности (Ig ТЦД 50 /см 3) | |||
| СП | 20 | 3 | 1:2 | 6,5 |
| ПСГК-30 | 20 | 3 | 1:6 | 7 |
| IB-RS-2 | 24 | 4 | 1:4 | 6,33 |
| ВНК-21 | 18 | 9 | 1:12 | 7,5-8,25 |
| Таблица 5 | ||||||||||||
| Определение типа вируса в 33%-ной суспензии афтозного материала в РСК (экспертиза № 2045 «Киргизия/07») | ||||||||||||
| г/и сыворотки в рабочем разведении | Экспертиза № 2045 | Контроль | ||||||||||
| цельный | 1:2 | 1:4 | 1:8 | к/а | A/Турция/06 | О/Приморский/2000 | Азия-1 Амурский/2005 | Сат-1 | Сат-2 | Сат-3 | б/а | |
| А/Турция/06 | 4 | 4 | 3 | - | 4 | - | - | - | - | - | ||
| О/Приморский/2000 | - | - | - | - | - | 4 | - | - | - | - | - | |
| Азия-1 Амурский/2005 | - | - | - | - | - | - | 4 | - | - | - | - | |
| Сат-1 | - | - | - | - | - | - | - | 4 | - | - | - | |
| Сат-2 | - | - | - | - | - | - | - | - | 4 | - | - | |
| Сат-3 | - | - | - | - | - | - | - | - | - | 4 | - | |
| б/с | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | |
| б/к | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 | |
| Примечание: 4 - 100% задержка гемолиза; | ||||||||||||
| «-» - полный гемолиз; | ||||||||||||
| б/с - без сыворотки; | ||||||||||||
| б/а - без антигена; | ||||||||||||
| б/к - без комплемента | ||||||||||||
| Таблица 6 | |||||||
| Культивирование вируса ящура типа А штамма А № 2045/Киргизия/2007 в суспензии клеток ВНК-21 | |||||||
| № п/п | Доза заражения (ТЦД 50 /кл) | Титр вируса (Ig TLW 50 /CM 3) | ВСЕ (мкг/см 3) | ||||
| 1 | 2,2 | 0,1 | 18 | 2,0 | - | - | |
| 2 | 2,2 | 0,01 | 18 | - | 1,6 | - | - |
| 3 | 2,2 | 0,001 | 18 | - | 1,67 | - | - |
| 4 | 2,0 | 0,4 | 7 | 8,00 | 1,72 | 1,48 | 86,3 |
| 5 | 1,2 | 1,1 | 9,5 | 8,00 | 1,67 | 1,55 | 93,1 |
| 6 | 3,8 | 0,01 | 15 | 7,75 | 2,89 | 2,64 | 91,4 |
| Таблица 7 | |||||||
| Культивирование вируса ящура типа А штамма А (Грузия) 1999/ № 1721-ДЕП в суспензии клеток ВНК-21 | |||||||
| № п/п | Концентрация клеток (млн/см 3) | Доза заражения (ТЦД 50 /кл) | Длительность репродукции (часы) | ВСБ (мкг/см 3) | 146S+75S компоненты (мкг/см 3) | % выхода 146S+75S компонентов | |
| 1 | 2,5 | 1,5 | 14,0 | 8,25 | 2,93 | 1,72 | 58,7 |
| 2 | 2,5 | 1,2 | 15,0 | 8,50 | 3,12 | 1,80 | 57,7 |
| 3 | 3,0 | 1,2 | 17,0 | 8,00 | 2,06 | 1,33 | 64,6 |
| 4 | 2,6 | 1,1 | 15,5 | 8,25 | 2,71 | 1,83 | 67,5 |
| 5 | 2,3 | 1,0 | 16,5 | 7,50 | 2,38 | 1,27 | 53,4 |
| 6 | 2,8 | 1,0 | 14,5 | 7,75 | 2,27 | 1,49 | 65,6 |
| 7 | 2,7 | 0,6 | 16,0 | 7,50 | 2,06 | 1,34 | 65,0 |
| 8 | 3,1 | 0,05 | 18,0 | 7,75 | 2,31 | 1,19 | 51,5 |
| 9 | 3,5 | 0,001 | 20,0 | 7,25 | 2,54 | 1,76 | 69,3 |
| Таблица 8 | |||||||
| Культивирование вируса ящура типа А штамма А № 1707 «Армения-98-ДЕП» в суспензии клеток ВНК-21 | |||||||
| № п/п | Концентрация клеток (млн/см 3) | Доза заражения (ТЦД 50 /кл) | Длительность репродукции (часы) | Титр вируса (Ig ТЦД 50 /см 3) | ВСБ (мкг/см 3) | 146S+75S компоненты (мкг/см 3) | % выхода 146S+75S компонентов |
| 1 | 2,5 | 1,5 | 14,5 | 8,00 | 3,30 | 2,20 | 66,8 |
| 2 | 2,5 | 1,1 | 16,0 | 8,00 | 2,29 | 1,33 | 58,2 |
| 3 | 2,5 | 1,0 | 16,5 | 7,75 | 2,24 | 1,21 | 54,1 |
| 4 | 2,6 | 0,91 | 14,5 | 8,00 | 2,53 | 1,52 | 60,1 |
| 5 | 2,6 | 0,5 | 15,5 | 7,75 | 1,73 | 0,89 | 51,5 |
| Таблица 9 | |||||||
| Культивирование вируса ящура типа А штамма А22 № 550 в суспензии клеток ВНК-21 | |||||||
| № п/п | Концентрация клеток (млн/см 3) | Доза заражения (ТЦД 50 /кл) | Длительность репродукции (часы) | Титр вируса (Ig TЦД/cм 3) | ВСБ(мкг/см 3) | 146S+75S компоненты (мкг/см 3) | % выхода 146S+75S компонентов |
| 1 | 2,5 | 1,5 | 13 | 8,00 | 2,48 | 2,19 | 88,3 |
| 2 | 2,6 | 1,0 | 12 | 7,25 | 1,17 | 1,04 | 88,8 |
| 3 | 2,7 | 1,0 | 11 | 7,75 | 2,00 | 1,83 | 91,6 |
| 4 | 2,4 | 0,8 | 14 | 8,00 | 1,78 | 1,48 | 89,3 |
| 5 | 2,4 | 0,5 | 12 | 7,50 | 1,34 | 1,26 | 94,3 |
| 6 | 3,0 | 0,05 | 13 | 7,25 | 2,06 | 1,80 | 87,2 |
| Таблица 10 | ||||
| Сравнительные данные по устойчивости штамма вируса ящура А (Грузия) 1999/ № 1721 и штамма А № 2045/Киргизия/2007 к инактивации АЭЭИ и стерилизующей очистке ПГМГ | ||||
| Штамм | после культивирования | после инактивации и очистки | ||
| ВСБ м кг/мл | 146S+75S м кг/мл | ВСБ мкг/мл | 146S+75S мкг/мл | |
| А № 2045/Киргизия/2007 | 3,12 | 1,80 | 2,69 | 1,93 |
| А (Грузия) 1999/ № 1721 n=5 | 2,64±0,19 | 1,59±0,2 | 2,35±0,11 | 1,53±0,12 |
| +- | 0,48 | 0,21 | 0,34 | 0,4 |
| Таблица 11 | |||
| Оптимальный компонентный состав вакцины против ящура типа A инактивированной сорбированной | |||
| Ингредиенты | Количество (мкг/1 cм 3) | ||
| Минимум | Рекомендуемые | Максимум | |
| Авирулентный и очищенный антигенный материал в виде иммуногенных (146S и 75S) компонентов вируса ящура типа А штамма А № 2045/Киргизия/2007 | 3,0 | 3,0 | >3,0 |
| ГОА | 11000,0 | 12000,0 | 15000,0 |
| Сапонин | 500,0 | 750,0 | 1500,0 |
| Поддерживающая среда | До 1000000,0 | До 1000000,0 | До 1000000,0 |
| Таблица 12 | |||||
| № п/п | Титр BHA log 2 против A № 2045/Киргизия/2007 на ДПВ | Наличие генерализации | |||
| 7 | 14 | 21 | 28 | ||
| 1 | 5,25 | 6,25 | 5,25 | 5,00 | - |
| 2 | 4,50 | 6,50 | 6,00 | 6,25 | - |
| 3 | 5,25 | 6,25 | 5,75 | 4,00 | + |
| 4 | 3,75 | 6,50 | 6,00 | 4,00 | - |
| M±m | 4,69±0,36 р<0,001 | 6,38±0,07 р<0,001 | 5,75±0,18 р<0,001 | 4,81±0,3 р<0,005 | 1/4 |
| Таблица 13 | ||||||||||
| Результаты исследования адсорбированной вакцины против ящура типа А из штамма А № 2045/Киргизия/2007 на быках | ||||||||||
| № п/п | Наличие генерализации | |||||||||
| 7 | 14 | 21 | 28 | 35 | 56 | 77 | 83 | 90 | ||
| 1 | 5,75 | 6,00 | 5,25 | 5,75 | 5,25 | 4,50 | 5,25 | 5,25 | 5,50 | + |
| 2 | 7,00 | 6,25 | 5,50 | 6,50 | 5,50 | 4,75 | 5,00 | 5,25 | 5,00 | + |
| 3 | 7,50 | 7,00 | 7,25 | 7,00 | 5,75 | 4,75 | 5,00 | 5,25 | 5,50 | - |
| 4 | 5,25 | 6,00 | 5,50 | 5,25 | 5,50 | 5,00 | 3,50 | 4,50 | 4,00 | + |
| 5 | 7,75 | 6,25 | 5,00 | 5,25 | 4,75 | 3,75 | 3,50 | 5,25 | 5,00 | + |
| M±m | 6,65±0,49 | 6,30±0,18 | 5,70±0,40 | 5,95±0,35 | 5,35±0,17 | 4,55±0,22 | 4,45±0,39 | 5,10±0,15 | 5,00±0,27 | 4/5 |
| р<0,001 | р<0,001 | р<0,001 | р<0,001 | р<0,001 | р<0,001 | р<0,001 | р<0,001 | р<0,001 | ||
| Таблица 14 | |||||
| Результаты исследования адсорбированной вакцины против ящура типа А из штамма А № 2045/Киргизия/2007 на телятах | |||||
| № п/п | Титр ВНА log 2 против А № 2045/Киргизия/2007 на ДПВ | Наличие генерализации | |||
| 7 | 14 | 21 | 28 | ||
| 1 | 7,00 | 6,00 | 6,50 | 6,50 | - |
| 2 | 7,75 | 6,00 | 6,00 | 7,25 | - |
| 3 | 6,75 | 6,00 | 5,00 | 6,50 | - |
| 4 | 7,50 | 6,75 | 4,5 | 3,75 | - |
| 5 | 8,00 | 6,25 | 6,00 | 7,00 | - |
| M±m | 7,4±0,23 р<0,001 | 6,20±0,15 р<0,001 | 5,60±0,37 р<0,001 | 6,20±0,63 р<0,005 | 0/5 |
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Вакцина против ящура типа A инактивированная сорбированная, содержащая активное вещество и целевые добавки, отличающаяся тем, что в качестве активного вещества она содержит авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма вируса Aphtae epizooticae, сем. Picornaviridae, рода Aphtovirus, серотипа A, депонированного в коллекции ФГУ «ВГНКИ» под регистрационным номером производственный штамм вируса ящура серотипа A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП, в эффективном количестве.
2. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что она содержит авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП, полученный в чувствительной биологической системе и представляющий собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура типа A.
3. Вакцина по п.2, отличающаяся тем, что она содержит авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП, полученный предпочтительно в перевиваемой культуре клеток животного происхождения и представляющий собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура типа A.
4. Вакцина по п.3, отличающаяся тем, что она содержит авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП, полученный предпочтительно в перевиваемой культуре клеток ВНК-21 и представляющий собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура типа A.
5. Вакцина по п.4, отличающаяся тем, что она содержит авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП, полученный предпочтительно в перевиваемой культуре клеток ВНК-21 и представляющий собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура типа A в количестве не менее 3,0 мкг в 1 см 3 готового препарата.
6. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что в качестве целевой добавки она содержит адъювант-сорбент гидроокись алюминия (ГОА).
7. Вакцина по п.6, отличающаяся тем, что она содержит ГОА предпочтительно в количестве 11000,0÷15000,0 мкг в 1 см 3 готового препарата.
8. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что в качестве целевой добавки она содержит адъювант сапонин.
9. Вакцина по п.8, отличающаяся тем, что она содержит адъювант сапонин предпочтительно в количестве 500,0÷1500,0 мкг в 1 см 3 готового препарата.
10. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что в качестве целевой добавки она содержит поддерживающую среду.
11. Вакцина по п.10, отличающаяся тем, что она содержит поддерживающую среду в количестве до 1000000,0 мкг в 1 см 3 готового препарата.
12. Вакцина по любому из пп.1-11, отличающаяся тем, что она содержит авирулентный и очищенный антигенный материал из штамма A № 2045/Киргизия/2007-ДЕП, полученный предпочтительно в перевиваемой культуре клеток ВНК-21 и представляющий собой суспензию, содержащую преимущественно 146S и 75S иммуногенные компоненты вируса ящура типа A, ГОА, сапонин и поддерживающую среду в соотношении, мкг.
Острые инфекционные болезни могут наносить убытки не только большим фермам, но небольшим подворьям. Поэтому важно вовремя распознавать их симптомы и сразу приступать к лечению, тем более что многие из них опасны и для людей.
В данном обзоре рассмотрим, что такое ящур, в чем его опасность и как с ним бороться.
Этиология болезни
Возбудителем этого недуга является один из самых маленьких по размерам вирусов - Dermaphilus, содержащий РНК. Несмотря на маленький размер, обладает большой вирулентностью (способностью к заражению).
Ярко выражена дерматотропность - чаще всего заболевание начинается с заражения участков кожи или поврежденных слизистых оболочек у . Распространяется через сырое , мясо и продукты выделения.
Кроме употребления молока или непроваренного мяса в пищу, для человека опасен и контактный путь заражения - ветеринары знают, что, прикоснувшись к зараженному участку, есть риск «подцепить» такую болезнь. Это касается и частиц слизи. К счастью, человек не особо восприимчив к его действию, чего не скажешь о животных (особенно парнокопытных).
Сложность в том, что вирус неплохо переносит высушивание и замораживание и отлично сохраняется в и продуктах, которые получены от больных животных. Так, на шерсти он может продержаться 25–27 суток, а в молоке при +4 °С - от 10 до 12 дней. Если такой штамм попал на одежду, то этот срок будет еще большим - до 3,5 месяцев.
Вирус ящура довольно быстро (4–5 минут) гибнет при кипячении, не переносит солнечных лучей. Щелочные и формалиновые растворы тоже помогают в борьбе с ним.
Всего существует 8 штаммов этого вируса. В наших условиях основными являются типы А и О, другие возбудители проявляются редко.
Знаете ли вы? Последняя на данный момент крупная вспышка была зафиксирована в Великобритании. В 2001 году там насчитывалось около тысячи очагов болезни - эпизоотию вызвал штамм О, который нанес экономике ущерб в $20 млрд.
Первые симптомы
Инкубационный период вируса обычно составляет 2–4 дня, но часто он затягивается. К примеру, у свиней он может длиться 7–8 суток, а у - до 2–3 недель. В этот период видимых причин для беспокойства нет, хотя болезнь прогрессирует быстро.
Тревожными сигналами являются:
- общая слабость животного и потеря аппетита;
- кратковременное повышение температуры;
- длительный понос;
- животные начинают припадать на передние конечности, хромать (это характерно, если ящур затронул КРС);
- вялость жвачки;
- усиленное слюновыделение;
- в некоторых случаях животное не в состоянии открыть рот.
Течение болезни
Заболевание протекает в острой форме. У взрослых животных она обычно принимает доброкачественную форму, тогда как злокачественная (она же - атипичный ход) наблюдается крайне редко.
У разных животных действие инфекции протекает с учетом особенностей вида и породы.
Начнем с . По истечении скрытого срока (1–3 дня, но бывает и от 7 до 20 суток) животное вовсе отказывается от корма, пульс учащается, прекращается жвачка. На 2–3 сутки активной фазы внутри губ, на слизистой оболочке щек, языке и краях челюсти появляются афты (сыпные пузырьки).
В сложных случаях такие образования видны на вымени и между копытами. Поражение всех конечностей встречается редко, чаще это хромота на одну пару ног.
Важно! После того, как больное животное вывели из помещения, инвентарь и саму постройку нужно обработать дезраствором - 1%-й хлорамин достаточно силен.
Через 12–24 часов после появления афты разрываются, образуя эрозию. В это же время температура приходит в норму, хотя слюнотечение остается обильным, а по углам рта видна пена. «Язвочки» заживают за неделю, но при осложнениях этот процесс может занять 13–20 суток.
На конечностях можно увидеть те же афты и припухлости. Они также лопаются и заживают через 4–8 дней. Если поражение велико по размерам, то есть риск гнойных заболеваний, возможно даже отслоения роговицы.
Афты у дойных коров воспаляют сосковые каналы, больные четверти работают с нарушениями. Это проявляется в изменении состава молока: оно становится слизистым и горьким. Если сосковый канал перекрыт струпьями, то начинается . При этом продуктивность снижается до 60–75 %, а на ее восстановление уходят месяцы.
Особенно опасно такое заболевание, как ящур, для телят. Они не страдают от афтов, но болезнь сопровождается сильными сбоями желудочных путей. Если помощь опоздала - может начаться падеж.
«Чистый» тип вируса прекращает свою деятельность уже через 7–10 суток. При фоновых осложнениях болезнь длится гораздо дольше, вплоть до месяца. В основном это проблемы, связанные с желудочными и лактальными магистралями.
С атипичной формой еще сложнее: идущее на поправку животное резко «сдает», отказывается есть, у него парализуются задние конечности. Такой перепад может наступить через 6–10 дней после начала болезни. Это бьет по сердцу, и смертность, доходящая до 20–40 %, в таких случаях связана с его остановкой.
Знаете ли вы? Ящур давно досаждает животноводам: первое клиническое описание для животных еще в 1546 году дал врач Д. Фракастро. Аналогичную картину для людей описали гораздо позже немцы Фрош и Леффлер, доказавшие в 1897 году вирусную природу заболевания.
У эпидемия ящура проходит еще острее, не щадя молодняк. После 1–2 дней инкубации появляется лихорадка, падает аппетит. Конечности поражены, свиньи часто хромают (могут даже спадать их копытца). Афты видны на молочных железах, пятачках, а в ротовой полости наблюдаются редко. Тяжелый ход болезни сопровождается кровавыми поносами и слизью, кровоизлияниями в почках и легких.
Взрослые особи болеют долго: от недели до 20–25 суток. Для поросят ящур и вовсе смертелен (падеж составляет минимум 60 %), наиболее опасными считаются первые два дня активности вируса.
С козами немного легче. После 2–7 дней скрытого периода пропадает аппетит, животное лихорадит, оно начинает хромать. При этом ему трудно открыть рот, можно услышать скрежет зубов.
Афты появляются на копытах, нижней челюсти, губах и вымени.
Из них течет клейкая жидкость. Козы более стойки к ящуру, и осложнения возникают редко.
Полное выздоровление наступает через две недели.
Овцы после 2–3 дней латентного периода прихрамывают, временами прекращают жвачку и мало двигаются. Температура может дойти до 41–41,5 °С.
В случае с ними афты мелкие, быстро лопаются и рано заживают. Район поражения тот же: копытные щели и венчик, десна, язык и губы, верхняя челюсть до зубов.
Выздоравливают овцы спустя 10–12 суток. Ягнята часто гибнут из-за осложнений вроде септицемии (поражения тканей и кровеносной системы).
Важно! Больным перед едой дают 0,1 г анестезина, который немного сглаживает неприятные ощущения, возникающие при еде.
Но есть один нюанс: в больших отарах вирус действует замедленно и слабо, так что его действие не видно. Такой замедленный ход очень опасен и может длиться 3–4 месяца или до перехода в острую форму.
Лечение больных животных
Из-за многообразия проявлений вируса промышленность не выпускает универсальных (за исключением иммунолактона, и то не всегда он подходит). Поэтому лечение сводится к устранению симптомов.
Больное животное сразу же изолируют, подсыпают чистую подстилку и дают обильное питье - хватит и чистой воды. При этом воздух в помещении должен быть свежим, не спертым. Животным обеспечивают покой, стараются не перегонять без особой нужды (это дает лишнюю нагрузку на слабый организм, особенно на сердце).Пища - легкоусваиваемая: летом это трава, зимой дают мягкое сено или качественный силос.
Если ящур у животных проходит в обычной форме, лечебные меры сводятся к таким действиям:
- Ротовую полость полоскают слабыми растворами марганцовки (0,1 %) или фурацилина (0,5 %). Подходит и уксусная кислота в концентрации 2 %.
- При сильных поражениях слизистой оболочки рта берут мази на основе медного , анестезина или новокаина. Рыбий жир тоже пригодится.
Знаете ли вы? Вакцинация в ее нынешнем виде - во многом заслуга Луи Пастера. Его наследие и трудолюбие впечатляют: изготовив в 1881 году препараты против «сибирки», он уже через четыре года смог «нейтрализовать» бешенство при помощи вакцины.
- Ежедневно чистят конечности. Копыта и венчики обрабатывают составом из дегтя и рыбьего жира в равной пропорции. Чтобы закрепить результат, животное проводят через опилки, которые пропитаны дегтем. На больших фермах в тех же целях делают формалиновые ванны (5%-й раствор).
При тяжелых формах болезни делают следующие манипуляции:
- Сильно пораженные участки конечностей смазывают йодом. Расчистив копытце, убирают мертвую ткань и прижигают ранку порошком (по ½ перманганата и стрептоцида), после чего накладывают повязку.
- Афты на вымени обрабатывают новокаиново-трипофлавиновой мазью на основе вазелина. С ним же мешают и (15 % от объема). Помогает и синтомициновая мазь.
- Если осложнение проявляется в сепсисе, вводят внутривенно слабый новокаиновый раствор в 0,5 %. Берут 0,5 мл смеси на 1 кг веса.
- Используют и мучную болтушку, которую заливают через зонд ежедневно, по 15–20 л.
- Для укрепления сердечной мышцы готовят микстуру: в 400 мл дистиллированной воды добавляют 6 г бромкалия, 10 мл валериановой настойки и 15 мл ландыша. Это доза на один прием.
Профилактика
Ящур, как и любую вирусную болезнь, легче предупредить, чем лечить.
Главное место отводится вакцинации. Чаще всего вводят сапониновый состав в количестве 1 мл. Он начинает действовать через 10–14 дней, выходя на защитный пик максимум через месяц.
Иммунитет длится от 6 месяцев до года. КРС ревакцинируют раз в год, тогда как свиньям приходится делать по две прививки ежегодно.
Учитывают и возраст: у телят, например, «материнский» иммунитет очень силен и первые 3 недели может перебивать действие вакцины. У коз и ягнят он куда слабее, а поросята практически не защищены.
Остальные профилактические меры во многом традиционны:
- регулярная уборка помещения со сменой подстилочного ;
- размещение скота по нормам (никакой тесноты);
- периодический осмотр животного, особое внимание уделите ротовой полости, состоянию кожи, шерсти и копытным пластинкам;
- применение качественного корма, воды и добавок;
- ограничение контакта с уже зараженными животными (к примеру, не выводить на одно пастбище).
Опасен ли ящур для человека?
Как мы помним, такой вирус неохотно перебрасывается на людей, хотя его опасность не стоит преуменьшать.
К группе риска относят людей, которые работают непосредственно с животными: ветеринары, доярки, пастухи, работники боен и мясокомбинатов. Но и на подворье можно заразиться через контакт или употребление мяса и молока от больной «скотинки».
Ящур является опасной болезнью крупного рогатого скота, он очень заразен, и поэтому быстро распространяется, имеет отрицательные последствия не только для сельского хозяйства, но и для всей экономики. Ящур передаётся от животных человеку, к счастью, зачастую он вылечивается без следа, но исключения также случаются, поэтому следует знать, как вовремя распознать эту болезнь у животных.
Что это за болезнь
Ящур – вирусное заболевание, которое встречается у всех парнокопытных, в том числе диких, но больше всего ему подвержен крупный рогатый скот (КРС). Причём болеют животные независимо от возраста, хотя молодняк быстрее заражается и тяжелее переносит болезнь. Следует отметить, что ящур распространён по всему миру.
Возбудитель, источники и пути заражения
Возбудителем ящура является крошечный вирус сложного белкового состава, его диаметр всего лишь 10–30 нанометров. Он относится к РНК-содержащим вирусам, род – риновирусы, семейство – Picornaviridae.
По своим свойствам вирус ящура подразделяется на семь типов – О, А, С, САТ-1, САТ-2, САТ-3 и Азия-1, каждый из которых, в свою очередь, имеет несколько вариаций. Количество вариантов постоянно изменяется, поскольку вирус эволюционирует и появляются новые.
И если животное переболело ящуром какого-то вида, то это не исключает инфицирования другим типом вируса.
Источники данного вируса:
- заболевшие животные, в том числе и те, которые находятся в инкубационном периоде;
- вирусоносители (те коровы, которые уже переболели, могут быть опасными более года).
У больных животных можно обнаружить вирус в молоке, слюне, моче и кале, поэтому возбудители ящура без проблем попадают во внешнюю среду. Результатом этого является заражение коровников, дворов для выгула, различного инвентаря, кормушек, пастбищ, водоёмов, кормов.
Знаете ли вы? Существует акция, называемая «Парадом коров». Во время её проведения на улицах городов или в галереях устанавливают расписанные художниками статуи коров из стекловолокна, после эти творения продаются, а вырученные средства отправляются на благотворительность.
Заразиться корова может такими путями:
- при приёме пищи через слизистую оболочку полости рта;
- через повреждённую кожу вымени и конечностей;
- воздушно-капельным путём при наличии рядом больных особей.
Инкубационный период и признаки ящура у коров
Период инкубации длится от 2 до 7 суток. Болезнь протекает всегда остро. У КРС может быть две формы ящура – доброкачественная и злокачественная.
Рассмотрим признаки доброкачественной формы по мере развития недуга:
- Ухудшение аппетита и замедление процесса пережёвывания жвачки.
- Повышение температуры до 40,5–41,5 градусов, слизистая оболочка рта – горячая и сухая.
- Учащённые пульс и дыхание.
- Полный отказ от еды и резкое снижение выработки молока.
- На второй-третий день от начала заболевания – появление пузырьков (афт) во рту, в носу и на крыльях носа, жидкость внутри них сначала прозрачная, потом – мутнеет.
- Появление эрозий на месте лопнувших афт.
- Обильное слюнотечение, трудности с поеданием корма, жажда.
- Отёчность кожи в районе копыт, присутствует хромота.
- Возможны тахикардия и аритмия, а также нервные расстройства.
Большинство заболевших коров выздоравливают через 3–4 недели с момента заражения при условии хорошего ухода и адекватного лечения. Смертность в этом случае совсем небольшая – до 0,5%.
Признаки злокачественной формы ящура, кроме поражения афтами слизистых и кожи, следующие:
- Серьёзные нарушения сердечной деятельности, вплоть до паралича сердца.
- Нарушения в работе системы кровообращения.
- Угнетённое состояние, судороги.
- Одышка, хрипы.
К сожалению, эта форма характеризуется большой смертностью, до 70%.
Ящур в злокачественной форме наблюдается чаще всего у молодых особей КРС. Телята болеют несколько иначе: в возрасте до двух месяцев у них афты не образуются, но присутствуют острый , сепсис, миокардит, сильная депрессия.
Заболевшие малыши не хотят сосать молозиво. Погибнуть они могут уже в течение первых суток, а смертность может достигать 60%.
Диагностика
В основе диагностики ящура лежат:
- эпизоотологические данные;
- клинические признаки заболевания;
- патологические изменения при вскрытии;
- лабораторные исследования.
Важно! При первых признаках этого опасного заболевания немедленно принимайте меры по ранней диагностике.
Когда у коров или телят появляется сыпь во рту, в области вымени, на конечностях, слюнотечение, хромота, нежелание жевать корм, то это должно вызвать подозрение на ящур.
Для проведения лабораторных исследований отбираются стенки афт, которые ещё не лопнули (не менее 5 граммов). Собранный материал обязательно нужно поместить в консервант, представляющий из себя смесь химически чистого глицерина и фосфатно-буферного раствора pH 7,4–7,6, взятых в равных количествах.
Далее ёмкость с консервантом плотно укупоривают и, предварительно завернув в вату, закрывают в металлический водонепроницаемый контейнер. Всё это доставляется в соответствующие ветеринарные службы, строго соблюдая меры безопасности.
В лаборатории, используя различные специфические реакции, устанавливается наличие вируса, который вызывает ящур. Если вирус выявлен, то далее проводятся биологические исследования, которые помогут определить тип и вариант возбудителя болезни.
Надо отметить, что появление пузырьков с жидкостью в ротовой полости и на вымени коровы не всегда говорит о наличии опасного заболевания, такой же признак характерен для стоматита и дерматита, оспы, .
Патологоанатомические изменения
В случае доброкачественного течения болезни, как мы уже отмечали, смерть заболевших животных происходит очень редко. При патологоанатомическом осмотре умерших особей наблюдаются афты и эрозии на слизистой оболочке рта, в области рубца, а также на коже носового зеркальца, где нет волос, губах, сосках, венчике и межкопытной щели.
Иногда подобные поражения находятся вокруг анального отверстия.
А вот в случае злокачественного ящура, кроме вышеизложенных признаков, обнаруживаются изменения в скелетной мускулатуре и сердечной мышце. Установлено, что главной причиной смерти больных животных является поражение миокарда.
Когда производят внешний осмотр сердца и разрез миокарда, обнаруживают небольшие очаги поражения жёлто-серого цвета в виде пятен или полосок различной величины и формы.
В мышцах спины, конечностей, языка и некоторых других можно найти поражения мышечных волокон в виде желтоватых студнеобразных серозных инфильтратов.
В особо тяжёлых случаях при вскрытии выявляются кровоизлияния, которые сосредоточены в пищеварительном тракте, лёгких, почках, печени и даже в головном и спинном мозге. Также можно обнаружить серозные инфильтраты в подкожной клетчатке, соединительной ткани, на стенках кишечника.
Лечение ящура у коров
Вследствие того, что существует большое количество разновидностей вируса ящура, которые ещё и постоянно мутируют, не выпускают каких-либо ветпрепаратов для лечения этого опасного заболевания. В этом деле главное – хороший уход и борьба с симптомами.
Общие мероприятия
Первым делом необходимо изолировать заболевших животных в отдельное помещение. Оно должно быть чистым, с хорошей вентиляцией и комфортной температурой. На пол должна быть постелена мягкая чистая подстилка, обладающая гигроскопическими свойствами. Это могут быть торф, опилки.
Важно! В период болезни коровы очень уязвимы для других вирусов и инфекций, поэтому им жизненно необходимы чистота и уход, чтобы избежать появления вторичного инфицирования.
Кормить больных коров нужно только мягкими кормами. Рекомендовано давать болтушку из муки, зелёную траву, качественный . Обязательно обеспечьте животных чистой питьевой водой в достаточном количестве.
Специальные средства
Важным аспектом при лечении КРС является обработка поражённых афтами и эрозиями участков.
Для слизистой оболочки ротовой полости используются:
- 2-процентная уксусная кислота;
- раствор марганцовки – 0,1%;
- фурацилин – 0,5%;
Если поражения обширные и вызывают болевые ощущения, то необходимо обезболивание, чтобы животное могло нормально поесть.
Для этого делают следующую смесь:
- новокаин;
- анестезин;
- медный купорос.
Соотношение ингредиентов: 1:1:2, а в качестве основы используют вазелин или рыбий жир. Такую мазь наносят на поражённые участки во рту незадолго до приёма пищи.
Для обработки конечностей используют смесь дёгтя и рыбьего жира в равных долях, а если присутствуют значительные воспаления, то применяют йод или стрептоцид в растворе марганцовки.
Можно принимать ножные ванны, для этого берут:
- раствор формальдегида – 2%-й;
- раствор едкого натра – 0,5%-й;
- эмульсию креолина или лизола – 2–3%-ю.
Всё это добавляют в специальные ёмкости с чистой водой комфортной температуры и прогоняют через них коров. Все вышеперечисленные ножные процедуры проводят ежедневно.
Кроме наружных лечебных средств, используют специфические препараты для приёма внутрь.
В этих целях применяют:
- иммунолактон;
- лактоглобулин;
- сыворотку из крови реконвалесцентов (это те особи, которые уже переболели и выздоровели).
Знаете ли вы? В Австралии через несколько десятилетий после начала разведения коров остро встала проблема навоза: местные жуки не могли его перерабатывать, поскольку были настроены» на фекалии сумчатых животных. Выход нашёлся, навозников завезли с африканского континента.
В тяжёлых случаях больным коровам дают сердечные средства для нормального функционирования сердца. Для придания сил рекомендуют вводить внутривенно глюкозу или просто давать животному по стакану мёда ежедневно.
Профилактика и вакцинация КРС
Такие опасные болезни, как ящур, легче предупреждать, чем лечить. И в настоящее время противоящурные мероприятия по всему миру привели к тому, что на большинстве территорий сложилась благополучная ситуация. Но тем не менее существуют отдельные очаги заболевания, поэтому очень важны профилактические меры.
В вопросах профилактики ящура существует 4 метода, которые применяются в разных странах:
- Вакцинация не проводится, полностью ликвидируются все инфицированные и потенциально заражённые особи.
- Проводится иммунизация исключительно вокруг очага болезни, а в самом очаге животные уничтожаются.
- Проводятся регулярные прививки КРС с целью профилактики в зонах, граничащих с очагом поражения, в самом очаге все больные особи уничтожаются, а вокруг него делается вакцинация;
- Заражённые особи ликвидируются, проводится интенсивная вакцинация и карантинные мероприятия.
Надо сказать, что первый метод применяется лишь в развитых странах с крепкой экономикой, поскольку приносит значительный материальный ущерб. Все остальные используются с учётом ситуации, географического положения и развития животноводства.
К профилактическим мерам можно отнести контроль ветеринарных служб на границах государств, постоянное проведение мероприятий, направленных на повышение санитарной культуры на животноводческих предприятиях и среди населения. Кроме этого, необходим контроль перемещения животных, поставок продуктов и сырья.
Важно! Вирус ящура устойчив ко многим химическим веществам, которые традиционно используются для дезинфекции помещений, например, к хлорной извести. Лучше всего обрабатывать инфицированные коровники растворами 2-процентного формальдегида и 1-2-процентного едкого натра.
И, наконец, вакцинация, которая проводится на многих фермах и предприятиях, выращивающих КРС, считается очень эффективной мерой профилактики ящура.
Для её проведения используются специальные гипериммунные сыворотки, а также вакцины, полученные из крови вирусоносителей. Когда вакцинация корове проводится первый раз, то по истечении 21 дня у неё формируется иммунитет, который сохраняется целый год.
Подводя итоги, скажем, что ящур, несомненно, крайне опасное заболевание КРС. Очень важно чётко знать его первые специфические признаки, чтобы вовремя принять меры по лечению, ведь на начальной стадии это сделать намного проще.